聯(lián)苯雙酯片溶出度測(cè)定法研究

王愛華，白政忠

（黑龍江省食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)所，黑龍江 哈爾濱150001）

聯(lián)苯雙酯及聯(lián)苯雙酯滴丸收載于2010版中國(guó)藥典，聯(lián)苯雙酯片標(biāo)準(zhǔn)為化藥地標(biāo)升國(guó)標(biāo)第10冊(cè)WS－10001－（HD－0995）－2002標(biāo)準(zhǔn)［1］，其化學(xué)名為4，4′－二甲氧基－5，6，5＇，6′－二亞甲二氧基－2，2′－二甲酸甲酯聯(lián)苯，簡(jiǎn)稱DDB。聯(lián)苯雙酯在臨床上主要用于慢性、遷延性肝炎的治療［2］。雖然聯(lián)苯雙酯及其制劑收載于中國(guó)藥典，但中國(guó)藥典并未收載其制劑溶出度標(biāo)準(zhǔn)，并且由于聯(lián)苯雙酯在水中溶解度較差，因此應(yīng)建立體外溶出度檢查項(xiàng)目，作為評(píng)價(jià)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的一項(xiàng)指標(biāo)。本文采用紫外分光光度法測(cè)定聯(lián)苯雙酯片的溶出度以完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與試藥

RCZ－8B溶出度儀（天津大學(xué)精密儀器廠）；UV－2550PC紫外分光光度計(jì)（SHIMADZU公司）；聯(lián)苯雙酯片（黑龍江瑞格制藥有限公司，批號(hào)：060804；060805；060806）；聯(lián)苯雙酯原料（黑龍江瑞格制藥有限公司提供）；聯(lián)苯雙酯對(duì)照品（中國(guó)生物制品檢定所，批號(hào)：100192－200503）；十二烷基硫酸鈉（中國(guó)生物制品檢定所）；試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出度測(cè)定方法的建立

2.1.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

精密稱取聯(lián)苯雙酯對(duì)照品約12.5mg，置100mL量瓶中，加乙醇約80mL，于水浴中加熱使溶解，放冷，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置100mL量瓶中，加1%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，取溶液，照紫外分光光度法，在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，聯(lián)苯雙酯在281nm處有最大吸收，試驗(yàn)結(jié)果見圖1。

圖1 聯(lián)苯雙酯紫外掃描

2.1.2 專屬性

按處方比例，分別稱取處方量輔料適量，制成同聯(lián)苯雙酯對(duì)照品濃度的輔料濃度，同法測(cè)定，空白輔料在281nm波長(zhǎng)處無(wú)吸收，不影響聯(lián)苯雙酯片吸收度的測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果見圖2。

圖2 空白輔料紫外掃描

2.1.3 線性關(guān)系

精密稱取聯(lián)苯雙酯對(duì)照品12.98mg，置50mL量瓶中，加乙醇約40mL，于水浴中加熱使溶解，放冷，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，制成儲(chǔ)備液，精密量取儲(chǔ)備液，加1%十二烷基硫酸鈉稀釋至刻度，制成濃度為5.192、10.384、15.576、25.96、31.152μg·mL－1的樣品，在281nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以聯(lián)苯雙酯對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，吸收度為縱坐標(biāo)，結(jié)果表明，當(dāng)聯(lián)苯雙酯的濃度在5.192～31.152μg·mL－1范圍內(nèi)，濃度C與吸收度A呈線性關(guān)系，回歸方程為：A＝0.029 8C＋0.010 14，r＝0.999 9。

2.1.4 回收率試驗(yàn)

取聯(lián)苯雙酯原料藥適量（約相當(dāng)于聯(lián)苯雙酯標(biāo)示量25mg的80%、100%和120%量，各3份），分別置100mL量瓶中，每瓶中分別加處方量輔料，加乙醇約80mL，于水浴中加熱使聯(lián)苯雙酯溶解，放冷，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL，置100mL量瓶中，加1%十二烷基硫酸鈉稀釋至刻度，搖勻，照紫外分光光度法在281nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，計(jì)算平均回收率為100.1%，RSD為0.5%。試驗(yàn)結(jié)果表明，本試驗(yàn)方法回收率良好。

2.1.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取濃度為10 384μg·mL－1的樣品，分別于0、1、2、4、8h測(cè)樣，其吸收度分別為0.323、0.324、0.323、0.325、0.327，RSD為0.6%。試驗(yàn)結(jié)果表明，本供試品在8h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2 溶出試驗(yàn)條件的選擇

2.2.1 溶出介質(zhì)的選擇

取聯(lián)苯雙酯原料藥過(guò)量，置于溶出杯中，分別采用0.05%十二烷基硫酸鈉溶液（SDS）、0.1%十二烷基硫酸鈉溶液、0.5%十二烷基硫酸鈉溶液、1%的十二烷基硫酸鈉溶液、0.5%吐溫－80溶液、1%吐溫－80溶液、20%的乙醇溶液、40%的乙醇溶液、20%的異丙醇溶液、25%的異丙醇溶液、30%的異丙醇溶液、35%的異丙醇溶液、40%的異丙醇溶液為溶出介質(zhì)，溶出介質(zhì)體積為1 000mL，照溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典2005年版附錄ⅩC第二法），轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)／min，測(cè)定其平衡溶解度，來(lái)確定聯(lián)苯雙酯的漏槽條件，試驗(yàn)結(jié)果見表1。

