乙肝病毒感染或攜帶產(chǎn)婦檢測乳汁乙肝病毒DNA結(jié)果分析

黃蓮芬

廣西壯族自治區(qū)北海市第二人民醫(yī)院，廣西北海 536000

慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是嚴(yán)重影響健康的公共衛(wèi)生問題，在我國HBV感染者約有1.3億[1]。母嬰傳播是我國HBV感染的一個重要途徑，也是乙肝高發(fā)的重要原因。有研究指出，30%～50%的HBV慢性攜帶者是由母嬰傳播引起的[2]。母嬰傳播主要有宮內(nèi)感染、產(chǎn)道傳播和產(chǎn)后傳播3種傳播方式。雖然，母乳喂養(yǎng)能夠提供多種豐富的營養(yǎng)和免疫物質(zhì)，但當(dāng)前關(guān)于慢性乙型肝炎病毒感染的產(chǎn)婦是否應(yīng)母乳喂養(yǎng)存在爭議[3]。為此，筆者對86例HBV感染或攜帶的產(chǎn)婦進(jìn)行乳汁乙肝病毒DNA檢測，將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院婦產(chǎn)科住院分娩的乙肝病毒感染或攜帶的86例產(chǎn)婦作為研究對象，產(chǎn)婦年齡26～42歲。所有產(chǎn)婦均經(jīng)血乙肝病毒檢測，根據(jù)2000年全國病毒性肝炎學(xué)術(shù)會議修訂的《病毒性肝炎防治方案》中乙肝的診斷標(biāo)準(zhǔn)確診[4]?；颊叩母喂δ鼙彼岚被D(zhuǎn)移酶（ALT）均正常，無其他并發(fā)癥。其中，84例足月產(chǎn)，2例早產(chǎn)。

1.2 研究分組

根據(jù)產(chǎn)婦HBV血清標(biāo)志物分為大三陽組（A組）、小三陽組（B組）和雙抗陽性組（C組）三組：A組23例患者（26.7%），患者血液檢測顯示 HBsAg、HBeAg和 HBcAb三者均為陽性；B組34例患者（39.5%），患者血液檢測顯示HBsAg、HBeAb和HBcAb三者均為陽性；C組29例患者（33.7%），患者血液檢測顯示HBeAb和HBcAb陽性。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集方法

1.3.1.1 產(chǎn)婦外周血的收集 抽取3 ml的產(chǎn)婦靜脈血注入試管，靜置60 min。之后，以3000 r/min的速率進(jìn)行離心，約20 min后分離血清。將分離后的血清直接或保存在≥-20℃的冰箱內(nèi)，待HBV-M和HBV-DNA檢測。

1.3.1.2 乳汁的收集 產(chǎn)婦分娩3～5 d分泌初乳后，囑產(chǎn)婦用清水或肥皂水清洗干凈乳頭，并對乳頭進(jìn)行消毒處理。對產(chǎn)婦乳房進(jìn)行輕柔按摩，待乳腺管暢通后輕壓乳暈，使乳汁流出。用清潔干燥的試管收集3～5 ml乳汁。以3000 r/min的速率進(jìn)行離心，約10 min后取中層乳清，直接或保存在≥-20℃的冰箱內(nèi)，待HBV-M和HBV-DNA檢測。

1.3.2 標(biāo)本檢測方法

HBV-DNA采用杭州博日科技有限公司生產(chǎn)的Line-Gene熒光定量PCR檢測系統(tǒng)和上海安亭GL-20G-Ⅱ高速冷凍離心機(jī)，HBV-DNA試劑為廣州中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心提供，嚴(yán)格按說明書操作。母體乙肝五項均采用 ELISA方法，安圖PHOMO全自動酶標(biāo)儀，試劑由珠海麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用百分率表示，行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 孕婦血清免疫學(xué)指標(biāo)與乳汁HBV-DNA陽性的關(guān)系

