人參粉劑致畸試驗(yàn)研究

孫蘭 鄒梅 宋忻恬 隋自潔 張晶瑩

人參為五加科，屬多年生宿性根雙子葉植物，為“東北三寶”之首，是馳名中外的名貴藥材，已有數(shù)千年的藥用和保健歷史，具有延緩中樞神經(jīng)系統(tǒng)衰老、抗疲勞、抗腫瘤及提高機(jī)體免疫力等功能［1-4］，關(guān)于其毒性方面有研究表明，人參粉劑無(wú)毒，在正常劑量范圍內(nèi)無(wú)致突變作用［5］，而在致畸作用方面，對(duì)其有效成分之一的人參皂甙方面研究很多［6-7］，關(guān)于人參全身粉劑研究的較少見(jiàn)，為確保其安全性筆者進(jìn)行了以下致畸試驗(yàn)研究。

1 資料與方法

1.1 受試物 人參(人工種植)，以人參全身(包括根須)粉碎機(jī)粉碎過(guò)100目篩。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)Wistar種健康性成熟(90～100 g)雌(未交配過(guò))、雄大白鼠，由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK-(吉)2003-0001，健康觀察3 d后進(jìn)行本試驗(yàn)。

1.3 主要儀器與試劑 電子天平，型號(hào):Sartorius-BS200;游標(biāo)卡尺(千分尺)，體視顯微鏡;甲醛、冰乙酸、2，4，6-三硝基酚、氫氧化鉀、甘油、水合氯醛、茜素紅。

陽(yáng)性物，阿司匹林，純度為99%、羧甲基纖維素鈉均由SIGMA-ALDRICH公司提供。批號(hào)分別為:CAS:50-78-2、CAS:9004-32-4。

1.4 方法 按文獻(xiàn)［8］進(jìn)行

1.4.1 試驗(yàn)方法 本試驗(yàn)設(shè)4.00、1.00、0.25 g/kg BW三個(gè)劑量組，另設(shè)陰性對(duì)照組(蒸餾水)、陽(yáng)性對(duì)照組(280 mg/kg-BW，溶劑為1.5%羧甲基纖維素鈉)。將雌、雄鼠每晚按1比1同籠交配，次晨觀察陰栓和陰道涂片，凡查出陰栓或精子細(xì)胞的雌鼠則認(rèn)為“受孕鼠”。將已受孕的雌鼠隨機(jī)分成以上5組，在受孕的第7～16天，高、中、低三劑量組大鼠每天經(jīng)口灌胃給予受試物，灌胃量為1.0 ml/100 g BW，陰性對(duì)照組灌胃給予等量蒸餾水，陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給予等量阿司匹林。受孕的大鼠于 0、7、12、16、20 d 稱體重，并計(jì)算給受試物的量，所有孕鼠于第20天處死并稱重，剖腹取出子宮和胎鼠，稱窩重，檢查早期吸收胎、遲死胎、死胎和活胎數(shù);活胎鼠逐個(gè)測(cè)量記錄體重、身長(zhǎng);胎鼠骨骼檢查約占每窩的1/2，內(nèi)臟檢查約占每窩1/2。骨骼檢查標(biāo)本用茜素紅溶液常規(guī)染色，內(nèi)臟檢查標(biāo)本用波氏液固定。

1.4.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用spss11.5 for windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析、卡方檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 孕鼠的生理體征、外觀、行為、大下便、皮毛等無(wú)異常。

2.2 人參對(duì)孕鼠體重的影響:從表1可見(jiàn)，與陰性對(duì)照組比較:各劑量組孕鼠體重及體重增重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);陽(yáng)性對(duì)照組孕鼠16 d、20 d體重降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)、孕鼠增重明顯降低，有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。

