247例人乳頭狀病毒感染與宮頸病變關(guān)系的分析

張 蓓,林清平,陳小苑

(福建省廈門(mén)市第二醫(yī)院婦產(chǎn)科,福建廈門(mén),361021)

人乳頭狀病毒(HPV)感染的檢測(cè)是篩查和預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵問(wèn)題之一。本研究采用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因微陣列分型檢測(cè)技術(shù),以廈門(mén)市第二醫(yī)院婦科門(mén)診及住院女性HPV感染患者為研究對(duì)象,探討HPV感染與宮頸病變的關(guān)系。

1 對(duì)象和方法

搜集2008年12月～2011年8月廈門(mén)市第二醫(yī)院婦科門(mén)診及住院女性2385例宮頸HPV分型檢測(cè)結(jié)果,其中HPV感染共502例,陽(yáng)性檢出率21.04%,選擇感染高危型HPV又可追查到同期宮頸病理結(jié)果的患者209例,感染低危型HPV(因子宮肌瘤、子宮腺肌癥等疾病術(shù)前行HPV檢測(cè),術(shù)后宮頸病理結(jié)果)的患者38例?；颊吣挲g26 64歲,平均36歲。本研究以這247例患者為研究對(duì)象,探討HPV感染與宮頸病變的關(guān)系。

根據(jù)我院病理科診斷,247例患者根據(jù)宮頸病變程度將其分成4組:①慢性宮頸炎組,86例,占34.82%;②低級(jí)別鱗狀上皮病變組,包括CIN I 63例,占25.51%;③高級(jí)別鱗狀上皮病變組,包括CIN Ⅱ49例,CIN Ⅲ36例,共占34.41%;④宮頸癌組,13例,均為鱗狀細(xì)胞癌,占5.26%。

主要試劑及儀器:HPV核酸擴(kuò)增分型檢測(cè)系統(tǒng),包括DNA提取試劑盒、PCR擴(kuò)增試劑盒及雜交試劑盒和醫(yī)用核酸分子快速雜交儀由潮州凱普生物科技有限公司生產(chǎn),TC-25/H基因擴(kuò)增儀由杭州博日科技有限公司生產(chǎn)。

樣本采集和測(cè)定:①HPV分型標(biāo)本取樣步驟及要求以潮州凱普生物有限公司生產(chǎn)的一次性宮頸細(xì)胞采集器取宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本,先用棉簽將陰道或?qū)m頸過(guò)多的分泌物輕輕擦拭干凈,再用專用宮頸刷伸入宮頸口處輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)宮頸刷使其順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈,然后再放入專用細(xì)胞保存液試管中。以上標(biāo)本均于4℃保存,2周內(nèi)檢測(cè)。②HPV的分型檢測(cè) 嚴(yán)格按照凱普HPV分型檢測(cè)試劑盒要求進(jìn)行DNA提取,PCR擴(kuò)增,快速導(dǎo)流雜交,顯色后對(duì)樣本進(jìn)行結(jié)果判斷,共能檢測(cè)16、18 、31 、33 、35 、39 、45 、51 、52 、56 、58 、59 、68 、6 、11 、42、43、44 、53、66、CP8304 等 21 種 HPV 基因型 。

所有數(shù)據(jù)錄入計(jì)算機(jī),采用Minitab15統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié) 果

2.1 HPV檢測(cè)結(jié)果

在247例HPV感染患者中,檢出21種亞型中的18種亞型,共314株HPV病毒,未檢出42、43及44亞型。高危型HPV感染率最高的3種亞型分別是:16型21.97%(69/314),52型17.52%(55/314),58型11.15%(35/314),其他亞型分別為33型5.41%(17/314),18型5.1%(16/314),31型4.46%(14/314),68型3.5%(11/314),56型3.5%(11/314),39型2.23%(7/314),51型1.91%(6/314),45型1.59%(5/314),59型1.27%(4/314),35型0.64%(2/314);低危型HPV感染率最高的3種亞型分別是:53型7.32%(23/314),CP8304型5.73(18/314),6型2.87%(9/314),其他亞型分別為11型1.91%(6/314),66型 1.91%(6/314)。單一高危型感染152例;單一低危型感染37例;多重感染58例,其中僅同時(shí)感染多種高危型31例,同時(shí)感染多種低危型1例,同時(shí)感染高危和低危型26例。

2.2 HPV感染類型與宮頸病變的關(guān)系

根據(jù)患者感染的HPV類型,可以把患者分為3組:A組:僅感染高危型HPV(包括單一亞型感染和多種亞型混合感染),B組:僅感染低危型HPV(包括單一亞型感染和多種亞型混合感染),C組:同時(shí)感染高危型和低危型HPV的混合型感染。3種感染與宮頸病變類型間的關(guān)系見(jiàn)表1。

表1 HPV類型與宮頸病變類型間的關(guān)系

2.3 多重HPV感染與宮頸病變的關(guān)系

為了研究多重HPV感染與宮頸病變類型的關(guān)系,本研究將HPV多重感染患者分為:D組,僅同時(shí)感染多種高危亞型HPV;E組,同時(shí)感染多種低危亞型HPV。將感染單一HPV患者分為:F組,僅感染一種高危亞型HPV;G組,僅感染一種低危亞型HPV。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 HPV多重感染與宮頸病變類型間的關(guān)系

從表2可見(jiàn),感染多種高危亞型HPV與感染單一高危亞型HPV對(duì)感染者的病變類型并無(wú)影響。本次研究中因感染多種低危亞型HPV樣本量過(guò)少,故無(wú)法完成與單一低危亞型HPV感染的比較。

