幽門螺桿菌感染與原發(fā)性肝癌研究進(jìn)展

覃月秋,黃贊松

(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科,廣西 百色 533000 E-mail:gxbsqyq@126.com)

原發(fā)性肝癌是人類最常見的惡性腫瘤之一,死亡率在消化系惡性腫瘤中居第3位,僅次于胃癌、食管癌。原發(fā)性肝癌發(fā)病原因目前尚未完全明確,主要與肝硬化、乙型和丙型肝炎病毒感染、黃曲霉素、寄生蟲、酒精、飲用水污染等因素有關(guān),約10%左右的肝癌患者發(fā)病原因不明。幽門螺桿菌(helicobacter pylori,Hp)是一種螺旋狀、寄生于消化道的微需氧的革蘭陰性菌,于1983年由澳大亞學(xué)者Warren和Marshall從慢性胃炎患者胃黏膜中分離并培養(yǎng)出來。全球自然人群中Hp感染率超過50%,我國感染率為40%～90%,平均為59%。Hp與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌及胃黏膜相關(guān)性淋巴樣組織樣(MALT)惡性淋巴瘤發(fā)生的密切聯(lián)系已得到醫(yī)學(xué)界的認(rèn)可,并于1994年被世界衛(wèi)生組織列為Ⅰ類致癌物,而Hp感染與胃腸外疾病的關(guān)系也越來越引起醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注,其中Hp感染與肝臟疾病,特別是原發(fā)性肝癌的關(guān)系是近年研究的新熱點(diǎn)。近年研究表明Hp感染可能與肝癌的發(fā)生有一定的相關(guān)性[1,2]。筆者就Hp感染與原發(fā)性肝癌研究進(jìn)展作一綜述。

1 Hp感染與原發(fā)性肝癌

1994年學(xué)者 Ward、Fox等[3,4]從小鼠肝組織分離、檢測發(fā)現(xiàn)肝螺桿菌(H.hepaticus)后引發(fā)了人們對肝臟疾病與螺桿菌關(guān)系的思考:肝螺桿菌與Hp是否同源?人肝臟組織是否存在Hp?人類肝臟疾病與Hp感染有無相關(guān)性?學(xué)者們就此展開了大量研究。Avenaud等[5]應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測 8例原發(fā)性肝癌、肝內(nèi)膽管癌組織,結(jié)果發(fā)現(xiàn)有螺桿菌16S rRNA基因的存在,陽性率達(dá)100%,進(jìn)一步的測序結(jié)果表明與Hp有97%～99%的同源性,而對照非肝癌組僅1例陽性,證實(shí)人肝癌組織中存在Hp感染,且感染率很高。Nilsson等[6]應(yīng)用PCR及DNA測序檢測16例原發(fā)性肝細(xì)胞癌和14例肝內(nèi)膽管癌標(biāo)本,發(fā)現(xiàn)75%(12/16)原發(fā)性肝癌組織螺桿菌16S rRNA基因陽性,71.4%(10/14)膽管癌組織螺桿菌16S rRNA基因陽性,而作為對照的20例肝轉(zhuǎn)移瘤無一例陽性,測序證實(shí)與Hp或H.Helicobacter同源性最高,分析后認(rèn)為Hp感染與原發(fā)性肝細(xì)胞癌和原發(fā)性肝內(nèi)膽管癌的發(fā)生密切相關(guān)。Ponzetto等[7]檢測70名丙肝肝硬化患者血清抗Hp IgG抗體,其中54例陽性,陽性率77.2%,310例對照組中183例陽性,陽性率59%,兩者差異有顯著性。用PCR方法檢測25例伴有肝硬化的原發(fā)性肝癌患者手術(shù)切除標(biāo)本,92%(23/25)陽性,測序結(jié)果與Hp相近,認(rèn)為Hp在丙肝肝硬化患者和肝癌患者的發(fā)病過程中起重要作用。

國內(nèi)湖南范學(xué)工等[8]研究96例慢性乙型肝炎患者Hp感染情況,結(jié)果乙肝患者感染率為57.3%,而對照組僅42.3%,其中HBeAg、HBV-DNA陽性者Hp感染率高達(dá) 75.6%,提示Hp感染可能對乙肝病毒的復(fù)制有促進(jìn)作用。黃燕等[9]用PCR檢測38例肝癌患者肝組織中螺桿菌感染情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)52.6%(20/38)的肝癌組織中發(fā)現(xiàn)螺桿菌存在,而非肝癌組無一例陽性(P＜0.01),PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測序分析顯示與Hp有99%～100%的同源性。山東青島宣世英等[10]應(yīng)用PCR及原位雜交技術(shù)檢測21例肝癌組織,13例標(biāo)本中證實(shí)有螺桿菌16S rRNA存在,而對照組(12例)無陽性檢出(P ＜0.01),測序結(jié)果顯示,肝癌組織螺桿菌屬16S rRNA序列與Hp的16S rRNA序列有97.8%的同源性。昆明鄭盛等[11]采用碳-14呼氣法檢測85例原發(fā)性肝癌患者及289例健康體檢者Hp感染情況,結(jié)果原發(fā)性肝癌患者陽性率達(dá)85.5%,而健康體檢者陽性率僅40.4%;用 ELISA法檢測Hp抗體(Hp-CagA-IgG),結(jié)果原發(fā)性肝癌患者陽性率達(dá)85.0%,而健康體檢者陽性率僅22.5%,提示Hp感染與原發(fā)性肝癌有明顯相關(guān)性。

