補(bǔ)氣藥延緩衰老抗氧化機(jī)制的文獻(xiàn)再評(píng)價(jià)

張恩戶(hù) 張琪 胡銳

中醫(yī)認(rèn)為，元?dú)?、宗氣、腎氣等是維持機(jī)體生命活動(dòng)的主要物質(zhì)，氣虛可導(dǎo)致機(jī)體的臟腑功能減退。補(bǔ)氣藥具有補(bǔ)五臟，安精神，長(zhǎng)肌肉，耐寒暑，久服輕身延年之功效?，F(xiàn)代研究表明，抗氧化劑能清除自由基而延緩衰老。為此，筆者以補(bǔ)氣藥為對(duì)象，通過(guò)文獻(xiàn)查閱、歸納、整理，參考衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范(2003年版)》，擬定了中藥抗氧化作用的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)其延緩衰老之抗氧化機(jī)制進(jìn)行文獻(xiàn)再評(píng)價(jià)，以明確其作用的可靠性。

1 延緩衰老之抗氧化機(jī)制及其評(píng)價(jià)方法

衰老即生命周期中隨時(shí)間進(jìn)展而表現(xiàn)出功能不斷惡化，直到死亡的過(guò)程。目前有很多關(guān)于衰老機(jī)制的學(xué)說(shuō)[1]。其中，受到人們普遍關(guān)注的自由基學(xué)說(shuō)認(rèn)為，引起人類(lèi)衰老的主要原因是：細(xì)胞在代謝過(guò)程中不斷產(chǎn)生自由基(free radical，F(xiàn)R)。自由基是單獨(dú)存在的、具有不配對(duì)電子的離子、原子、分子基團(tuán)[2]。該物質(zhì)具有兩面性，適量自由基能介導(dǎo)正常細(xì)胞分化增殖，但當(dāng)氧和體內(nèi)某些物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，生成過(guò)多的氧自由基，則會(huì)引起生物膜的脂類(lèi)過(guò)氧化，導(dǎo)致膜結(jié)構(gòu)損傷和功能失活，出現(xiàn)衰老癥狀。自由基反應(yīng)誘發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化，生成過(guò)氧化脂質(zhì)(LPO)，繼而分解產(chǎn)生丙二醛(MDA)與脂褐素(LF)，存在于腦、心、肝、表皮組織中[3]。體內(nèi)自由基生成量與年齡呈正相關(guān)，即脂質(zhì)過(guò)氧化隨年齡增加而增高，而清除自由基系統(tǒng)的功能則逐漸減弱。

為避免自由基產(chǎn)生過(guò)多，人體內(nèi)存在著清除酶系，如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、過(guò)氧化氫酶(CAT)等。SOD廣泛存在于血液和組織中，能促使超氧陰離子自由基(O2·)變?yōu)檫^(guò)氧化氫(H2O2)和氧分子，進(jìn)而被清除，使機(jī)體和細(xì)胞免受損害。GSH-Px主要分布在肝臟、胃腸、睪丸等組織，以肝中含量最高，是一種含硒的清除自由基并抑制自由基反應(yīng)的酶系，可清除O2·，H2O2和羥自由基(·OH)。自由基清除酶隨著機(jī)體衰老而減少，是衰老和生命活力降低的定量指標(biāo)。

因此，以藥物清除自由基、抗氧化是延緩衰老的重要途徑之一，評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)方法是觀察藥物對(duì)老齡鼠、快速老化小鼠或D-半乳糖、臭氧(O3)、去胸腺等衰老動(dòng)物模型的組織或血中的抗氧化酶如SOD、GSH-Px、CAT等和過(guò)氧化代謝產(chǎn)物如LPO、MDA、LF等的影響，評(píng)價(jià)其延緩衰老之抗氧化機(jī)制。

2 再評(píng)價(jià)方法

2.1 文獻(xiàn)收集與整理

以新世紀(jì)全國(guó)高等中醫(yī)院校規(guī)劃教材《中藥學(xué)》[4]記載的補(bǔ)氣藥(人參、黃芪、絞股藍(lán)、紅景天、沙棘、刺五加、白術(shù)、甘草、山藥、太子參、大棗、黨參)為對(duì)象，查閱1979～2009年間有關(guān)實(shí)驗(yàn)性研究文獻(xiàn)，以中國(guó)學(xué)術(shù)期刊網(wǎng)絡(luò)出版總庫(kù)(www.cnki.net)數(shù)據(jù)庫(kù)為主，其他數(shù)據(jù)庫(kù)為輔進(jìn)行檢索、查閱。研讀文獻(xiàn)，摘錄相關(guān)信息并歸納入《文獻(xiàn)再評(píng)價(jià)信息表》，信息表內(nèi)容包括供試藥制備、給藥途徑與劑量、動(dòng)物品系、實(shí)驗(yàn)方法、陽(yáng)性藥結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論、作者及工作單位，刊物與發(fā)表年代等信息。

2.2 中藥抗氧化機(jī)制的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

參考《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的抗氧化功能檢驗(yàn)方法，以及中藥藥理作用研究應(yīng)符合綜合評(píng)價(jià)和重復(fù)性等原則，制訂中藥抗氧化機(jī)制的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)為：應(yīng)選用老齡鼠、D-半乳糖模型、輻照模型等，測(cè)定血、腦、肝、心等組織(不少于2種)的上述抗自由基相關(guān)酶和老化代謝產(chǎn)物如SOD、GSH-Px、MDA、LF等指標(biāo)中的3項(xiàng)以上(包括3項(xiàng))；每種衰老模型及觀察指標(biāo)應(yīng)由不同實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行2次以上(包括2次)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果均有效。凡符合上述標(biāo)準(zhǔn)者，即可判定為具有抗氧化作用。

