COX-2在乳腺癌組織的表達(dá)及其臨床病理意義

畢麗榮,楊 明,王悅增,茅淑硯

(1.吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院病理科;2.吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院乳腺外科;3.吉林大學(xué)病理生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,吉林長(zhǎng)春 130021）

環(huán)氧合酶(Cyclooxygenase,COX）是催化花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素的重要限速酶,它有2種同工酶:COX-1和COX-2。COX-1在大多數(shù)組織中均有表達(dá),參與機(jī)體正常的生理功能,如保護(hù)胃黏膜,控制血小板聚集等;COX-2靜息時(shí)并不表達(dá),但在細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、癌基因等刺激因子的作用下可被誘導(dǎo)表達(dá)。近年來研究表明,COX-2在多種腫瘤組織中過度表達(dá),通過多種機(jī)制參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移[1]。我們應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)了乳腺癌組織中COX-2的表達(dá),并探討其與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2007年8月-2009年5月在吉林大學(xué)第一醫(yī)院行乳腺癌改良根治術(shù),并經(jīng)病理證實(shí)的腫瘤石蠟標(biāo)本46例,均為浸潤(rùn)性癌,術(shù)前均未行化療或放療及內(nèi)分泌治療。同時(shí)取距癌旁2cm患者正常乳腺組織10例,乳腺良性病變10例作為對(duì)照。本組病例均為女性,年齡23歲-69歲,平均年齡48.5歲。病理類型:浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌35例,浸潤(rùn)性小葉癌3例,其他類型浸潤(rùn)性癌8例。腫瘤分期:Ⅰ期8例、Ⅱ期30例、Ⅲ期8例。雌激素受體(ER）陰性18例、ER陽性28例。孕激素受體(PR）21例、PR陽性25例。HER-2陽性14例,HER-2陰性32例。所有病例均無非甾體類抗炎藥和糖皮質(zhì)激素長(zhǎng)期用藥史。

1.2 方法

組織經(jīng)10%的甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,組織切片厚4 μ m,免疫組織化學(xué)檢測(cè)所用兔抗人COX-2單克隆抗體及SP通用試劑盒均購(gòu)自福州邁新生物制品有限公司,工作濃度為1∶100。采用免疫組化SP法,高溫修復(fù)抗原,操作嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行,并用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。用已知肺癌陽性標(biāo)本作陽性對(duì)照。

1.3 COX-2的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

COX-2的免疫組化染色以細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達(dá)。COX-2采用半定量記分法,根據(jù)切片陽性細(xì)胞率和陽性細(xì)胞著色強(qiáng)度分別記分,胞漿內(nèi)或(和）核膜呈棕黃色者為陽性,無細(xì)胞染色記0分,＜10%為1分,10%-50%為2分,50%-80%為3分,＞80%為4分;著色強(qiáng)度:陰性為0分,弱陽性為1分,陽性為 2分,強(qiáng)陽性為3分,以上兩項(xiàng)之乘積小于6分為陰性表達(dá),6-12分為陽性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行 χ2檢驗(yàn),以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 COX-2的表達(dá)情況COX-2免疫組化染色主要定位于細(xì)胞漿,(見圖1）本組46例乳腺癌標(biāo)本中29例呈COX-2陽性表達(dá),陽性表達(dá)率為63%;10例良性病變中有1例陽性表達(dá),陽性表達(dá)率為10%,10例癌旁正常組織中有1例呈陽性表達(dá)。乳腺癌組織和良性病變以及癌旁組織中COX-2表達(dá)率相比均有顯著性差異(P＜0.01）。(見表1）,而良性病變和癌旁組織之間無差異。

圖1 COX-2主要在胞漿表達(dá)(200×）

表1 COX-2在乳腺癌、乳腺良性病變及癌旁組織的表達(dá)

2.2 COX-2表達(dá)與乳腺癌臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系COX-2在乳腺癌組織中的表達(dá)與年齡、腫瘤大小、ER、PR等無關(guān),與HER-2陽性和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(p＜0.01）。(見表2）

表2 COX-2表達(dá)與乳腺癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系

3 討論

本組研究46例乳腺癌標(biāo)本中,有29例呈COX-2陽性表達(dá),陽性表達(dá)率為63%(29/46）。10例癌旁組織中,1例呈陽性表達(dá),表達(dá)率為10%(1/10）,10例良性病變中陽性表達(dá)率也為10%,癌組織和癌旁及良性病變中的表達(dá)有顯著性差異(P＜0.01）,而癌旁組織和良性病變之間沒有差異。與文獻(xiàn)報(bào)道[2-5]結(jié)果相似。這一結(jié)果提示了COX-2參與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展,也可以間接作為判斷良惡性的指標(biāo)之一。Shim等[6]研究表明,COX-2在DCIS中高表達(dá),并提示COX-2是乳腺癌早期事件,在乳腺癌的早期即發(fā)揮作用。目前認(rèn)為COX-2促進(jìn)乳腺癌發(fā)生和發(fā)展的機(jī)制有:促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖,抑制腫瘤細(xì)胞凋亡,促進(jìn)腫瘤新生血管形成等[7,8]。由于COX-3在乳腺癌的原位癌和浸潤(rùn)癌階段都過表達(dá),明顯高于周圍正常組織和良性病變,因此其可以作為腫瘤治療的靶點(diǎn)之一,在乳腺癌的各個(gè)階段應(yīng)用抑制劑都有可能抑制腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲,改善患者的預(yù)后。

目前HER-2已被公認(rèn)為與乳腺癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的原癌基因,參與調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖及分化,其產(chǎn)物過度表達(dá)常提示腫瘤惡性程度高,臨床預(yù)后差[9]。本組病例的結(jié)果顯示,COX-2的表達(dá)和HER-2表達(dá)明顯相關(guān)(＜0.05）,與文獻(xiàn)報(bào)道[2,3,5]結(jié)果相似,提示COX-2有可能和HER-2一樣成為判斷預(yù)后的指標(biāo)之一。

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況是判斷乳腺癌預(yù)后的最重要的指標(biāo)。Ristimaki等[10]對(duì)1576例浸潤(rùn)性乳腺癌標(biāo)本研究后證實(shí),COX-2的表達(dá)與腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。本研究顯示COX-2在乳腺癌組織中的表達(dá)與腫瘤大小,ER、PR等無關(guān),而與HER-2陽性表達(dá)以及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),特別是與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān):淋巴結(jié)陽性組COX-2的陽性表達(dá)率為75%,而淋巴結(jié)陰性組COX-2的陽性表達(dá)率為僅為35.7%,兩組差異顯著(p＜0.01）,與Ristimaki等的研究結(jié)果相同,提示其可以作為判斷乳腺癌預(yù)后的有用指標(biāo)。

2002年ASCO會(huì)議曾提出將COX-2作為一個(gè)新的乳腺癌治療和預(yù)防的靶點(diǎn)[11]。最近已有研究表明[12],COX-2的選擇性抑制劑-塞來昔布(Celecoxib）可以提高內(nèi)分泌治療的效果。相信隨著研究的進(jìn)展,不論是在乳腺癌的診斷、預(yù)后判斷,還是在靶向治療上,COX-2都是一個(gè)有用的指標(biāo)。

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