那西肽對肉仔雞空腸二糖酶活性的影響

南京曉莊學院生物化工與環(huán)境工程學院 戈 千 周業(yè)飛＊ 周梅仙

那西肽是一種含硫多肽類抗生素（Benazet，1980），對革蘭氏陽性菌蛋白質的合成有抑制作用，但因水溶性較差，目前尚未應用于臨床。由于那西肽具有良好的生長刺激作用，且在動物體內不會殘留，現在已被開發(fā)成為一種商品化的新型非吸收型飼料添加劑。近年來的研究表明，那西肽可有效促進肉仔雞增重，并提高飼料轉化率（Yang，2010；薩 仁 娜 ，1997；Benazet，1980）， 但 對其機制研究報道則較少。本研究以7日齡AA肉仔雞為試驗對象，研究了那西肽對肉仔雞空腸二糖酶活性的影響，以此揭示那西肽影響肉仔雞生長機理。為進一步探討那西肽對肉仔雞促生長機理及合理利用那西肽提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物 AA肉雞，由江蘇省海安縣雙效種禽有限責任公司孵禽場提供。

1.1.2 那西肽 0.25%那西肽預混劑，由杭州匯能生物技術有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 試驗動物分組與管理 選取7日齡AA肉雞140只，雌雄各半，稱重，隨機分成4組，分別為對照組和試驗1、2、3組，每組30只，進行籠養(yǎng)，每籠10只，自由采食和飲水，持續(xù)光照。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎日糧 （日糧組成及營養(yǎng)水平見表1），試驗1、2、3組在基礎日糧中分別添加0.5‰、1‰、2‰的那西肽預混劑的日糧。試驗期為42 d。

1.2.2 肉仔雞體重的測定 以每個重復為單位分別測定7、42日齡空腹體重，計算7～42日齡肉雞體增重。

表1 試驗基礎日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2.3 肉仔雞空腸蔗糖酶和麥芽糖酶活性測定

1.2.3.1 腸黏膜液制備 在試驗期第35 d，肉仔雞禁食12 h后稱重，接著雞頸部放血處死，剖開腹腔，取出一段空腸，用冰冷的生理鹽水輕輕沖洗后，腸段縱向切開，平鋪于冰冷的培養(yǎng)皿上，用滅菌的手術刀刀背刮取約5 g腸黏膜置于1.5 mL離心管中（內容物為腸道黏膜組織，腸道二糖酶主要存在于腸道黏膜中），-20℃保存?zhèn)溆?。參照許梓榮等（2002）方法，取約0.5 g腸黏膜于玻璃勻漿器中，加入4 mL 0.1 mol/L pH 6.8的順丁烯二酸緩沖液，冰浴勻漿，4℃放置過夜后3000 r/min離心10 min，取上清測定酶活。

1.2.3.2 蔗糖酶和麥芽糖酶活性測定 將上清液稀釋一定濃度后依據李勇等（2008）方法測定蔗糖酶和麥芽糖酶活性。酶活單位用每分鐘水解的二糖 μmol數表示，即 μmol/min。

1.2.4 數據統(tǒng)計 試驗數據采用SPSS統(tǒng)計軟件ANOVA過程中的單因素方差分析法進行分析，Duncan’s檢驗法進行各組間的多重比較，顯著水平設為0.05。所有數據均以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 那西肽對肉仔雞體重的影響 結果見表2。

由表2可知，試驗初期各組肉仔雞體重無顯著差異（P>0.05），試驗結束時0.5‰、1‰和2‰肉仔雞體增重分別比對照組肉仔雞體增重高8.2%、22.2%和 23.1%，差異均顯著（P ＜ 0.05），同時各試驗組之間肉仔雞體增重差異也顯著 （P＜0.05）。

表2 不同劑量那西肽對肉仔雞體重的影響 kg

2.2 那西肽對肉仔雞空腸蔗糖酶和麥芽糖酶活性的影響 結果見表3。

由表3可看出，各那西肽組肉仔雞空腸黏膜蔗糖酶和麥芽糖酶活性均高于對照組，其中1‰組顯著高于其他各組（P<0.05），而2‰組麥芽糖酶活性顯著高于對照組（P<0.05）?？梢娨欢▌┝康哪俏麟目稍黾尤庾须u空腸黏膜二糖酶活性。

