醫(yī)院臨床標本中真菌的分離培養(yǎng)與耐藥性分析

胡麗杰，祝云霞

（1.南京市浦口區(qū)中心醫(yī)院檢驗科，江蘇南京211800；2.南京市浦口區(qū)衛(wèi)生學(xué)校，江蘇南京210038）

醫(yī)院臨床標本中真菌的分離培養(yǎng)與耐藥性分析

胡麗杰1，祝云霞2

（1.南京市浦口區(qū)中心醫(yī)院檢驗科，江蘇南京211800；2.南京市浦口區(qū)衛(wèi)生學(xué)校，江蘇南京210038）

目的了解醫(yī)院內(nèi)真菌感染的現(xiàn)狀，調(diào)查臨床標本中真菌感染情況及其對常用抗真菌藥物的耐藥情況。方法各種臨床標本按常規(guī)方法分離培養(yǎng)，將酵母樣真菌轉(zhuǎn)種到法國科瑪嘉生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基鑒定，并用K-B法進行藥敏試驗。結(jié)果從臨床標本中分離出真菌472株，其中首位為白色念珠菌（60.2%），檢出真菌最多的部位是呼吸道，以50歲以上的中老年人居多。藥敏結(jié)果顯示，多數(shù)真菌對兩性霉素B和5-氟胞嘧啶較敏感。結(jié)論真菌感染是目前臨床耐藥和醫(yī)院面臨的主要問題，其在臨床上呈上升趨勢且產(chǎn)生了耐藥株，重視用藥前真菌的培養(yǎng)鑒定和藥敏試驗，以指導(dǎo)臨床合理選擇抗真菌藥物，減少多重耐藥。

醫(yī)院臨床標本；真菌；分離培養(yǎng)；耐藥性分析

1 材料與方法

1.1 標本來源

標本均來源于2008年7月~2009年11月在醫(yī)院的住院患者，包括深部咯痰、氣管導(dǎo)管吸出物、支氣管鏡套管吸出物等呼吸道標本以及胸腹水、中段尿、膿液、引流液、糞便、血、插管等標本，嚴格按有關(guān)規(guī)定收集標本送檢。

1.2 方法

將患者標本接種于沙保羅培養(yǎng)基中，35℃孵育24～48小時。經(jīng)涂片、染色、鏡檢確認為真菌生長后，轉(zhuǎn)種到法國科瑪嘉生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基及杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)的酵母樣真菌生化鑒定管進行鑒定，同時采用K-B法（紙片擴散法）做藥敏試驗。

1.3 抗真菌藥物

氟康唑（FC Z）、兩性霉素B（A MB）、伊曲康唑（IT R）、5-氟胞嘧啶（5-FC）均由英國O xp i d公司提供。

2 結(jié)果

2.1 臨床真菌的標本來源分布情況（見表1）

472株真菌主要來源于呼吸道標本316株（66.9%）、尿液79株（16.7%）、大便49株（10.4%）、膿液分泌物13株（2.8%）、胸腹水11株（2.3%）、血液4株（0.9%）。

表1 臨床真菌標本來源分布情況

2.2 臨床常見真菌的菌種分布（見表2）

在所分離到的472株真菌中,白色念珠菌所占比例最高,為60.2%（284株），熱帶念珠菌占13.1%（62株），光滑念珠菌占8.7%（41株）,克柔念珠菌占5.7%（27株），其他真菌有58株，占12.3%。

2.3 真菌感染的人群分布

表2 臨床常見真菌的菌種分布

從性別上看，真菌感染的人群中，男性有297例，占62.9%，女性有175例，占37.1%；從年齡分布上看，0～30歲之間的有97例（20.6%），31～50歲之間的有149例（31.5%），50歲以上的有226例（47.9%）。

2.4 真菌的藥敏試驗

臨床分離出的472株真菌對4種抗真菌藥物的敏感率結(jié)果見表3。

表3 臨床真菌標本藥敏試驗[n（%）]

3 討論

真菌，是人類常見的條件致病性真菌之一，也是重要的病原真菌，常寄居在正常人的皮膚、口腔、陰道和腸道中，易感于免疫功能缺陷或抑制、微生態(tài)失衡等，引起皮膚、黏膜、皮下組織或系統(tǒng)性感染[1]。患者在治療過程中大量使用廣譜抗生素、免疫抑制劑和激素，破壞了宿主體內(nèi)的正常菌群，極易引發(fā)真菌感染及耐藥[2]。各種插管、導(dǎo)管的使用導(dǎo)致了皮膚黏膜屏障結(jié)構(gòu)的損傷，并造成獲得性真菌感染。此外，外界真菌隨探視人員、醫(yī)護人員或某些物品等媒介帶入病房交叉?zhèn)鞑?，引起院?nèi)真菌交叉感染等[3]。在醫(yī)院感染中，真菌感染呈逐年上升趨勢。

本研究顯示，院內(nèi)真菌感染主要為白色念珠菌的感染，占60.2%，并且感染部位以呼吸系統(tǒng)為主，檢出的標本多為痰。主要感染人群為50歲以上的中老年人，以男性居多。主要原因是隨著年齡的增長，身體各部分機能衰退，呼吸道上皮細胞清除功能下降，加上各類抗生素的泛用，多繼發(fā)真菌感染[4]。

臨床上用藥時往往忽略真菌的藥敏試驗，但是，隨著臨床常用藥物的耐藥性增多，真菌藥物種類的增加，真菌的耐藥率也有所提高[5]。因此，對臨床標本分離培養(yǎng)出的真菌進行體外藥敏試驗并對真菌耐藥性進行連續(xù)性監(jiān)測是非常重要的[6]。本實驗藥敏結(jié)果顯示，臨床真菌標本對這4種藥物均有不同程度的耐藥。但是這4種藥物的敏感性也很好，均大于90%。其中兩性霉素的藥物敏感性最高，達99.3%，僅有6株耐藥，可以作為臨床上首選抗真菌藥物。

真菌的耐藥性雖然不高，但是真菌的特性決定了其病程長而且反復(fù)的特點，尤其對多重細菌感染的患者來說是較危險的。因此，要重視臨床標本中真菌的分離培養(yǎng)和藥敏試驗，對真菌的耐藥性進行連續(xù)監(jiān)測，周期性地進行院內(nèi)感染監(jiān)測，以減少真菌的傳染及耐藥性的提高。

[1]BonduelM，Santos P，Turienzo CF，etal.Atypical skin lesions caused byCurvulariasp and Pseudal lescheriaboy diiin twopatientsafterallogeneic bonemarrow transplantation[J].BoneMarrow Transplant，2001，27（12）:1311～1313.

[2]Aoun M，Crokaert F，Paesmans M，et al.Inipenem versus targeted therapy in cancer patient[J].Int JAntimcrob Agents，1998，10（4）∶263～264.

[3]吳愛武.院內(nèi)感染標本分離的260株念珠菌調(diào)查與分析[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2000，15（3）：172～173.

[4]錢小順，朱元玨.127例肺部真菌感染的臨床分析[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2000，23（7）：417～419.

[5]楊玉芳，何佩貞，吳闖.32例醫(yī)院真菌感染臨床分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2002，12（2）:125～126.

[6]黃云昆，夏星.臨床標本中酵母樣真菌的分離及耐藥性現(xiàn)狀分析[J].臨床檢驗雜志，2003，21：60～61.

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1671-1246（2011）04-0077-02