國內(nèi)外研究結(jié)果表明,人肝臟組織中存在螺桿菌,該菌與Hp高度同源,提示Hp感染可能與各種肝臟疾病,尤其是肝癌的發(fā)生有一定的相關(guān)性。

2 Hp感染肝組織的可能途徑

過去長期認(rèn)為Hp僅寄生于胃黏膜,但近年來這一觀點(diǎn)受到挑戰(zhàn),近年研究人員在膽汁、膽道黏膜及肝臟中檢測到Hp的存在,并對其入肝途徑作出推測。Myung[12]用PCR檢測43例肝膽管疾病患者的肝內(nèi)膽汁、膽管組織、膽石標(biāo)本,結(jié)果以Hp 26 Kda蛋白為引物者陽性率9.3%(4/43),以Hp尿素酶A基因?yàn)橐镎哧栃月?1.6%(5/43),而對照組均為陰性,陽性患者肝內(nèi)膽汁pH值較陰性者明顯下降,提示肝內(nèi)膽汁pH值的降低等可能有利于患者Hp的生存。陳東風(fēng)等[13]用W-S銀染色法和免疫組化染色法檢測524例膽囊炎手術(shù)標(biāo)本石蠟切片,71例(13.55%)鏡下觀察到類似Hp的細(xì)菌,37例(7.1%)Hp抗體染色陽性;用Hp尿素酶A、B基因引物對81例慢性膽囊炎手術(shù)切除新鮮標(biāo)本膽囊黏膜DNA行PCR擴(kuò)增,結(jié)果11例(13.6%)尿素酶A、B基因皆陽性,4例僅有尿素酶A基因陽性,7例僅有尿素酶B基因陽性,提示部分慢性膽囊炎患者膽囊內(nèi)確有Hp存在。目前研究提示Hp可能經(jīng)奧狄氏括約肌逆流至膽道進(jìn)入肝臟,也可能是Hp通過門靜脈循環(huán)或淋巴循環(huán)到達(dá)肝臟,然后進(jìn)一步排泄到膽汁中。此外,研究還發(fā)現(xiàn)Hp感染有可能導(dǎo)致菌血癥。研究者[14,15]采用PCR法,在經(jīng)動脈內(nèi)膜切除的頸動脈粥瘤及動脈粥樣硬化斑塊中檢測出了Hp DNA,提示Hp可以通過菌血癥這一途徑到達(dá)肝臟。

3 Hp導(dǎo)致肝癌發(fā)生的機(jī)制

研究認(rèn)為[16～18]在Hp腫瘤發(fā)生中的機(jī)制主要包括以下幾個方面:Hp自身及其代謝產(chǎn)物的影響;Hp感染繼發(fā)炎癥過程中釋放多種細(xì)胞因子、自由基及一氧化氮等多因素協(xié)同作用。張艷等[19]報道,CagA+Hp能夠不同程度地上調(diào)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的Cyclin D1及增生細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá),進(jìn)而引起肝細(xì)胞增生動力學(xué)的異常。他們的研究還發(fā)現(xiàn),CagA+Hp可誘導(dǎo)人肝細(xì)胞系HepG2原癌基因C-fos表達(dá)升高,提示 Hp的CagA毒力因子在肝癌的發(fā)生上可能起一定作用[20]。此外有研究者認(rèn)為Hp感染在肝炎向肝硬化、肝癌發(fā)展過程中起橋梁或協(xié)同作用[21～23]。

總之,Hp感染可能對原發(fā)性肝癌的發(fā)生、發(fā)展起著重要的作用。而肝癌的發(fā)生是多因素長期作用的結(jié)果,Hp是否為原發(fā)性肝癌的另一個獨(dú)立病因?或是原發(fā)性肝癌病因的協(xié)同因素?其確切的作用機(jī)制如何?為進(jìn)一步明確兩者相關(guān)性,還將有大量的研究工作有待完成,這些研究將為抗感染和疫苗注射防治肝癌可能提供理論基礎(chǔ)。

[1] De Magalhaes,Queiroz DM,Santos A.Isolation of a helicobacter strain from the human liver[J].Gastroenterology,2001,121(4):1023-1024.