表1 人參對(duì)孕鼠不同時(shí)間體重的測(cè)定結(jié)果

2.3 人參對(duì)孕鼠胎仔的影響 由表2可見(jiàn)，與陰性對(duì)照組比較:各劑量組各指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);陽(yáng)性對(duì)照組的窩平均活胎數(shù)、胎鼠體重低于陰性對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)、吸收胎數(shù)多于陰性對(duì)照組有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)、胎鼠身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)明顯低于陰性對(duì)照組，有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。

2.4 人參對(duì)胎鼠骨骼發(fā)育的影響 由表3可見(jiàn)，與陰性對(duì)照組相比，各劑量組各指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);陽(yáng)性對(duì)照組胸骨畸形率明顯高于陰性對(duì)照組，有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，陽(yáng)性對(duì)照組肋骨畸形率高于陰性對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。

表2 人參對(duì)孕鼠胎仔影響的測(cè)定結(jié)果

表3 胎鼠骨骼測(cè)定結(jié)果

2.5 人參對(duì)胎鼠外觀及內(nèi)臟畸形的影響 與陰性對(duì)照組比較:各劑量組胎鼠外觀及內(nèi)臟畸形率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);陽(yáng)性對(duì)照組胎鼠外觀畸形率(3例腦膨出、2例脊椎裂、1例胸部裂、2例卷尾)明顯高于陰性對(duì)照組有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)、陽(yáng)性對(duì)照組胎鼠內(nèi)臟畸形率(頭部出現(xiàn)一例側(cè)腦室擴(kuò)張，胸部出現(xiàn)一例氣管狹窄，腹部出現(xiàn)6例腎積水、2例多囊腎、2例輸卵管積水)明顯高于陰性對(duì)照組，有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。

3 討論

人參作為名貴藥材，具有調(diào)節(jié)生理機(jī)能的多種功效已被公認(rèn)，而且許多國(guó)家已把人參制成各種食品和保健食品投放到市場(chǎng)，作為產(chǎn)參的大國(guó)，我們更好的開(kāi)發(fā)和利用人參勢(shì)在必行。通過(guò)上述試驗(yàn)結(jié)果可知，高、中、低劑量組:孕鼠體重增長(zhǎng)正常，孕 0 d、7 d、12 d、16 d、20 d 體重及增重與陰性對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05);窩平均活胎數(shù)、活胎率、吸收胎率及死胎率與陰性對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05);胎鼠平均體重、身長(zhǎng)和尾長(zhǎng)于陰性對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05);胎鼠的外觀和內(nèi)臟檢查未見(jiàn)異?；蚧?。在本試驗(yàn)條件下，在此劑量范圍內(nèi)(4.00 g/kg BW-0.25 g/kg BW)未發(fā)現(xiàn)人參粉劑對(duì)大鼠有母體毒性、胚胎毒性和致畸作用，因此是安全的。

［1］傅曉晴，蔡宗葦，揚(yáng)顯榮.人參延緩中樞N系統(tǒng)衰老的生理調(diào)節(jié)治療作用的研究.中醫(yī)藥學(xué)刊，2003，21(7):1044-1047.

［2］王瑩，蔡?hào)|聯(lián).人參抗疲勞作用的研究進(jìn)展.氨基酸和生物資源，2005，27(3):68-70.

［3］薛東波.人參皂甙Rg3抗腫瘤作用的研究進(jìn)展.中國(guó)中西醫(yī)外科雜志，2001，7(4):87-88.

［4］沈玲，張均田.人參增強(qiáng)免疫研究新進(jìn)展.中草藥，1996，27(8):499-502.

［5］杜迎剛，苗青.人參安全食效性研究.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36(25):10954-10955.

［6］王京濱，陳壁鋒，譚劍斌.人參花蕾提取物致畸作用的試驗(yàn)研究.中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2006，6(6):972-973.

［7］黃宗銹，陳冠敏，何聆.高麗人參飲品的致畸作用研究.海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，1999，3(5):31-32.

［8］衛(wèi)生部，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB15193-2003食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法.北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004:61-64.