潘 婉,高 飛,陳曉丹
(海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科,海南 海口 570102)
隨著各種類型的全自動血液分析儀在臨床檢驗中的廣泛應(yīng)用,血液常規(guī)檢驗的工作效率和質(zhì)量都有了較大的提高。近年本院引進的ADVIA 2120全自動血液分析儀(以下簡稱ADVIA2120)是繼BayerH*3和ADVIA120之后的目前較高檔次的聯(lián)合檢測型血液分析儀,其檢測速度快,提供參數(shù)多,重復(fù)性好,準(zhǔn)確性高[1]。為了了解其對異型淋巴細胞報警提示的可信性,我們對有異型淋巴細胞報警提示的標(biāo)本139例及無異型淋巴細胞報警提示的標(biāo)本195例同時進行手工顯微鏡檢,對檢查結(jié)果做分析與比較,現(xiàn)報道如下:
1.1 儀器和試劑 德國拜耳公司生產(chǎn)的ADVIA 2120全自動血液分析儀,日本歐林巴斯光學(xué)株式會社生產(chǎn)的顯微鏡CX-21,所用試劑均為原裝配套,質(zhì)控物由美國伯樂公司提供,儀器用專門的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)。瑞氏-姬姆薩染液按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程自行配置。
1.2 標(biāo)本來源 收集2010年2月至2010年4月海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院各科臨床住院病人EDTA-K2抗凝靜脈血,有異型淋巴細胞報警提示的139例及無異型淋巴細胞報警提示的195例。
1.3 方法 ADVIA2120各項參數(shù)均經(jīng)校準(zhǔn),每天用質(zhì)控物進行室內(nèi)質(zhì)控?;颊哽o脈采血1.0~2.0 ml,立即輕輕加到含有EDTA-K2的抗凝管中,迅速混勻,標(biāo)本采集后4 h內(nèi)按ADVIA 2120的儀器操作規(guī)程進行測試。然后將ADVIA 2120異型淋巴細胞檢測結(jié)果與顯微鏡檢測結(jié)果比較。對有異型淋巴細胞報警提示的標(biāo)本,同時用顯微鏡目測法檢測。另設(shè)置對照組,即無異型淋巴細胞報警提示的標(biāo)本,也推片染色進行顯微鏡目測。手工顯微鏡檢測按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]進行,對儀器法提示有異型淋巴細胞報警的標(biāo)本做血涂片瑞特-姬姆薩染色,用顯微鏡目測法復(fù)檢。儀器提示有異型淋巴細胞且鏡檢證實者為“真陽性”,儀器提示有異型淋巴細胞而鏡檢未檢出者為“假陽性”,儀器無異型淋巴細胞提示而鏡檢檢出者為“假陰性”,儀器無異型淋巴細胞提示而鏡檢未檢出者為“真陰性”。其中敏感性=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%;特異性=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%;陽性預(yù)測值=真陽性/(真陽性+假陽性)×100%;陰性預(yù)測值=真陰性/(真陰性+假陰性)×100%。
1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
334例標(biāo)本儀器檢測與顯微鏡目測結(jié)果比較見表1。本組病例ADVIA2120異型淋巴細胞報警提示的敏感性為86.1%,特異性為81.7%,陽性預(yù)測值為71.2%,陰性預(yù)測值為91.8%。兩法比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=10.28,P < 0.05)。
表1 ADVIA2120檢測和顯微鏡目測結(jié)果比較(例)
ADVIA 2120全自動血液分析儀是德國Bayer公司最新推出的全自動多參數(shù)血液分析儀,測試速度快,每小時可檢測120個標(biāo)本,它采用先進的鞘流技術(shù)、激光散射技術(shù)和細胞化學(xué)染色技術(shù)對全血細胞進行分析。該儀器可用于血液樣本和生物體液的檢測,兩者具有同等的臨床應(yīng)用性能[3]。在白細胞分類計數(shù)方面,該儀器通過過氧化物酶和嗜堿/核分葉兩個通道進行白細胞分類計數(shù),并具有報警提示異常白細胞的功能。
儀器的設(shè)計原理保證了儀器檢測結(jié)果的敏感性和穩(wěn)定性[4],用血液分析儀進行全血細胞分析,總希望有較高的檢測靈敏度以避免漏檢,但這勢必會帶入假陽性。本實驗對ADVIA 2120有異型淋巴細胞報警提示的139例標(biāo)本進行分析,結(jié)果顯示異型淋巴細胞報警提示的敏感性為86.1%,特異性為82.0%,陽性預(yù)測值為71.2%,陰性預(yù)測值為91.8%,與人工顯微鏡檢有顯著性差異。99例為真陽性,其中17例為腫瘤放化療后患者,4例為新生兒患者,3例為白血病患者,3例為肺炎患者,1例為傳染性單核細胞增多癥患者,1例為感染患者,1例為消化道疾病患者,1例為帶狀皰疹患者。將195例未出現(xiàn)異型淋巴細胞報警提示的標(biāo)本也進行顯微鏡檢,16例為假陰性,其中9例為腫瘤放化療后患者,4例為感染患者,1例為消化道疾病患者,1例為腎病患者,1例為新生兒患者。