[2] Pellicano R,Mazzaferro V,Grigioni WF,et al.Helicobacter species sequences in liver samples from patients with and without hepatocellular arcinoma[J].World J Gastroenterol,2004,10(41):598-601.

[3] Ward JM,Fox JG,Anver MR,et al.Chronic active hepatitis and associated liver tumors in mice caused by a persistent bacterialinfection with a novel Helicobacter species[J].Natl Cancer Inst,1994,86:1222-1227.

[4] Fox JG,Yan L,Shames B,et al.Persistent hepatitis and enterocolitis in germfree mice infected with Helicobacter hepaticus[J].Infect Immun,1996,64:3673-3681.

[5] Avenaud P,MaraisA,Monteiro L,et al.Detection of helicobacter species in the liver of patients with and without primary liver carcinoma[J].Cancer,2000,89(7):1431-1439.

[6] Nilsson HO,Mulchandani R,Tranberg KG,et al.Helicobacter species identifled in liver from patients with cholangiocarcinoma and hepatocellular carcinoma[J].Gastroenterology,2001,120:323-324.

[7] Ponzetto A,Pellicano R,Leone N,et al.Helicobacter infection and cirrhosis in hepatitis C virus carriage:is it an innocent bystander or a troublemaker?[J].Med Hypotheses,2000,54:275-277.

[8] Fan XG,Zou YY,Wu AH,et al.Seroprevalence of Helicobacter pylori infection in patients with hepatitis B[J].Br J Biomed Sci,1998,55:176-178.

[9] 黃燕,范學(xué)工,陳永平,等.肝癌組織中螺桿菌16S rRNA基因的檢測[J].世界華人消化雜志,2002,10(8):877-882.

[10] 宣世英,李寧,施永新.螺桿菌感染與原發(fā)性肝癌的相關(guān)性研究[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2005,85(6):391-395.

[11] 鄭盛,肖瓊怡,殷芳.幽門螺桿菌感染與原發(fā)性肝癌的相關(guān)性研究[J].中國臨床實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2010,4(1):83-84.

[12] Myung SJ,Kim MH,MD KI,et al.Detection of Helicobacter pylori DNA in human biliary tree and its association with hepatolithiasis[J].Dig Dis Sci,2000,45(7):1405-1412.

[13] 陳東風(fēng),胡輅,易萍,等.人膽囊炎標(biāo)本中幽門螺桿菌的檢出及意義[J].世界華人消化雜志,2004,12(8):1814-1817.

[14] Danesh J,Koreth J,Youngman L,et al.Is Helicobacter pylori a factor in coronary atherosclerosis?[J].J Clin Microbiol,1999,37:1651.

[15] Farsak B,Yildirir A,Akyon Y,et al.Detection of Chl amydia pneumoniae and Helicobacter pvlor DNA in human atherosclerotic plaques by PCR[J].J Clin Microbiol,2000,38:4408-4411.

[16] 胡伏蓮,周殿元,賈博琦.幽門螺桿菌感染的基礎(chǔ)與臨床[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,1997:366-369.

[17] Suganuma M,Kurusu M,Okabe S,et al.Helicobacter pylori membrane protein 1:a new carcinogenic factor of helicobacter pylofi[J].Cancer Res,2001,61(17):6356-6359.

[18] Shibayama K,Doi Y,Shibata N,et al.Apoptotic Signaling PathwayActivated by Helicobacter pylori Infection and Increase of Apoptosis-Indudng Activity under Serum-Starved C0nditions[J].Infection and Immunity,2001,69(5):3181-3189.

[19] 張艷,范學(xué)工,田雪飛,等.幽門螺桿菌對肝細(xì)胞系HepG2 cyclinD1,PCNA mRNA表達(dá)的影響[J].世界華人消化雜志,2004,12(1):93-96.

[20] 張艷,范學(xué)工,陳仁,等.幽門螺桿菌對人肝細(xì)胞系HepG2原癌基因c-fos表達(dá)的影響[J].中國人獸共患病雜志,2004,20(8):690-694.

[21] Fagoonee S,Pellicano R,Rizzetto M,et al.The journey from hepatitis to hepatocellular carcinoma.Bridging role of Helicobacter species[J].Panminerva Med,2000,43:279-281.

[22] 季尚瑋,張永貴,王江濱.慢性丙型肝炎患者幽門螺桿菌感染及其相關(guān)因素分析[J].世界華人消化雜志,2008,16(5):535-539.

[23] 季尚瑋,王江濱,張永貴.慢性乙型肝炎病毒感染患者血清及肝組織中抗幽門螺桿菌抗體及特異性基因分析[J].中華消化雜志,2009,29(8):505-509.