對三組HBV攜帶產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA檢測結(jié)果進(jìn)行分析，可知A組產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性率最高，達(dá)78.3%，B組產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性率為29.4%，C組產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性率為10.3%。3組產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性率比較，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=26.74，P<0.001）。見表1。

表1 三組HBV攜帶產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA檢測結(jié)果比較[n（%）]

2.2 產(chǎn)婦血清HBV-DNA病毒載量與乳汁HBV-DNA陽性的關(guān)系

本研究中，86例產(chǎn)婦血清的HBV-DNA病毒載量≤500copies/ml 25例，占29.1%；HBV-DNA病毒載量介于500～106copies/ml 18例，占20.9%，HBV-DNA病毒載量≥106copies/ml 43例，占50.0%。

對三組產(chǎn)婦血清HBV-DNA病毒載量中HBV-DNA檢測結(jié)果進(jìn)行分析，可知HBV-DNA≥106copies/ml時產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性率最高，達(dá)18.6%。三組產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性率比較，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.82，P<0.01）。見表2。

3 討論

母乳是嬰兒獲取營養(yǎng)成分和免疫物質(zhì)的重要方法，是嬰兒的天然食品。但是，對于感染HBV的乳母來說，母乳喂養(yǎng)是增加嬰兒感染HBV的一種途徑。乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的世界性傳染病，母嬰傳播是我國乙型肝炎病毒傳播的一個重要途徑，也是我國乙肝高發(fā)的重要原因。

表2 孕婦血清HBV-DNA病毒載量與乳汁HBV-DNA陽性的關(guān)系[n（%）]

HBV母嬰傳播主要有宮內(nèi)感染、產(chǎn)道感染和產(chǎn)后感染3個途徑，其中，產(chǎn)后感染的主要介質(zhì)是母乳[5]。有研究指出，HBV攜帶的產(chǎn)婦的乳汁中能夠檢出HBV-DNA，表明母乳喂養(yǎng)可能是HBV傳播的重要途徑[6]。有研究[7]通過乳母血清HBV指標(biāo)進(jìn)行判定，指出HBsAg陽性與HBeAg、抗-HBcIgM或HBcAg并存時，乳汁有一定的傳染性，不宜哺乳。另外，早期的母乳中含有大量的淋巴細(xì)胞，存在HBV-DNA在母乳中整合和復(fù)制為HBV的可能性。當(dāng)嬰兒口腔、咽、食道、胃、腸道等任何一處消化道黏膜發(fā)生炎性水腫、滲出時，母乳中的HBV則能夠通過毛細(xì)血管網(wǎng)進(jìn)入嬰兒血液循環(huán)，引起HBV感染。

HBV-DNA是HBV基因組成和復(fù)制的模板，因此，乳汁中檢出HBV-DNA陽性直接地反映了乳汁中病毒存在的狀態(tài)，是HBV感染的直接依據(jù)，也是衡量其傳染性的重要依據(jù)[8]。有研究稱[9]，乳汁中HBV-DNA的檢出與血清HBeAg陽性并不完全一致，部分HBeAg陰性產(chǎn)婦乳汁中仍能檢出HBVDNA。HBsAg和HBeAg雙陽性的母親通過母嬰垂直傳播感染新生兒的可能性高達(dá)90%；僅HBsAg陽性的母親，新生兒有40%～70%為慢性乙肝病毒攜帶者[10]。

本文對孕婦血清免疫學(xué)指標(biāo)與產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性的關(guān)系進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)大三陽組的HBV-DNA陽性率最高，雙抗陽性組的HBV-DNA陽性率最低，經(jīng)檢驗(yàn)大三陽組的產(chǎn)婦乳汁中HBV-DNA陽性率顯著高于小三陽組和雙抗陽性組?？梢姡槟秆逯幸腋胃腥境潭扰c乳汁中HBVDNA水平呈正相關(guān)關(guān)系，即乳母血清中乙肝感染程度越高則乳汁中HBV-DNA陽性率越高。

