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    2型糖尿病并不穩(wěn)定型心絞痛患者hs-CRP、Lp(a)和ADPN懸浮芯片集成檢測及意義

    2011-07-31 03:11:10映峰
    山東醫(yī)藥 2011年25期
    關(guān)鍵詞:冠脈硬化心血管

    映峰*

    (1南方醫(yī)科大學珠江醫(yī)院,廣州 510282;2清遠市人民醫(yī)院)

    冠心病(CHD)和2型糖尿病(T2DM)關(guān)系密切,T2DM患者出現(xiàn)冠脈粥樣硬化的時間早、程度重、預后差[1]。因 T2DM 的自主神經(jīng)病變可使不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)的早期臨床表現(xiàn)不典型,故及時診斷T2DM并UAP有助于盡快干預冠脈粥樣硬化進展,減少患者心血管疾病的致殘率和病死率。在T2DM和冠脈粥樣硬化脂質(zhì)斑塊形成過程中,既有脂質(zhì)斑塊代謝紊亂,也有炎癥因子參與,表明炎癥反應可能是連接T2DM和冠脈粥樣硬化發(fā)展的一個紐帶[2];因單項檢測炎癥因子診斷CHD的價值有限,故多項指標的懸浮芯片集成檢測有望提高其早期診斷。為探討高敏 C-反應蛋白(hs-CRP)、脂蛋白 a[Lp(a)]、脂聯(lián)素(ADPN)懸浮芯片集成檢測診斷T2DM并UAP的臨床價值,我們進行了相關(guān)研究?,F(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 收集2007年4月~2008年4月在珠江醫(yī)院住院的UAP患者102例,男70例、女32例,年齡(61.6±10.8)歲?;颊呓?個月出現(xiàn)心絞痛表現(xiàn),或原有穩(wěn)定型心絞痛表現(xiàn)而近期發(fā)生變化;冠脈造影顯示左主干、左前降支、左回旋支和右冠脈中至少有一支病變血管狹窄直徑≥75%。排除急性心肌梗死、吸煙、高脂血癥、高血壓病史、肝腎功能不全、急性感染、惡性腫瘤、肺栓塞、下肢動靜脈栓塞、全身免疫性疾病及凝血功能障礙者。根據(jù)患者有無T2DM病史分為兩組,觀察組52例有T2DM病史,對照組50例無T2DM病史;兩組性別、年齡有可比性,其冠脈病變血管檢測參數(shù)見表1。

    表1 兩組冠脈病變血管檢測參數(shù)比較(±s)

    表1 兩組冠脈病變血管檢測參數(shù)比較(±s)

    檢測參數(shù) 觀察組(n=52)對照組(n=50)P冠脈病變狹窄程度(%)90.5 ±8.20 86.3 ±10.10 <0.05冠脈病變長度(mm) 26.8 ±6.20 10.6 ± 5.60 <0.05彌漫病變(例) 36 18 <0.05多支冠脈病變(例)30 10 <0.05

    1.2 檢測方法 抽取兩組入院次晨靜脈血5 ml,3 500 r/min離心10 min后分離血清,-80℃冰箱凍存。將分別包被hs-CRP、Lp(a)、ADPN抗體的偶聯(lián)微珠按50 μl/孔加入96孔板中,真空抽干;加入100 μl/孔的 1 × Washing Buffer,真空抽干;分別加入用 1×Washing Buffer 1∶2 000稀釋的樣品100 μl/孔、標準品Ⅰ~Ⅵ,貼上封板膜。將反應板放在平板搖床上,先后1 100 r/min振蕩1 min、600 r/min避光室溫孵育15 min;真空抽濾,加入100 μl/孔的1 ×Washing Buffer,洗滌3 次;加入100 μl/孔的生物素標記抗體,將反應板放在平板搖床上,先后1 100 r/min振蕩1 min、600 r/min避光室溫孵育15 min;真空抽濾,加入 100 μl/孔的 1 × Washing Buffer,洗滌3次;加入用1×Assay buffer 1∶12.5稀釋的鏈親和素—藻紅蛋白50 μl/孔,將反應板放在平板搖床上,先后1 100 r/min振蕩1 min、400 r/min避光室溫孵育15 min;真空抽濾,加入100 μl/孔的1×Washing Buffer,洗滌 3 次;加入 125 μl/孔的 1 × Assay buffer重懸微珠,將反應板放在平板搖床上,1 100 r/min振蕩1 min。最后,將反應板置于Lumi-nex100多功能流式點陣分析儀上讀數(shù)。

