小兒腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF的表達變化及意義

宮相翠

(青島市婦女兒童醫(yī)療保健中心，山東青島266011)

腎母細胞瘤是嬰幼兒時期最常見的惡性實體腫瘤之一，由腎源性上皮和間質組成。survivin蛋白是凋亡抑制蛋白因子家族的成員［1］。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是目前已知的促血管生成因子中作用最強，特異性最高的促有絲分裂原［2］。2008年1月～2010年12月，我們采用免疫組化法檢測腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF，探討其與腎母細胞瘤臨床病理指標的關系，為病情及預后評估提供依據(jù)。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 36例腎母細胞瘤組織均為在我院手術切除并經(jīng)病理證實的病理存檔標本。36例患兒中男17例，女19例;年齡5個月～8歲。根據(jù)美國腎母細胞瘤研究組標準［3］，預后良好組織型24例，預后不良組織型12例;按美國 Wilms'瘤研究組(NWTS)臨床分期［4］，Ⅰ期8例、Ⅱ期12例、Ⅲ期11例、Ⅳ期5例;有淋巴結轉移21例，無淋巴結轉移15例。另取20例瘤旁正常腎組織標本作為對照。所有患兒術前均未行放化療及免疫治療。所有標本均采用10%甲醛液固定，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片。

1．2 survivin蛋白及VEGF檢測方法 ①主要試劑:兔抗人survivin多克隆抗體、兔抗人VEGF免疫組化試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)。②染色方法:采用免疫組化SP法，按試劑盒說明書操作。③結果判定:根據(jù)文獻［1，2］，均觀察 5 ～10 個高倍視野(×200)，以細胞質或細胞膜呈棕黃或棕褐色者為survivin蛋白、VEGF陽性細胞，其中陽性細胞數(shù)＜10%為VEGF陰性表達，≥10%為VEGF陽性表達。survivin蛋白表達根據(jù)著色深淺及陽性細胞數(shù)判定:無陽性染色為(－)，細胞著色較淺、陽性細胞數(shù)＜25%為+，著色較深、陽性細胞數(shù)25% ～50%為++，著色深、陽性細胞數(shù)＞50%為+++;將－、+視為陰性表達，++、+++視為陽性表達。

1．3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS12．0統(tǒng)計軟件，數(shù)據(jù)比較用 χ2檢驗，α =0．05。

2 結果

腎母細胞瘤組織中survivin蛋白及VEGF陽性表達率分別是66．6%和80．5%，均明顯高于瘤旁正常腎組織的0和5%(P均＜0．05)。survivin蛋白及VEGF表達與腎母細胞瘤臨床分期、預后組織型、淋巴結轉移有關(P均＜0．05)。詳見表1。

表1 survivin蛋白、VEGF表達與腎母細胞瘤臨床病理參數(shù)的關系

3 討論

腎母細胞瘤是上皮細胞和間質組織組成的惡性混合瘤，它起源于未分化的后腎胚胎，是一種生長迅速的實體惡性腫瘤。研究發(fā)現(xiàn)［2，5］有很多因子均具有促進腫瘤新生的作用，其中VEGF是迄今為止發(fā)現(xiàn)的作用最強的促血管形成因子，且腫瘤細胞可通過自身分泌產(chǎn)生，直接作用于血管內(nèi)皮細胞并刺激內(nèi)皮細胞有絲分裂，促進新生血管的形成和生長;VEGF還能增強血管內(nèi)皮細胞的通透性，導致纖維蛋白原的沉積和纖維凝膠的聚集，促進新生血管生長。survivin蛋白是目前發(fā)現(xiàn)的惟一具有抗凋亡及促血管生成作用的細胞因子，可對抗G2～M期細胞凋亡的誘導，抑制 Fas介導的細胞凋亡［6］。因此，survivin可能是新生血管形成過程中生長因子誘導的保護性基因，正常情況下維持血管內(nèi)皮細胞的增殖，但在病理情況下如惡性腫瘤中survivin呈過表達，且與腫瘤侵襲性及預后有關［7］。

本研究結果顯示，腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF表達明顯高于癌旁正常腎組織(P＜0．05)，且Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移的腎母細胞瘤患兒，其瘤組織中survivin蛋白、VEGF表達明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移者(P均 ＜0．05)。說明survivin蛋白、VEGF表達上調在腎母細胞瘤發(fā)生發(fā)展過程中起著非常重要的作用。預后不良型腎母細胞瘤分化差、生長快，具有轉移早、易復發(fā)等特點。本研究發(fā)現(xiàn)，預后不良組織型的腎母細胞瘤組織中survivin蛋白、VEGF表達明顯高于預后良好組織型者(P＜0．05)，說明survivin蛋白、VEGF表達上調可以作為腎母細胞瘤分化差的標志，可以評估病情并預測預后。

［1］姜忠，孫永峰，黃緒峰，等．survivin蛋白在腎母細胞瘤的表達及意義［J］．山東醫(yī)藥，2006，46(10):16-17．

［2］崔清波，楊旗，孟祥喜．兒童腎母細胞瘤中VEGF表達水平的研究［J］．實用腫瘤學雜志，2005，19(2):113-114．

［3］余亞雄．小兒外科學［M］．北京:人民衛(wèi)生出版社，1997:41-44．

［4］高解春，王耀平．現(xiàn)代小兒腫瘤學［M］．上海:復旦大學出版社，2003:524-529．

［5］張謙，單巖，陳清江．血管內(nèi)皮生長因子在預測腎母細胞瘤轉移中的作用［J］．中華兒科雜志，2005，43(3):213-214．

［6］ Miller MA，Karacay B，Breslow NE，et al．Prognostic value of quantifying apoptosisfactor expression infavorable histology Wilmstumors［J］．J Pediatr Hematol Oncol，2005，27(1):11-14．

［7］姜忠，楊傳民，江布先．凋亡相關蛋白survivin、Fas在腎母細胞瘤中的表達及其臨床意義［J］．實用兒科臨床雜志，2006，21(11):668-669．