3 結(jié)果

驗(yàn)證補(bǔ)氣藥抗氧化作用，使用老齡鼠、D-半乳糖模型以及輻照、氫化可的松、氟哌啶醇、去卵巢等模型。相關(guān)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1。文獻(xiàn)以測(cè)定學(xué)和組織中SOD、GSH-Px等自由基相關(guān)酶及MDA、LF、LPO等過(guò)氧化代謝產(chǎn)物等手段來(lái)驗(yàn)證補(bǔ)氣藥的抗氧化作用。相關(guān)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2～6。

表1 驗(yàn)證抗氧化作用使用了不同動(dòng)物模型的文獻(xiàn)篇數(shù)

表2 測(cè)定血和組織中SOD來(lái)驗(yàn)證抗氧化作用的文獻(xiàn)篇數(shù)

表3 測(cè)定血和組織中GSH-Px來(lái)驗(yàn)證抗氧化作用的文獻(xiàn)篇數(shù)

表4 測(cè)定血和組織中MDA來(lái)驗(yàn)證抗氧化作用的文獻(xiàn)篇數(shù)

表5 測(cè)定血和組織中LF來(lái)驗(yàn)證抗氧化作用的文獻(xiàn)篇數(shù)

表6 測(cè)定血和組織中LPO來(lái)驗(yàn)證抗氧化作用的文獻(xiàn)篇數(shù)

4 小結(jié)

結(jié)果表明，人參、黃芪、絞股藍(lán)、紅景天抗氧化作用的研究文獻(xiàn)均超過(guò)10篇[5-12]，各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定次數(shù)較多，且結(jié)果有效，說(shuō)明上述4味中藥研究較為充分，抗氧化作用較為肯定；沙棘、刺五加文獻(xiàn)數(shù)雖少，但也符合本文所定之標(biāo)準(zhǔn)，故認(rèn)為其具有抗氧化作用[13,14]；白術(shù)、甘草、山藥、太子參、大棗、黨參文獻(xiàn)資料較少，動(dòng)物模型或?qū)嶒?yàn)指標(biāo)不符合再評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[15-20]，尚需進(jìn)一步研究，以證實(shí)其有無(wú)抗氧化作用。機(jī)體氧化是多因素綜合作用的結(jié)果，機(jī)體中的血可以代表全身狀態(tài)，腦為最早衰老的器官，肝則是最晚衰老的器官，在上述的實(shí)驗(yàn)研究中，對(duì)血的相關(guān)測(cè)定約占32%，主要組織中，腦組織的測(cè)定約占27%，肝組織的測(cè)定約占20%。

總體來(lái)看，各實(shí)驗(yàn)研究對(duì)自由基相關(guān)酶和老化代謝產(chǎn)物測(cè)定部位的選擇是可行的，并且兼顧其它，有力地說(shuō)明了藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作用的整體效果。文獻(xiàn)中所測(cè)定的各項(xiàng)指標(biāo)也符合評(píng)價(jià)要求。不足在于有些文獻(xiàn)選取指標(biāo)過(guò)少，只憑借一、兩種檢測(cè)指標(biāo)而得出結(jié)論，不夠全面，缺乏重復(fù)性和氧化機(jī)制的深入研究；有些文獻(xiàn)之間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在不同之處，可能與動(dòng)物模型標(biāo)準(zhǔn)不盡相同，藥物劑量相差過(guò)多，無(wú)統(tǒng)一規(guī)范所致。故有必要規(guī)范中藥抗氧化作用的評(píng)價(jià)方法，如實(shí)驗(yàn)方法、供試藥制備、給藥途徑、重復(fù)次數(shù)等等。因此，本文歸納、整合了各文獻(xiàn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，明確具有抗氧化作用的藥物均為：不同實(shí)驗(yàn)人員對(duì)3項(xiàng)以上(含)檢測(cè)指標(biāo)，進(jìn)行2次以上(含)的重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果可靠。

從已有81篇文獻(xiàn)來(lái)看，補(bǔ)氣藥抗氧化作用機(jī)理的研究還比較孤立和分散，缺乏系統(tǒng)的綜合研究。在本文研究中，制定的抗氧化評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)可行，可操作性強(qiáng)。此外，通過(guò)對(duì)既往實(shí)驗(yàn)的歸納、整理，本文發(fā)現(xiàn)了科研實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中的空白之處，對(duì)今后的實(shí)驗(yàn)選題具有指導(dǎo)意義。

隨著人類(lèi)生活水平的提高，人們對(duì)于如何延長(zhǎng)生命更加關(guān)注。自1956年，Harman提出自由基學(xué)說(shuō)以來(lái)，抗氧化已成為延緩衰老的一個(gè)重要部分。作為中醫(yī)藥工作者，利用現(xiàn)有資源，研究傳統(tǒng)中藥的藥理作用，開(kāi)發(fā)廉價(jià)、有效的抗氧化新藥是研究的主要方向。中藥品種繁多，單品成分復(fù)雜，復(fù)方組成多樣，有著非常廣泛的研究領(lǐng)域和深遠(yuǎn)的發(fā)展前景。運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，結(jié)合中醫(yī)傳統(tǒng)理論，挖掘中藥新功用，在嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)下，進(jìn)行中藥抗氧化機(jī)制的研究，以期獲得國(guó)際認(rèn)可，使中藥真正走向世界。

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