通常認為異型淋巴細胞是EBV病毒感染所引起的單核—巨噬系統(tǒng)的異常增生,EBV與B淋巴細胞受體結(jié)合,在不斷增殖與復(fù)制過程中,被T淋巴細胞識別,激發(fā)抑制性T細胞(Ts/c)增殖并自身發(fā)生轉(zhuǎn)化,形成細胞毒性效應(yīng),這種受刺激后異常增殖的T細胞和少量B細胞出現(xiàn)在外周血中便形成異型淋巴細胞。根據(jù)形態(tài)特征將其分為三型:Ⅰ型(空泡型),胞體比正常淋巴細胞稍大,多為圓形或橢圓形,核常偏位,染色質(zhì)粗糙呈網(wǎng)狀或小塊狀,排列不規(guī)則,胞漿量豐富,深藍或灰藍色,有空泡;Ⅱ型(不規(guī)則型),胞體較大,外形常不規(guī)則,可有多數(shù)偽足,核圓或橢圓,著色較淺,胞漿量豐富,淺藍色或灰藍色,有透明感,邊緣著色深藍,一般無空泡,可有少數(shù)嗜天青顆粒;Ⅲ型(幼稚型),胞體較大,外形常不規(guī)則,核圓或橢圓,染色質(zhì)呈網(wǎng)狀排列,可見1~2個核仁,胞漿深藍色,可有少數(shù)空泡。普遍認為EB病毒感染者血液中會出現(xiàn)大量的異型淋巴細胞,是傳染性單核細胞增多癥的特殊實驗室檢查特點。臨床發(fā)現(xiàn)異型淋巴細胞可在其他病原性病毒感染中出現(xiàn),異型淋巴細胞的增多與多種病毒的感染及變態(tài)反應(yīng)有關(guān)[5],并且異型淋巴細胞的百分率也會高于10%以上。
ADVIA 2120對全血細胞進行分析,不是由細胞核、細胞漿、細胞膜結(jié)構(gòu)的整體差異來鑒別細胞,因此不可避免存在干擾因素,而產(chǎn)生一定的誤差。單核細胞和大淋巴細胞在體積、顆粒及染色質(zhì)形態(tài)上均與異型淋巴細胞有一定的相似性,以及未溶解完全而腫脹的紅細胞的干擾使儀器對異型淋巴細胞報警提示的假陽性率高。另外由于細胞的病理或藥物作用,使細胞的大小、形態(tài)及內(nèi)容物發(fā)生改變,其產(chǎn)生的散射光信號發(fā)生不規(guī)則的變化使儀器無法正確識別而報警。人工分類則可以通過顯微鏡根據(jù)細胞核、細胞漿、顆粒、核染色質(zhì)等特征對異型淋巴細胞進行分析,鏡檢的準(zhǔn)確性與檢驗者的經(jīng)驗、對細胞的認知程度、血涂片的制作質(zhì)量、計數(shù)部位、分類細胞數(shù)多少等有關(guān)。因為存在人為判斷的可能性和儀器原理的缺陷性,我們對有異常提示的標(biāo)本,仍應(yīng)按照操作規(guī)程認真進行顯微鏡目測復(fù)核以免漏診及誤診,確保血液分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和權(quán)威性,滿足臨床的需要,這也是循證醫(yī)學(xué)檢驗的要求,使檢驗的每一項參數(shù)體現(xiàn)臨床價值。
綜上所述,ADVIA2120全自動血液分析儀異型淋巴細胞報警提示具有一定的可信性,陽性預(yù)測值高,但其假陽性率也較高(28.8%),是一種對大批量全血標(biāo)本進行血細胞計數(shù)與分類快速而有效篩檢的血液分析儀。因此對異型淋巴細胞報警提示可作為一個有效的過篩工具,還不能完全替代顯微鏡檢測,只有將兩者相互結(jié)合,才能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性、報告的可靠性,進而將血液學(xué)檢驗技術(shù)提高到一個新的水平。
[1]吳新忠,龐 鑫,羅福東,等.Bayer ADVIA 2120全自動血細胞分析儀的性能評價[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)儀器與應(yīng)用,2007,19(6):62-64.
[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:123-124.
[3]Harris N,Jou J M,Devoto G,et al.Performance evaluationof the ADVIA 2120 hematology analyzer:an international multicenter clinical trial[J].LabHematol,2005,11(1):62-70.
[4]叢玉隆,樂家新.現(xiàn)代血細胞分析技術(shù)與臨床[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2005:181-200.
[5]陳偉雄.外周血異型淋巴細胞增高細胞免疫變化的探討[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,6(4):90-91.