Cx43和Fas在胃癌組織中的表達(dá)

羅海清，官成濃，余忠華，王鎮(zhèn)南，梁亞海

(廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，廣東湛江524001)

胃癌的形成和轉(zhuǎn)移是多因子、多基因共同作用的結(jié)果。有研究顯示，多種人類癌細(xì)胞都有細(xì)胞間隙連接蛋白 43(Cx43)表達(dá)的下降［1，2］。Fas 是重要的細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子，能在一定程度上反映腫瘤的生物學(xué)行為［3］。我們采用免疫組化方法檢測(cè)Cx43和Fas在胃癌中的表達(dá)情況，探討兩者與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系。

1 材料與方法

1．1 材料 收集我院2006年1月～2010年12月病理科歸檔的病歷資料完整的70例胃癌組織標(biāo)本，按全國(guó)胃癌協(xié)作組病理規(guī)范進(jìn)行病理診斷和分級(jí)。在研究中，將腫瘤分成兩個(gè)組織學(xué)亞型:分化型癌包括乳頭狀腺癌和管狀腺癌，未分化癌包括低分化腺癌、黏液細(xì)胞癌和印戒細(xì)胞癌。所有患者術(shù)前未行化療或放療，同時(shí)另取距離癌組織邊緣5 cm非腫瘤的正常組織石蠟標(biāo)本為對(duì)照。

1．2 主要試劑和方法 兔抗人Cx43多克隆抗體和鼠抗人Fas單克隆抗體購(gòu)自北京中杉金橋生物有限公司，稀釋濃度為1∶50。即用型免疫組化試劑盒購(gòu)自天津?yàn)笊镏破酚邢薰?。采用免疫組化SP法，DAB顯色，具體操作按說(shuō)明書進(jìn)行。用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，采用生物公司提供的陽(yáng)性切片為陽(yáng)性對(duì)照。

1．3 陽(yáng)性結(jié)果判定 Cx43和Fas分別以胞核和胞質(zhì)中出現(xiàn)棕色或棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞。按半定量積分法判斷兩者表達(dá)情況，根據(jù)染色強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞所占比例分別記為0～3分。染色強(qiáng)度:未著色為0分，著色淺為1分，中度著色為2分，著色深為3分。陽(yáng)性細(xì)胞百分率:高倍鏡(×400)下隨機(jī)選取10個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。計(jì)算其平均陽(yáng)性百分率。根據(jù)平均陽(yáng)性細(xì)胞百分率分為:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤5%為0分，6% ～25%為1分，26% ～49%為2分，≥50%為3分。兩項(xiàng)評(píng)分相加，0～1分為(-)，2分為(+)，3～4分為(++)，5～6分為(+++)，(+)～(+++)均表示為陽(yáng)性。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)軟件，各組間差異比較用χ2檢驗(yàn)，以P≤0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 Cx43和Fas的表達(dá)情況 Cx43在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為44．29%(31/70)，在癌旁正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為 92．86%(65/70)，χ2=38．314 4，P＜0．01;Fas在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為40．00%(28/70)，在癌旁正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為 87．14%(61/70)，χ2=33．588 9，P ＜0．01。

2．2 Cx43、Fas在胃癌組織中的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系 見(jiàn)表1。

3 討論

細(xì)胞間隙連接通訊在細(xì)胞的新陳代謝、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、增殖和分化等生理過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。間隙連接主要通過(guò)縫隙連接蛋白發(fā)揮作用。Cx43表達(dá)減少或缺失與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［4］。Miekus等［5］報(bào)道，前列腺上皮表達(dá)Cx43蛋白，而進(jìn)展期分化差的癌細(xì)胞Cx43表達(dá)明顯降低。Pu等［6］研究發(fā)現(xiàn)Cx43表達(dá)水平與星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤的惡性程度和腫瘤增殖活性呈負(fù)相關(guān)，認(rèn)為Cx43在膠質(zhì)細(xì)胞瘤的惡性發(fā)展中起關(guān)鍵作用。本研究表明Cx43在胃癌腫瘤組織中的表達(dá)率低于正常組織，且與胃癌組織學(xué)分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

表1 Cx43、Fas蛋白表達(dá)水平與胃癌臨床病理因素的關(guān)系［例(%)］

凋亡異常與腫瘤的發(fā)生及神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變有重要關(guān)系。Fas是近年發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞凋亡信號(hào)受體，當(dāng)與其特異性配體結(jié)合后，可以傳導(dǎo)凋亡信號(hào)，誘導(dǎo)所在細(xì)胞的凋亡［7］。Das等［8］觀察 Fas在 29例宮頸癌和3種宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Fas表達(dá)明顯下調(diào)。Munakata等在對(duì)卵巢癌組織Fas表達(dá)的研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)as在卵巢癌組織中低表達(dá)，而在正常卵巢組織中高表達(dá)。本研究表明Fas在胃癌腫瘤組織中的表達(dá)率低于正常組織，且表達(dá)強(qiáng)度與胃癌的組織學(xué)分化程度、浸潤(rùn)深度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

上述結(jié)果表明，Cx43和Fas表達(dá)與胃癌的發(fā)生發(fā)展有一定的相關(guān)性，胃癌組織中Cx43和Fas表達(dá)水平的檢測(cè)有助于判斷胃癌惡性程度。

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