通過對產(chǎn)婦血清中HBV-DNA病毒載量水平與乳汁HBV-DNA陽性率的關(guān)系進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，HBV-DNA≥106copies/ml時，乳汁HBV-DNA才有陽性檢出。這與相關(guān)研究結(jié)果是一致的[8]。有學(xué)者采用ELISA法測定產(chǎn)婦血清和乳汁中的HBsAg和HBeAg滴度，指出高滴度HBeAg攜帶者母乳含有HBV-DNA，而低滴度含量很小[11]。

但也有研究認(rèn)為母乳中HBV-DNA的含量顯著低于血清中的濃度，胎兒宮內(nèi)和產(chǎn)時感染病毒的數(shù)量和機(jī)會顯著高于乳汁傳播[12]。且一般在乳母的乳頭皸裂出血或嬰兒有消化道黏膜破損時，HBV陽性乳母才能將HBV病毒通過乳汁傳染給嬰兒[1]。

通過以上分析，筆者發(fā)現(xiàn)產(chǎn)婦血清中HBV水平的高低與乳汁中HBV成正相關(guān)關(guān)系。通過對母乳中HBV-DNA檢測，決定是否采取母乳喂養(yǎng)是當(dāng)前比較一致的觀點(diǎn)。對于血清中HBV-DNA檢測結(jié)果＜106copies/ml時，乳汁中沒有檢測出HBV-DNA陽性，這種情況下，建議對嬰兒采取一定的免疫預(yù)防措施，繼續(xù)母乳喂養(yǎng)。這與相關(guān)研究報道[2]結(jié)果相似。若乙肝病毒感染的母親乳汁中檢測出HBV-DNA，或乙肝病毒感染的母親乳頭有潰瘍、出血，或母親為乙肝大三陽伴有肝功能異常，則不建議進(jìn)行母乳喂養(yǎng)，防止HBV通過乳汁傳播。

[1]王建設(shè),朱啟镕.母乳喂養(yǎng)與乙型肝炎病毒母嬰傳播[J].臨床兒科雜志,2004,22(5):328-329.

[2]馬力,趙桂珍.實(shí)時熒光定量PCR與酶聯(lián)定量PCR技術(shù)在HBV-DNA載量檢測中的比較研究[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2005,34(4):341-343.

[3]Hill JB,Sheffield JS,Kim MJ,et al.Risk of hepatitis B transmission in breast-fed infants of chronic hepatitis B carriers[J].Obstel Gynecol,2002,99(6):1049

[4]中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會肝病學(xué)分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華肝臟病雜志,2000,8:324-329.

[5]朱云霞,張華,鄒懷賓,等.乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦乳汁的HBV-DNA研究[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2010,17(25):7-9.

[6]羅世香,焦存仙.檢測孕婦血清、乳汁及新生兒血清乙肝標(biāo)志物的優(yōu)生學(xué)意義[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2000,8(2):74,115.

[7]羅志粦,鄭遜.HBsAg陽性產(chǎn)婦母乳喂養(yǎng)與乙肝病毒母嬰傳播的相關(guān)性研究[J].福建醫(yī)藥雜志,2010,32(5):45-47.

[8]田瑞華.乙肝病毒攜帶者母乳喂養(yǎng)的安全性研究[J].中華護(hù)理雜志,2010,45(8):739-740.

[9]李小毛,劉穗玲,李霞,等.孕婦血、臍血、乳汁的乙型肝炎病毒DNA水平及其相關(guān)性[J].中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2000,18(3):233-235.

[10]劉玉玲.妊娠合并病毒性肝炎的產(chǎn)科處理[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2004,20(2):80-81.

[11]清圖,馬振芝,修霞,等.乙肝病毒母嬰傳播的途徑[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2006,14(l):127-128.

[12]李雁.乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦母乳喂養(yǎng)的安全性[J].中國社區(qū)醫(yī)師:醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊,2009,11(5):16-17.