男性不育患者血清和精漿中鉛、超氧化物歧化酶和丙二醛含量的研究

高亞萍，陳拽生，邵 嵐，李國正，杜麗榮，李榮秀*

1.河北省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究院，河北石家莊 050071；2.石家莊市婦幼保健院，河北石家莊 050081

研究發(fā)現(xiàn)男性不育癥患者精漿中超氧化物歧化酶（SOD）活性降低[1]，丙二醛（MDA）含量升高。另有研究表明，汽車司機(jī)血液中SOD活性隨著血鉛水平的上升而降低，血液中MDA含量隨著血鉛水平的上升而升高[2]，提示男性不育患者精漿中SOD和MDA含量的變化可能與鉛污染有關(guān)。但是，男性不育者精漿中SOD和MDA的變化與血清和精漿中的鉛含量的研究數(shù)據(jù)，尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。近年來，由于電子產(chǎn)業(yè)、汽車和交通業(yè)的迅猛發(fā)展，含鉛物質(zhì)對環(huán)境的污染日益加劇，男性不育患者呈逐年上升趨勢。本研究對無明顯鉛污染接觸史的男性不育患者測定血清和精漿中鉛水平、SOD活力和MDA含量，與精液常規(guī)檢驗(yàn)正常男性進(jìn)行比較，旨揭示男性不育癥患者精漿中SOD活性降低，MDA含量升高的因素，為尋求更有效的診治方法提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年9月～2010年11月在河北省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究院男科門診就診的患者，檢查前6個(gè)月內(nèi)無服用對精子有影響的食物或激素類藥物，除去精液中白細(xì)胞異常增多和輸精管梗阻者。按照世界衛(wèi)生組織（WHO）的精液分析標(biāo)準(zhǔn)，隨機(jī)選擇精子密度≥20×106/ml，A、B級精子≥50%的精液常規(guī)正常者100例為對照組，均為無明顯鉛接觸史，無生殖道疾病，無開車史和抽煙史，前來查體欲求優(yōu)生者。精子常規(guī)檢查為少、弱、畸精子癥的不育患者95例為不育組，兩組受試對象年齡22～38歲，平均（32.0±3.6）歲。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 樣品的采集與處理

1.2.1 精液標(biāo)本的收集 受試者禁欲3～5 d，手淫法收集精液，標(biāo)本置于37℃水浴中，液化30 min后作精液分析，余下精液3000 r/min離心5 min，分離精漿，置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 血樣采集 取肘內(nèi)側(cè)經(jīng)脈血，采血區(qū)皮膚依次經(jīng)過0.2%硝酸、去離子水、碘酒、酒精棉球消毒，用一次性真空管采血管取靜脈血約2 ml，室溫靜置20 min后，2000 r/min離心5 min，取血清于塑料具塞離心管中，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 方法

SOD活力采用黃嘌呤氧化酶比色法測定，MDA采用硫代巴比妥酸比色法測定，試劑盒均購自上海源葉生物科技有限公司，按說明書嚴(yán)格操作。鉛含量測定采用原子吸收光譜法。采用北京偉力精子輔助分析儀進(jìn)行精液分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 10.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用 t檢驗(yàn)，以 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清檢測結(jié)果

不育組血清中SOD活力與對照組相比無明顯變化，MDA含量與對照組相比，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。鉛含量與對照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。血清中各項(xiàng)指標(biāo)的數(shù)據(jù)均為正態(tài)分布，見表1。

表1 兩組男性血清中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

表1 兩組男性血清中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

組別 例數(shù) SOD（U/mL） MDA（nmol/ml）鉛含量（nmol/ml）不育組對照組t值P值951000.483±0.0630.491±0.0971.208＞0.050.140±0.0610.107±0.01510.041＜0.0129.833±4.86120.582±2.1131.781＜0.05

2.2 精漿檢測結(jié)果

不育組精漿中SOD活力與對照組相比顯著降低，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。MDA和鉛含量與對照組相比顯著升高（P<0.01）。不育組精漿中MDA含量和對照組鉛含量數(shù)據(jù)均為正態(tài)分布，見表2。

