三分群血細(xì)胞分析儀檢測后按復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行血涂片復(fù)審的臨床意義

林芳輝，劉玲麗，梁 鋒

(海南省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部，海南 ?？?570311)

臨床實(shí)驗(yàn)室工作之所以如此重要，其原因之一是由于所提供的檢驗(yàn)信息占患者全部診斷、療效等醫(yī)療信息的60%以上，而血細(xì)胞分析則是每個患者必須檢測的常規(guī)組合，和其他常規(guī)一樣至今仍然是最經(jīng)典、最直接、最有效、最經(jīng)濟(jì)的初診或鑒別診斷項(xiàng)目，有時(shí)甚至是金標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)在一般認(rèn)為，血細(xì)胞分析儀能夠準(zhǔn)確地進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和成熟白細(xì)胞(WBC)分群，并提供了一系列紅細(xì)胞(RBC)和血小板(PLT)形態(tài)學(xué)新指標(biāo)，因而自動化的RBC、WBC和PLT計(jì)數(shù)及成熟WBC分群檢測結(jié)果已被廣泛接受。但眾所周知，血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)功能僅體現(xiàn)在血細(xì)胞形態(tài)和比率大致正常的情況下，其結(jié)果可作為臨床參考，然而當(dāng)存在形態(tài)異常的細(xì)胞時(shí)，如嚴(yán)重感染、白血病及某些遺傳病的各類白細(xì)胞變化以及各類貧血的紅細(xì)胞變化，儀器非但不能報(bào)告這些具有臨床意義的細(xì)胞還會影響其他系列細(xì)胞的檢查。所以此時(shí)我們必須進(jìn)行涂片復(fù)檢。而要涂片復(fù)審必須制定嚴(yán)格的復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)，國際上非常重視[1-3]復(fù)檢工作，2005年國際血液學(xué)復(fù)檢專家組經(jīng)詳細(xì)分析后，提出了41條指導(dǎo)性自動血細(xì)胞分析和分類復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)[1]。由于三分群血細(xì)胞分析儀在中國具有一定的普遍性，且考慮到該儀器的白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板檢測通道的特性和性能，需要制定嚴(yán)格的復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)，才能使結(jié)果更加可靠。海南省人民醫(yī)院秀英門診用的是三分群血細(xì)胞分析儀，因此根據(jù)我院門診的實(shí)際情況和參考有關(guān)文獻(xiàn)制定了初步復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)和制度?，F(xiàn)將我院近半年的血常規(guī)標(biāo)本按制定的復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行復(fù)檢的情況進(jìn)行歸納分析，總結(jié)如下：

1 資料與方法

1.1 材料儀器與試劑 Sysmex公司提供的KX-21三分群血細(xì)胞分析儀及其配套試劑和校準(zhǔn)物。Olympus雙筒顯微鏡用于血涂片顯微鏡檢查。瑞氏-姬姆薩染液染色。

1.2 標(biāo)本來源 2010年1～5月本院秀英門診就診的患者血液標(biāo)本共21 528份。采用EDTA-K2抗凝管采集標(biāo)本，采血后2 h內(nèi)完成檢測。

1.3 方法 儀器每日均用全血質(zhì)控物進(jìn)行嚴(yán)格的室內(nèi)質(zhì)量控制。工作人員根據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]制定的血涂片檢測操作程序制片和閱片。參照文獻(xiàn)[1，5-7]并結(jié)合本院門診實(shí)際工作制定復(fù)審標(biāo)，見表1。

1.4 鏡檢陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)[4](1)RBC明顯大小不等，中空淡染(指1/2淡染區(qū)的紅細(xì)胞)多于30%；且只要發(fā)現(xiàn)瘧原蟲均認(rèn)為是紅細(xì)胞有陽性形態(tài)學(xué)改變；(2)巨大PLT＞15%；(3)見到PLT聚集；(4)存在Dohle小體的細(xì)胞＞10%；(5)中毒顆粒中性粒細(xì)胞＞10%；(6)空泡變性粒細(xì)胞＞10%；(7)原始細(xì)胞≥1%；(8)早幼/中幼粒細(xì)胞≥1%；(8)晚幼粒細(xì)胞＞2%；(9)桿狀核粒細(xì)胞＞5%；(10)異常淋巴細(xì)胞＞5%；(11)嗜酸粒細(xì)胞＞5%；(12)嗜堿粒細(xì)胞＞1%；(13)有核紅細(xì)胞(NRBC)＞1%；(14)槳細(xì)胞＞1%；(15)單核細(xì)胞＞10%。

