血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板假性減少的原因及分析

薛燕艷

山西杏花村汾酒集團(tuán)有限責(zé)任公司職工醫(yī)院，山西 汾陽(yáng) 032205

在臨床檢驗(yàn)工作中，血細(xì)胞分析儀在進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)時(shí)，以其方便、快捷、重復(fù)性好、工作效率高而廣泛應(yīng)用。由于受其測(cè)定原理及其它因素的影響，在實(shí)際工作中，血細(xì)胞分析儀血小板計(jì)數(shù)結(jié)果與實(shí)際值之間產(chǎn)生一定的差異，現(xiàn)將日常工作中出現(xiàn)的148例血小板計(jì)數(shù)＜90×109/L的病例進(jìn)行分析，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 收集2010年6月至2011年5月本院血細(xì)胞分析儀血常規(guī)檢測(cè)患者中血小板計(jì)數(shù)＜90×109/L的血標(biāo)本148例。

1.2 儀器 深圳邁瑞B(yǎng)C－3000血細(xì)胞分析儀，OLYMPUS顯微鏡。

1.3 試劑 稀釋液、清洗液、溶血?jiǎng)┚鶠閮x器配套試劑，校準(zhǔn)液、質(zhì)控液均由邁瑞公司提供。顯微鏡計(jì)數(shù)血小板稀釋液按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》 (第3版)配置，置于冰箱保存。

1.4 方法 (1)全血模式計(jì)數(shù)血小板用含EDTA－K2抗凝的真空管采集標(biāo)本2ml，每日先用質(zhì)控液測(cè)試，結(jié)果都在質(zhì)控范圍內(nèi)時(shí)再測(cè)定標(biāo)本。標(biāo)本采集后放置30分鐘開始檢測(cè)，并于4小時(shí)內(nèi)結(jié)束檢測(cè)。(2)預(yù)稀釋模式計(jì)數(shù)。(3)顯微鏡計(jì)數(shù)血小板嚴(yán)格按照操作規(guī)程，每份標(biāo)本計(jì)數(shù)兩次取其平均值。并對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行分析。(4)血涂片，瑞士染色觀察血小板大小、形態(tài)、有無(wú)聚集及紅細(xì)胞、白細(xì)胞碎片。

2 結(jié)果

2.1 血小板真性減少 全血模式計(jì)數(shù)、預(yù)稀釋模式計(jì)數(shù)、顯微鏡計(jì)數(shù)，血小板結(jié)果較一致的標(biāo)本有126例。血小板直方圖顯示有明顯主峰，三者測(cè)定結(jié)果做配對(duì)t檢驗(yàn)p＞0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定為血小板真性減少。

2.2 血小板假性減少 全血模式與預(yù)稀釋模式計(jì)數(shù)結(jié)果較一致，但與顯微鏡計(jì)數(shù)血小板結(jié)果差異較大的標(biāo)本有21例，其血小板直方圖分布低而寬，曲線尾部有尾峰，全血細(xì)胞儀計(jì)數(shù)結(jié)果與顯微鏡計(jì)數(shù)結(jié)果經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)p＜0.05，有顯著差異。顯微鏡計(jì)數(shù)與預(yù)稀釋模式計(jì)數(shù)結(jié)果較一致，均在正常范圍內(nèi)，但全血模式計(jì)數(shù)結(jié)果卻顯著降低的有1例，血小板直方圖提示有大顆粒存在，此患者無(wú)血液病及出血性疾病，凝血功能檢查結(jié)果均在正常范圍內(nèi)，無(wú)導(dǎo)致血小板減少的疾病，血涂片染色可見血小板成團(tuán)成簇出現(xiàn)，改用枸掾酸鹽抗凝劑重新抽血計(jì)數(shù)結(jié)果顯示正常。

3 結(jié)論

血細(xì)胞分析儀中，血小板和紅細(xì)胞是在同一通道內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的，是依據(jù)不同大小體積的顆粒通過檢測(cè)小孔產(chǎn)生的脈沖來(lái)計(jì)數(shù)、分類細(xì)胞的。但是只能區(qū)別顆粒的大小而不能判斷顆粒的性質(zhì)。因此，會(huì)有許多原因?qū)ρ“逵?jì)數(shù)結(jié)果造成影響而導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)假性減少。

血小板體積偏大或聚集成較大顆粒時(shí)，其脈沖信號(hào)落在紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)，血小板就有可能被儀器誤認(rèn)為是小紅細(xì)胞甚至是白細(xì)胞而未計(jì)數(shù)入血小板總數(shù)［1］，從而使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。

由于EDTA－K2作為抗凝劑能保持紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板形態(tài)不發(fā)生改變而使血液不凝固，而廣泛應(yīng)用于臨床。近年來(lái)有文獻(xiàn)報(bào)道，部分人群由于EDTA誘導(dǎo)血小板中的特殊蛋白使血小板發(fā)生凝集，這種現(xiàn)象稱為EDTA依賴性假性血小板減少癥 (PTCP)［2］。這可能與患者血漿中存在著自身抗體或其血小板表面存在著某種隱匿性抗原有關(guān)，多見于腫瘤患者、自身免疫性患者。另一種是“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”，由于白細(xì)胞表面的IgG或Fc段與血小板表面的GPⅡb∕Ⅲa結(jié)合使血小板粘附于白細(xì)胞表面。此類標(biāo)本，應(yīng)換用枸掾酸鹽抗凝劑或肝素鈉抗凝劑重新計(jì)數(shù)。

末梢血由于采血過程中穿刺部位、深度，采血速度是否擠壓采血部位導(dǎo)致組織液混入，以及檢測(cè)前是否充分混勻等原因，均會(huì)導(dǎo)致血小板在不同程度上出現(xiàn)聚集，使血小板測(cè)定結(jié)果假性減少。靜脈穿刺時(shí)止血帶過緊、多次穿刺致皮下出血等情況，都會(huì)使組織凝血因子易混入血標(biāo)本，產(chǎn)生肉眼看不見的小凝塊，也是造成血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板結(jié)果假性減少的原因之一［3］。

綜上所述，在實(shí)際工作中，應(yīng)注意盡量排除各種干擾因素，綜合分析血小板減少的原因，并與臨床醫(yī)生及時(shí)溝通，對(duì)于血小板顯著減少且無(wú)其它出血性疾病的患者應(yīng)及時(shí)更換抗凝劑同時(shí)做血涂片及顯微鏡計(jì)數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，以得到正確的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果，為臨床診斷治療提供具有參考價(jià)值的數(shù)據(jù)。

［1］朱中勇．準(zhǔn)確計(jì)數(shù)血小板方法學(xué)研究進(jìn)展［J］．國(guó)外臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)，2002，23(3):131－132．

［2］宓慶梅，施魏宇，郝婉瑩等．EDTA依賴性假性血小板減少癥1例［J］．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2004，27(10):719．

［3］李永紅，鐘步云．血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板結(jié)果偏低的原因及糾正方法［J］臨床檢驗(yàn)雜志，2001，19(2):110．