表2 兩組男性精漿中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

表2 兩組男性精漿中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

組別 例數(shù) SOD（U/mL） MDA（nmol/ml） 鉛含量（nmol/ml）不育組對照組t值P值951000.206±0.0450.312±0.10083.845＜0.010.149±0.1190.098±0.01316.666＜0.019.413±1.7123.961±1.4939.320＜0.01

3 討論

精漿中少量的氧自由基對精子獲能和完成頂體反應(yīng)是必需的，但過多的氧自由基可使精子線粒體膜精子質(zhì)膜發(fā)生質(zhì)脂過氧化，內(nèi)膜嵴減少、ATP合成減少，從而影響精子活動力[3]。同時(shí)，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)生的降解產(chǎn)物，如MDA等，可抑制精子線粒體功能和包括腺苷酸環(huán)化酶在內(nèi)的多種酶的活性，影響精子的運(yùn)動功能[4]。目前認(rèn)為精漿中SOD作為體內(nèi)清除氧自由基的主要酶，是抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對精子損害的重要保護(hù)因子[5]。

導(dǎo)致體內(nèi)自由基增多的因素主要有炎癥性疾病，空氣污染（包括煙霧、臭氧）、致癌性化學(xué)物質(zhì)、油漆、石棉、某些藥物、農(nóng)藥、射線、鉛中毒等[6]。精子細(xì)胞是人體細(xì)胞對毒性物質(zhì)最敏感的細(xì)胞，微量毒性物質(zhì)便可造成精子的損傷。

由細(xì)菌感染因素[7]以及由炎癥導(dǎo)致的抗精子抗體陽性患者[8]SOD活性降低和MDA含量升高已經(jīng)有研究證實(shí)，因此，本研究排除了精液中白細(xì)胞增多患者。

通過檢測無明顯鉛污染接觸史的男性不育患者與對照組血清中SOD活力比較分析，男性不育癥患者血清中SOD活力無明顯變化，而鉛和MDA含量較對照組顯著升高。男性不育癥患者與對照組精漿中SOD活力，MDA和鉛含量比較分析顯示，男性不育癥患者精漿中SOD活力較對照組顯著降低，而MDA和鉛含量較對照組顯著升高（P<0.01）。血清中SOD活力變化不明顯，可能是血清中過氧化反應(yīng)較輕，消耗SOD較少的原因。MDA含量在男性不育者血清和精漿中均有極顯著性差異，這一結(jié)果提示，在測定MDA含量時(shí)可根據(jù)患者情況決定收集血清樣本或精漿樣本，以達(dá)到同樣的診斷目的。

本文結(jié)果另一發(fā)現(xiàn)是無明顯鉛污染接觸史的男性不育患者，血清和精漿中鉛和MDA含量明顯升高，并伴有精漿中SOD活力降低和MDA含量升高，表明過氧化反應(yīng)增強(qiáng)與體內(nèi)鉛含量升高有關(guān)，精液中氧自由基和MDA的增多可能是造成男性不育和精子質(zhì)量下降的重要原因。這種結(jié)果會對精子的活力有較顯著的影響[9]。它不但影響精子的功能，而且還可以影響精子的生成和精子的形態(tài)[10]。表明男性不育的主要因素是受到了環(huán)境中鉛的污染，因?yàn)殂U的用途廣泛，涉及到人們的衣食住行，鉛可污染空氣和土壤，通過呼吸道、消化道和皮膚黏膜進(jìn)入人體，并且不易排出體外，可在體內(nèi)儲存幾十年，對人體造成潛在的危害，精細(xì)胞較人體其他細(xì)胞對于毒性物質(zhì)的損害敏感，容易受到傷害，這種傷害應(yīng)引起人們的高度重視，它可造成男性不育，還可影響到下一代人的身體健康。

綜上所述，血清和精漿中鉛含量的升高，可能是導(dǎo)致精漿中SOD活性降低，MDA含量升高的主要因素，為男性不育患者提供排鉛和抗氧化診治方案提供了可靠依據(jù)。

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