表1 根據(jù)實(shí)際工作情況制定的三分群儀器的篩選規(guī)則

2 結(jié) 果

21 528份標(biāo)本的儀器檢測結(jié)果中有6 579份符合復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)，占30.6%，其中符合陽性標(biāo)準(zhǔn)的有1 905份，陽性率為29.0%，復(fù)審陽性原因見表2。對1 905份陽性患者臨床病歷進(jìn)行追蹤查詢，統(tǒng)計(jì)到被診斷為血液糸統(tǒng)疾病的有129例，疾病類型分析見表3。

表2 1 905例復(fù)審陽性原因

表3 129例血液系統(tǒng)疾病類型

3 討 論

KX-21是一種三分類血細(xì)胞分析，與其他同類儀器一樣，其細(xì)胞計(jì)數(shù)原理是電阻抗法，根據(jù)各種細(xì)胞產(chǎn)生脈沖大小、多少分別進(jìn)行計(jì)數(shù)及分類。由于儀器本身固有的局限性，雖然觀察直方圖和警示可以大致了解各類細(xì)胞的分布情況或可能存在某種異常細(xì)胞，但無法確定該類細(xì)胞的具體結(jié)構(gòu)和形態(tài)以及存在的具體數(shù)量，而這些信息對臨床診治患者又有很大的幫助，有的甚至是確診某種疾病的唯一依據(jù)(如瘧原蟲)。因此按復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行血涂片檢查，方能對異常細(xì)胞進(jìn)行定性和定量。血涂片顯微鏡復(fù)檢不僅能補(bǔ)充儀器形態(tài)鑒別能力的不足，而且足以直觀地評估和驗(yàn)證血細(xì)胞分析儀所報(bào)告結(jié)果的可行性。

表2可提供臨床醫(yī)生許多非常有價(jià)值的信息，桿狀核比例可判斷感染輕重；幼稚細(xì)胞可考慮血液疾??；嗜酸粒細(xì)胞過敏、寄生蟲、哮喘或惡性疾病等；異型淋巴細(xì)胞說明可能有病毒感染，超10%可能為EB病毒感染(傳單)；同樣RBC形態(tài)對貧血鑒別診斷有重要意義。因我們是地方綜合性大醫(yī)院，重癥患者相對集中，所以形態(tài)學(xué)可進(jìn)一步防止漏檢或錯檢。

因三分群血細(xì)胞分析儀的局限性，一些重要參數(shù)常出現(xiàn)儀器法假性增高或降低，例如有核RBC導(dǎo)致的WBC假性增高，小RBC導(dǎo)致的PLT假性增高[8]，PLT聚集導(dǎo)致的假性降低，通過血涂片我們可進(jìn)行正確評估并進(jìn)行手工糾正。對復(fù)檢陽性標(biāo)本1 905例門診患者進(jìn)行病歷追蹤查詢臨床病歷，統(tǒng)計(jì)到被診斷為血液糸統(tǒng)疾病的有129例，其疾病類型分析見表3，這些門診患者不少還是門診初診才發(fā)現(xiàn)的疾病。可見重視血涂片鏡檢能為臨床血液病的早期發(fā)現(xiàn)和治療提供非常有價(jià)值的依據(jù)。

由此可見，血細(xì)胞分析儀檢測后有一套復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行血涂片復(fù)審是我們檢驗(yàn)質(zhì)量的保證。但必須注意的是，即便我們制定了嚴(yán)格的復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)，仍有可能存在個別病例漏檢的可能，并且我們這套標(biāo)準(zhǔn)還沒經(jīng)過系統(tǒng)的驗(yàn)證，還未知假陰性率是否低于5%，因此為了能夠進(jìn)一步保證血細(xì)胞分析檢測報(bào)告的準(zhǔn)確性，提高血液分析檢驗(yàn)工作質(zhì)量，我們?nèi)杂性S多工作需要做。

[1]從玉隆,彭 明.全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組工作會議記要暨血細(xì)胞自動計(jì)數(shù)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)釋義[J]中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(4)：380-382.

[2]叢玉隆,王昌富,樂家新.血細(xì)胞自動化分析后血涂片復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)制定的原則與步驟[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(7)：729-732.

[3]盧興國,叢玉隆.應(yīng)重視和提升傳統(tǒng)血液形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)水平[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,29(6)：481-482.

[4]葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社,1997：10.

[5]孫 芾,王厚芳,于俊峰,等.血細(xì)胞顯微鏡復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的制定及臨床應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(2)：155-157.

[6]XE-2100血細(xì)胞分析復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)制定協(xié)作組.SysmexXE-2100自動血細(xì)胞分析和白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)則探討[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(7)：752-757.

[7]崔 巍譯.全自動血液分析儀的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(4)：371-373.

[8]鐘素萍、馬粵建.Sysmex KX-21型血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的影響因素的探討[J].海南醫(yī)學(xué),2007,18(8)：132-133.