由表1可以看出，0.5%十二烷基硫酸鈉、1%的十二烷基硫酸鈉溶液、40%的乙醇溶液、25%的異丙醇溶液均能達(dá)到漏槽條件（3倍全溶濃度），但考慮有機(jī)溶劑加入量較大，故選擇在溶出介質(zhì)中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉溶液，分別考察了聯(lián)苯雙酯片在0.5%十二烷基硫酸鈉、1%的十二烷基硫酸鈉溶液溶出度，試驗(yàn)結(jié)果見圖3。

表1 不同溶出基質(zhì)中聯(lián)苯雙酯的溶解度

圖3 不同濃度十二烷基硫酸鈉對(duì)聯(lián)苯雙酯片溶出度影響曲線

試驗(yàn)結(jié)果表明，聯(lián)苯雙酯在1%十二烷基硫酸鈉溶液中的溶出速率和溶出量更好，故選擇1%十二烷基硫酸鈉作為溶出介質(zhì)。

2.2.2 轉(zhuǎn)數(shù)的選擇

取批號(hào)為060804的樣品，以1%十二烷基硫酸鈉為溶出介質(zhì)，分別以75、100、125rpm·min－1進(jìn)行試驗(yàn)，分別于10、20、30、45和60min取樣，并取濾液5mL，加1%十二烷基硫酸鈉稀釋至10mL，測(cè)定吸收度，并計(jì)算溶出度，繪制溶出曲線，結(jié)果見圖4。

圖4 不同轉(zhuǎn)數(shù)對(duì)聯(lián)苯雙酯溶出度影響曲線

試驗(yàn)結(jié)果表明，100rpm·min－1使聯(lián)苯雙酯的溶出效果最好，故本試驗(yàn)確定溶出轉(zhuǎn)數(shù)100rpm·min－1。

2.2.3 溶出方法的選擇

取批號(hào)為060804的樣品，以1%十二烷基硫酸鈉為溶出介質(zhì)，分別選擇第一法（籃法）和第二法（槳法）進(jìn)行試驗(yàn)，分別于10、20、30、45和60min取樣，并取濾液5mL，加1%十二烷基硫酸鈉稀釋至10mL，測(cè)定吸收度，并計(jì)算溶出度，繪制溶出曲線，結(jié)果見圖5。

試驗(yàn)結(jié)果表明，漿法使聯(lián)苯雙酯溶出效果好，故本試驗(yàn)選擇漿法。

2.2.4 溶出度的測(cè)定

取本品，照溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典2010年版附錄ⅩC第二法），以1%十二烷基硫酸鈉1 000mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)／min，依法操作，經(jīng)45min時(shí)，取溶液濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL，置10mL量瓶中，加1%十二烷基硫酸鈉稀釋至刻度，搖勻，照紫外－可見分光光度法（中國(guó)藥典2010年版附錄ⅣA），在281nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度；另精密稱取聯(lián)苯雙酯對(duì)照品約12.5mg，置50mL量瓶中，加乙醇約40mL，于水浴中加熱使溶解，放冷，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置于100mL量瓶中，加1%十二烷基硫酸鈉稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定，計(jì)算每片的溶出量。限度為標(biāo)示量的70%，應(yīng)符合規(guī)定。

圖5 不同溶出方法對(duì)聯(lián)苯雙酯溶出度影響曲線

2.2.5 溶出度的均一性

按溶出測(cè)定方法檢測(cè)三批樣品，試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 不同批次聯(lián)苯雙酯片溶出度結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，批間重現(xiàn)性良好。

3 討論

聯(lián)苯雙酯在水中溶解度較小，采用漏槽條件考察溶出介質(zhì)，雖然40%的乙醇溶液、25%的異丙醇溶液也能使其達(dá)到漏槽條件，可能是由于有機(jī)溶劑加入量較大，故選擇1%十二烷基硫酸鈉溶液作為溶出介質(zhì)。轉(zhuǎn)數(shù)對(duì)聯(lián)苯雙酯溶解度影響較大。表面活性劑有降低藥物界面表面張力的作用，增加片劑的潤(rùn)濕性，轉(zhuǎn)數(shù)太大或太小，都使表面活性劑不能在片劑表面很好的潤(rùn)濕，導(dǎo)致聯(lián)苯雙酯溶出度較低。雖然聯(lián)苯雙酯采用該溶出方法，溶出效果良好，但由于聯(lián)苯雙酯自身藥物難溶于水的特性以及較低的生物利用度，故本方法仍將溶出限度定在70%。

［1］孫淑英，蔡玉珉，冷曉紅，等.聯(lián)苯雙酯的共沉淀物和固體分散物的制備及其對(duì)濕度的穩(wěn)定性［J］.沈陽(yáng)藥學(xué)院學(xué)報(bào)，1987，4（2）：99－101.