非小細(xì)胞肺癌組織中DNA-PKcs的表達(dá)變化及意義

蔣昌斌，甄俊杰，莫明聰，牛道立

(廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，廣州 510230)

DNA依賴性蛋白激酶(DNA-PK)是細(xì)胞雙鏈斷裂(DSB)的主要修復(fù)蛋白之一，由兩個(gè)小的調(diào)節(jié)亞基Ku70、Ku80和一個(gè)大的催化亞基——DNA依賴性蛋白激酶催化單位(DNA-PKcs)組成［1］。有關(guān)DNA-PKcs與非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)輻射敏感性的關(guān)系已有文獻(xiàn)報(bào)道［2，3］。因此，本研對(duì)73例 NSCLC患者癌組織及其癌旁組織中的DNA-PKcs進(jìn)行了檢測(cè)，觀察其表達(dá)變化并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2005年5月～2009年4月在廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院確診的NSCLC患者73例，男55例，女18例;年齡33～75歲。治療前經(jīng)手術(shù)或纖維支氣管鏡取標(biāo)本，所取標(biāo)本中可同時(shí)找到癌組織及與癌組織相應(yīng)的癌旁組織，病理檢查診斷為NSCLC。病理組織學(xué)類型:腺癌36例，鱗癌33例，腺鱗癌2例，大細(xì)胞癌及肉瘤樣癌各1例。TNM分期:Ⅰ期6例，Ⅱ期7例，Ⅲ期44例，Ⅳ期16例。38例未行手術(shù)治療而僅行放療，35例接受手術(shù)治療并于術(shù)后放療。將未行手術(shù)治療的38例根據(jù)放療(采用Simens Oncor直線加速器進(jìn)行三維適形放射治療，用6 MV X 射線，2 Gy/次，5次/周，照射總劑量為60～70 Gy)的近期療效，分為輻射敏感組(CR+PR)和輻射抗拒組(NC+PD)。近期療效的評(píng)價(jià)依據(jù)《WHO實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)》，根據(jù)患者放療前及放療結(jié)束后1～3個(gè)月時(shí)的胸部CT檢查結(jié)果分為CR(腫瘤完全消失，且持續(xù)1個(gè)月以上，無(wú)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移)、PR(腫瘤最大直徑及垂直直徑的乘積縮小50%以上，病灶無(wú)增大，持續(xù)1個(gè)月以上)、NC(腫瘤兩徑乘積縮小不足50%，增大不超過(guò)25%，持續(xù)超過(guò)1個(gè)月)、PD(病灶兩徑乘積增大25%以上或有新病灶出現(xiàn))。

1.2 DNA-PKcs的檢測(cè) 將73例患者治療前經(jīng)手術(shù)或纖維支氣管鏡所取癌組織及癌旁組織進(jìn)行免疫組化染色，顯微鏡下觀察。DNA-PKcs定位于細(xì)胞核，呈棕黃色或棕褐色顆粒。參考許良中的判斷標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)染色強(qiáng)度評(píng)分，無(wú)色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;對(duì)每例的病理切片隨機(jī)掃描計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野(40×10)中的總細(xì)胞及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，陽(yáng)性細(xì)胞率≤25%為0分、26% ～50%為1分、51% ～75%為2分、＞75%為3分;上述兩種計(jì)分的乘積＞3分為高表達(dá)、≤3分為低表達(dá)(陰性表達(dá)歸為低表達(dá))。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件。數(shù)據(jù)比較用χ2檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 DNA-PKcs在癌組織及癌旁組織中的表達(dá)在73例NSCLC的癌組織中，DNA-PKcs高表達(dá)66例、低表達(dá)7例，高表達(dá)率為90.4%;在相應(yīng)的癌旁組織中，DNA-PKcs高表達(dá)7例、低表達(dá)66例，高表達(dá)率為9.6%;兩種組織中DNA-PKcs的高表達(dá)率相比，P ＜0.01。