表3 不同劑量那西肽對肉仔雞空腸蔗糖酶和麥芽糖酶活性的影響

3 討論與小結

二糖酶是幼齡動物小腸絨毛刷狀緣上的主要蛋白質 （Peng等，2010；晁洪雨和李福昌，2008），它不是由消化腺分泌的，而是來自脫落腸黏膜上皮細胞，在細胞崩解后釋放出來并附著在微絨毛的腸腔面（Ortega，1995），其活性大小是衡量腸道黏膜上皮細胞發(fā)育程度和功能強弱的一個重要指標（Lee 等，2010；陸東海等，2009），沒有小腸黏膜二糖酶，二糖不能被小腸直接吸收，就沒有糖類物質的徹底分解，更沒有單糖的吸收及能量的轉化和利用（Chotinsky等，2001；Applegate等，2009）。本試驗在肉仔雞日糧中添加1‰那西肽，結果發(fā)現，7～42日齡體增重顯著提高，蔗糖酶和麥芽糖酶活性均顯著升高，提示那西肽可促進小腸發(fā)育，增強糖代謝，進而提高家禽生產性能。

[1]晁洪雨，李福昌.日糧ADF水平對肉兔氮代謝、小腸組織學結構和二糖酶活性的影響[J].中國獸醫(yī)學報，2008，28（5）：604 ～ 607.

[2]李勇，蔡輝益，劉國華，等.地塞米松對肉仔雞空腸二糖酶活性及黏膜形態(tài)的影響[J].畜牧獸醫(yī)學報，2008，39（1）：48 ～ 52

[3]陸東海，張永青，陳安國，等.外源核苷酸對斷奶仔豬內臟器官重量、血清指標及空腸黏膜二糖酶活性的影響[J].家畜生態(tài)學報，2009，30（3）：52～55.

[4]薩仁娜，佟建明，黃美玉，等.那西肽對肉仔雞維生素營養(yǎng)和生產性能的影響[J].飼料工業(yè)，1997，18（4）：7 ～ 9

[5]許梓榮，李衛(wèi)芬，孫建義.豬胃腸道黏膜二糖酶的性質[J].動物學報，2002，48（2）：202 ～ 207.

[6]Applegate T J，Schatzmayr G，Prickel K，et al.Effect of aflatoxin culture on intestinal function and nutrient loss in laying hens[J].Poult Sci，2009，88（6）：1235～1241.

[7]Benazet F，Cartier M，Florent J，et al.Nosiheptide，a sulfur-containing peptide antibiotic iso lated from Streptomyces actuosus 40037[J].Experientia，1980a，36（4）：414 ～ 416.

[8]Benazet F，Cartier J R.Effect of nosiheptide as a feed additive in chicks on the quantity，duration，prevalence of excretion，and resistance to antibacterial agents of Salmonella typhimurium；on the proportion of Escherichia coli and other coliforms resistant to antibacterial agents；and on their degree and spectrum of resistance[J].Poult Sci，1980b，59（7）：1405 ～ 1415.

[9]Chotinsky D，Toncheva E，Profirov Y.Development of disaccharidase activity in the small intestine of broiler chickens[J].Br Poult Sci，2001，42（3）：389 ～393.

[10]Lee S H，Yu S Y，Nakayama J，et al.Core2 O-glycan structure is essential for the cell surface expression of sucrase isomaltase and dipeptidyl peptidase-IV during intestinal cell differentiation[J].J Biol Chem，2010，285 （48）：37683 ～37692.

[11]Ortega M A，Gil A and Sanchezpoza A.Maturation satus of small intestine epitheliumin rats deprived of dietary nucleotides[J].Life Science，1995，5（6）：1623～1630.

[12]Peng P，Xu J，Chen W，et al.Effects of early feeding and exogenous putrescine on growth and small intestinal development in posthatch ducks[J].Br Poult Sci，2010，51（1）：101 ～ 108.

[13]Pinheiro D F，Cruz V C，Sartori J R，et al.Effect of early feed restriction and enzyme supplementation on digestive enzyme activities in broilers[J].Poult Sci，2004，83（9）：1544 ～ 1550.

[14]Yang H，Wang Z，Shen Y，et al.Crystal structure of the nosiheptide-resistance methyltransferase of Streptomyces actuosus[J].Biochemistry，2010，49（30）：6440 ～ 6450.