    1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,計量數(shù)據(jù)以±s表示,兩組比較用t檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    兩組檢測指標比較見表2。

    表2 兩組檢測指標比較(mg/L,±s)

    表2 兩組檢測指標比較(mg/L,±s)

    注:與對照組比較,*P <0.01

    組別 n hs-CRP Lp(a)ADPN觀察組 52 11.6 ±5.3* 406 ±156* 5.5 ±3.2*對照組50 8.3 ±3.4 337 ±130 7.2 ±2.6

    3 討論

    T2DM并CHD患者發(fā)生UAP時,其冠脈造影多見血管病變較嚴重且彌漫,患者預后較差;如能及時對T2DM并UAP患者做出診斷并早期進行干預,T2DM并CHD的心血管事件將得到有效抑制。傳統(tǒng)診斷T2DM并CHD的方法特異性不高,而冠脈造影是有創(chuàng)檢查。因此,尋找簡便快捷診斷T2DM并CHD的方法極為必要。

    研究表明,DM患者的CHD患病率高于非DM人群,各種慢性并發(fā)癥(特別是心血管事件)已成為T2DM患者的主要死亡原因;因炎癥反應在T2DM冠脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用,故大量研究發(fā)現(xiàn)hs-CRP、Lp(a)、ADPN是CHD的獨立危險因素[3,4],且其對心血管事件發(fā)生具有良好的預測價值。目前,hs-CRP及Lp(a)作為CHD的獨立危險因素、ADPN作為CHD的強保護因子,在臨床廣泛應用;但因檢測方法僅能觀察單個炎癥因子,其敏感性和特異性均受影響。此外,CHD致病因素復雜,迄今尚無一種炎癥因子可單獨預測CHD事件發(fā)生。

    懸浮芯片集成檢測技術(shù)是將流式細胞技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)有機地整合在一起,實現(xiàn)多因子集成檢測,具有應用范圍廣、快速高效等優(yōu)點。既往研究證實[5],采用懸浮芯片集成檢測診斷CHD的敏感性及準確性均明顯高于酶聯(lián)免疫吸附檢測,可提高CHD的早期預測。本研究顯示,與對照組比較,觀察組的冠脈病變狹窄程度嚴重,冠脈病變長,彌漫病變及多支冠脈病變多;血清hs-CRP、Lp(a)明顯升高,ADPN明顯降低,與文獻報道的糖調(diào)節(jié)受損導致冠脈粥樣硬化的危險因素作用增強、炎癥反應參與冠脈粥樣硬化形成及其并發(fā)癥的過程一致[6]。提示懸浮芯片集成檢測技術(shù)將hs-CRP、Lp(a)、ADPN的檢測方法統(tǒng)一在一個平臺上,能在較短時間內(nèi)準確地獲得多指標的信息。

    總之,本研究表明懸浮芯片集成檢測技術(shù)監(jiān)測炎癥因子變化,可及早診斷T2DM并UAP患者,進行有效干預,以減少其心血管事件發(fā)生。

    [1]Burke AP,Kolodgie FD,Zieske A,et al.Morphologic findings of coronary atherosclerotic plaques in diabetics:a postmortem study[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2004,24(7):1266-1271.

    [2]Sobel BE.Optimizing cardiovascular outcomes in diabetes mellitus[J].Am J Med,2007,120(suppl 2):3-11.

    [3]Abou DCH,Oghlakian GO,Antonios SI,et al.The role of high sensitivity c-reactive protein in coronary artery disease risk prediction:a review[J].J Med Liban,2004,52(1):39-47.

    [4]Kato H,Kashiwagi H,Shiraga M,et al.Adiponectin acts as an endogenous antithrombotic factor[J].Arterioscl Thromb Vasc Biol,2006,26(1):224-230.

    [5]李健洪,劉映峰,繆緋,等.超敏C反應蛋白、脂蛋白(a)和脂聯(lián)素集成檢測診斷冠心病的價值[J].心臟雜志,2008,20(2):210-212.

    [6]Chazova TE,Masenko VP,Zykov KA,et al.The role of inflammation factors in development of acute coronary syndrome in patients with type 2 diabetes mellitus and impaired glucose tolerance[J].Ter Arkh,2007,79(6):60-64.

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