2.2 癌組織中DNA-PKcs的表達(dá)與NSCLC患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 癌組織中DNA-PKcs的表達(dá)與患者性別、年齡、病理類型、TNM分期均無(wú)關(guān)(P均＞0.05)。詳見(jiàn)表 1。

表1 DNA-PKcs的表達(dá)與NSCLC患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 癌組織中DNA-PKcs的表達(dá)與NSCLC放療近期療效的關(guān)系 未手術(shù)治療的38例NSCLC患者放療后，放射敏感組13例，DNA-PKcs高表達(dá)12例、低表達(dá)1例;放射不敏感組25例，DNA-PKcs高表達(dá)22例、低表達(dá)3例;兩組相比，P ＞0.05。

2.4 癌組織中DNA-PKcs的表達(dá)與NSCLC手術(shù)患者生存率的關(guān)系 35例手術(shù)治療的NSCLC，隨訪滿1 a者30例，存活19例、死亡11例，存活者DNAPKcs高表達(dá)17例、低表達(dá)2例，死亡者DNA-PKcs高表達(dá)10例、低表達(dá)1例，兩者相比，P＞0.05;隨訪滿2 a者26例，存活11例、死亡15例，存活者DNAPKcs高表達(dá)9例、低表達(dá)2例，死亡者DNA-PKcs高表達(dá)14例、低表達(dá)1例，兩者相比，P＞0.05。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，在73例NSCLC的癌組織及癌旁組織中DNA-PKcs均有表達(dá)，但在癌組織中的高表達(dá)率達(dá)90.4%，而在癌旁組織中僅為9.6%，推測(cè)DNA-PKcs可能與NSCLC的發(fā)生有關(guān);NSCLC癌組織中DNA-PKcs的表達(dá)與患者性別、年齡和腫瘤臨床分期無(wú)關(guān)，這與文獻(xiàn)［2，4］報(bào)道相符。余少平［5］等檢測(cè)了113例NSCLC組織，結(jié)果顯示，DNA-PKcs的表達(dá)與NSCLC的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)，在不同病理類型NSCLC中的DNA-PKcs高表達(dá)順序依次為細(xì)支氣管肺泡癌＞腺癌＞腺鱗癌＞鱗癌。而在本研究中，鱗癌、腺癌和其他類型NSCLC組織中DNA-PKcs的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

Shintani等［6］的研究顯示，DNA-PKcs的表達(dá)上調(diào)與口腔鱗癌的放射抗拒有關(guān)，提示DNA-PKcs可能成為口腔鱗癌放射增敏的一個(gè)新靶點(diǎn)。Lee等［7］的研究發(fā)現(xiàn)，鼻咽癌組織DNA-PKcs表達(dá)越高，放射治療的效果越差。Ortiz等［8］認(rèn)為，DNA-PKcs表達(dá)增高是預(yù)示膀胱癌細(xì)胞輻射抗拒的表型。本研究結(jié)果顯示，DNA-PKcs的表達(dá)與NSCLC的放療近期療效及術(shù)后患者的1、2年生存率無(wú)關(guān)。但之前我們的研究證實(shí)DNA-PKcs反義寡核苷酸可增強(qiáng)肺腺癌A549細(xì)胞的放射敏感性［9］，說(shuō)明DNA-PKcs與肺腺癌細(xì)胞的放射敏感性密切相關(guān)。本研究中DNAPKcs的表達(dá)與NSCLC的放射敏感性之間無(wú)關(guān)，原因可能有以下幾方面:①進(jìn)入近期療效分析和生存率分析的病例數(shù)太少。②免疫組化技術(shù)敏感性的局限以及實(shí)驗(yàn)中的各種誤差。③腫瘤活體組織中DNA-PKcs的表達(dá)受到更多因素的影響，且腫瘤放療敏感性的影響因素也很多。

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