2.4 不同宮頸病變類型患者中HPV亞型分布

慢性宮頸炎組中檢測(cè)出 16、18、31、33、39、51、52 、56、58 、59、68、6、11 、53、66、CP8304 亞型,感染率最高的3種亞型分別是:52型 27.18%(28/103),16型10.68%(11/103),CP8304型10.68%(11/103);低級(jí)別鱗狀上皮病變組中檢測(cè)出16 、18、31、33、35、39 、45、52、56、58、59 、68、6、11、53.、66、CP8304 亞型,感染率最高的3 種亞型分別是:52型16%(16/100),68型14%(14/100),16型12%(12/100);高級(jí)別鱗狀上皮病變組中檢測(cè)出 16、18、31 、33、45、51 、52、56、58、59 亞型,感染率最高的3種亞型分別是:16型41.05%(39/95),18型26.31%(25/95),52型13.68%(13/95);宮頸癌組中檢測(cè)出 16、18、45、56、58 、68亞型,感染率最高的3種亞型分別是:16型50%(8/16),18型18.75%(3/16),45型12.5%(2/16)。HPV16與宮頸病變嚴(yán)重程度明顯相關(guān),他在宮頸癌、高級(jí)別鱗狀上皮病變組、低級(jí)別鱗狀上皮病變組和宮頸炎組感染率分別為50%、41.05%、12%、10.68%。4組HPV感染率相比差異顯著(χ2=40.525,P<0.01)。

3 討 論

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)中發(fā)病率占第1位的婦科惡性腫瘤,嚴(yán)重威脅了婦女的生命健康。德國(guó)科學(xué)家Harald Zur Hausen因提出人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌發(fā)病的相關(guān)性學(xué)說(shuō)而獲得2008年諾貝爾生理和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),使得宮頸癌發(fā)病的傳統(tǒng)腫瘤研究模式轉(zhuǎn)化為以HPV感染為中心的新病因?qū)W的研究模式。持續(xù)性高危型HPV感染導(dǎo)致宮頸病變和宮頸癌發(fā)生學(xué)說(shuō)的確立,使宮頸癌成為目前唯一一種病因明確的可以預(yù)防和治愈的惡性腫瘤[1-2]。宮頸癌在全球婦女癌癥死亡率中位居第2位,每年全球大約有50萬(wàn)新發(fā)宮頸癌病例,約20萬(wàn)人死于宮頸癌。HPV作為宮頸癌的主要病因的發(fā)現(xiàn)揭示了其感染性疾病的本質(zhì),這對(duì)預(yù)防和治療都產(chǎn)生了巨大的影響[3]。目前已經(jīng)分離出 100多種HPV基因型,不同類型的HPV致病力存在較大的差異。根據(jù)與女性生殖道疾病的關(guān)系,HPV被分為高危型群和低危型群,其中以高危型與宮頸癌的發(fā)生關(guān)系最為密切[4]。

從表1的結(jié)果來(lái)看,單純高危型HPV感染與單純低危型HPV感染組相比,高危型HPV感染者宮頸癌構(gòu)成比顯著高于低危型HPV感染者。提示宮頸癌的發(fā)生與高危型HPV關(guān)系密切。

高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌及癌前病變發(fā)生發(fā)展的必要條件,而HPV的多重感染是否會(huì)增加和促進(jìn)宮頸癌變的發(fā)生目前卻無(wú)統(tǒng)一說(shuō)法。多數(shù)人認(rèn)為,多重感染并不增加宮頸癌的發(fā)生率[5-6],但也有學(xué)者認(rèn)為多重感染促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生[7]。本研究中從表2結(jié)果來(lái)看,高危型HPV的多重感染與單一亞型感染比較(χ2=1.284,P>0.05)不同宮頸疾病的構(gòu)成比差別不顯著,與周武等的研究結(jié)果相一致[8]。提示高危型HPV無(wú)論單一或多重感染并不改變宮頸病變的程度。

宮頸癌組織中主要感染的HPV基因型存在地理差異。在本次研究中宮頸癌的主要感染型別依次是:16型(50%),18型(18.75%),45型(12.5%),與國(guó)際癌癥研究協(xié)會(huì)的調(diào)查基本相近[5]。宮頸癌及高級(jí)別鱗狀上皮病變組中HPV16型感染率均居首位,且隨病變級(jí)別增加感染率逐步上升,提示HPV16型感染仍是宮頸癌的最大威脅。

[1] 廖秦平,趙 健,陳 銳.HPV感染的處理原則及HPV檢測(cè)與隨訪[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2010,26(3):172.

[2] 陶萍萍,卞美璐.女性生殖道人乳頭狀瘤病毒基因型研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2005,21(8):507.

[3] 郎景和.迎接子宮頸癌預(yù)防的全球挑戰(zhàn)與機(jī)遇.中華婦產(chǎn)科雜志,2002,37:129.

[4] Clifford GM,Smith JS,Plummer M,et al.Human papillomavirus types in invasive cervical cancer worldwide:a metaanalysis[J].Br J Cancer,2003,88(1):63.

[5] Munoz N,Bosch F X,Castellsague X,et al.Against which human papillomavirus types shall we vaccinate and screen?The international perspective[J].Int J Cancer,2004,111:278.

[6] An H J,Cho N H,Lee S Y,et al.Correlation of cervical carcinoma and precancerous lesions with human papillomavirus(HPV)genotypes detected with the HPV DNA chip microarray method.Cancer,2003,97:1672.

[7] 呂榮宇.宮頸病變與HPV多重感染的關(guān)系探討[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué),2007,7(9):1600.

[8] 周 武,陳占國(guó),陶志華,等.不同HPV亞型的多重感染和年齡因素與宮頸病變的關(guān)系[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2008,18(12):2632.