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    氯化鉀脅迫對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段生長發(fā)育的影響

    2011-06-08 07:53:52王艾平吳慶燕
    湖南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2011年21期
    關(guān)鍵詞:根數(shù)試管培養(yǎng)基

    王艾平,吳慶燕

    (上饒師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,江西 上饒 334001)

    黃 獨(dú) (Dioscorea bulbifera L.) 為 薯 蕷 科(Dioscoreaceae)薯蕷屬(Dioscorea L.)植物,世界分布廣泛,在中國主要分布于浙江、江西、福建等地[1],其干燥肉質(zhì)塊莖可入藥,性味苦、平,具有散結(jié)消癭、清熱解毒,涼血降火的功效[2]。臨床上常用于治療甲狀腺腫,抗腫瘤、抗炎、抗病毒等[3]。目前關(guān)于黃獨(dú)的研究國內(nèi)外均較少,主要對(duì)黃獨(dú)的化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用、遺傳多樣性和栽培管理等方面進(jìn)行了研究[4-7],但利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行黃獨(dú)逆境生長方面的研究在國內(nèi)未見報(bào)道。研究以黃獨(dú)試管苗帶芽莖段為材料,研究了添加KCl的MS培養(yǎng)基對(duì)其再生的影響,旨在為黃獨(dú)種苗的大田規(guī)模化種植提供技術(shù)支持和理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    供試材料為黃獨(dú)無菌苗,由上饒師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院植物組織培養(yǎng)室提供。

    1.2 方法

    將黃獨(dú)帶芽莖段(0.5~1.5 cm)接種至試管進(jìn)行單因子實(shí)驗(yàn)。選用15支試管分為5組,每組3支(標(biāo)簽依次設(shè)為 1-1,1-2,1-3,2-1,2-2,……)。每支試管均加入MS培養(yǎng)基30 mL(培養(yǎng)基中如大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素、肌醇濃度均相同)。5組的氯化鉀濃度依次設(shè)為:0、0.1、0.5、1.0、2.0 g/L。以上培養(yǎng)基pH均調(diào)為5.8~6.0,配制后均在高壓滅菌鍋中在121℃,0.1 MPa條件下滅菌20min。接種均在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行。接種后的培養(yǎng)基條件下為:關(guān)照時(shí)間 14 h/d,光照強(qiáng)度 1 000~1 600 lx,溫度25℃,濕度70%~80%。在1~47 d內(nèi)每隔7 d統(tǒng)計(jì)試管苗的葉片數(shù)、新生芽數(shù)、芽長、根數(shù)和根長等形態(tài)指標(biāo)。重復(fù)3次,數(shù)據(jù)均取平均值。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段芽增殖的影響

    由表1和圖1可知,KCl的濃度對(duì)黃獨(dú)芽數(shù)的影響有著顯著作用。KCl除濃度0.5 g/L外,其他濃度對(duì)黃獨(dú)新生芽均有抑制作用,并且隨濃度的升高,黃獨(dú)新生芽數(shù)愈少。而濃度0.5 g/L的KCl對(duì)黃獨(dú)新生芽數(shù)具有良好的促進(jìn)作用。0.1g/L的KCl會(huì)對(duì)黃獨(dú)芽的增殖造成抑制,而0.5 g/L的KCl可促進(jìn)芽的增殖。KCl的濃度超過0.5 g/L均會(huì)抑制黃獨(dú)新生芽的增殖。

    表1 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段芽數(shù)的影響 (個(gè))

    圖1 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段生長發(fā)育的影響

    從表2可知,不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)芽增長均有一定的促進(jìn)作用,但隨著KCl濃度的增加超過0.1 g/L時(shí),新生芽長增加緩慢。因此,使用KCl的濃度為0.1 g/L的培養(yǎng)基更利于黃獨(dú)芽的增長。

    表2 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段芽長的影響 (cm)

    2.2 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)葉片數(shù)的影響

    從表3可知,濃度0.1 g/L和0.5 g/L的KCl對(duì)黃獨(dú)葉片數(shù)有促進(jìn)作用。KCl濃度為1.0 g/L和2.0 g/L時(shí),有促進(jìn)作用但作用不強(qiáng)。因此,想要獲得黃獨(dú)較多的葉片數(shù)KCl的最佳濃度為0.1~0.5 g/L。

    表3 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段葉片數(shù)的影響 (片)

    2.3 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)根增殖的影響

    從表4可知,除KCl濃度為0.5 g/L外,其他濃度KCl對(duì)黃獨(dú)根數(shù)的增加均有抑制作用。在KCl濃度為1.0 g/L時(shí)的抑制作用最強(qiáng),在39 d后才開始生根,而KCl濃度為0.5 g/L時(shí)對(duì)根數(shù)的增加非常有利。因此,在考慮存活率根數(shù)應(yīng)盡量多時(shí),KCl濃度應(yīng)控制在0.5 g/L為佳。

    表4 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段根數(shù)的影響 (個(gè))

    從表5可知,除KCl濃度為1.0 g/L外,其他濃度對(duì)黃獨(dú)根的增長均有促進(jìn)作用。隨著KCl濃度的升高,黃獨(dú)根長變短。KCl濃度1.0 g/L時(shí)對(duì)根生長很不利,在47 d之后才有促進(jìn)作用。因此,添加KCl均可促進(jìn)根長的增加,但增加效應(yīng)隨濃度而異,其中0.1 g/L KCl對(duì)根長增加有顯著作用。

    表5 不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)帶芽莖段根長的影響 (cm)

    3 討論

    鉀元素是植物生長必需的三大元素之一,它在植物體內(nèi)的含量較高,一般占干物質(zhì)重的1%~5%,是高等植物體內(nèi)分布最多的一種營養(yǎng)元素[8]。KCl是世界上產(chǎn)最高施用最多的的一種鉀肥。研究了不同濃度KCl對(duì)黃獨(dú)芽增殖、根增殖和葉片數(shù)的影響,結(jié)果表明,對(duì)葉片數(shù)增加最佳KCl的濃度為0.1~0.5 g/L,芽數(shù)和根數(shù)增加最佳KCl的濃度為0.5 g/L,對(duì)芽長和根長最佳KCl的濃度為0.1 g/L。這與前人在其他植物上的研究結(jié)果基本一致[9-12],KCl的濃度過低將會(huì)對(duì)黃獨(dú)生長發(fā)育造成脅迫,而KCl的濃度過高也會(huì)抑制黃獨(dú)的生長發(fā)育。

    [1] 王筱璐,杭悅宇,周義峰,等.與黃獨(dú)(Dioscorea bulbifera)性別相關(guān)的RAPD-SCAR標(biāo)記研究 [J].植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào),2007,16(2):1-5.

    [2] 林厚文,張 罡,趙宏斌,等.黃藥子的研究進(jìn)展 [J].中草藥,2002,33(2):1752-1771.

    [3] 陳 勇,夏啟松,程 明,等.應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片研究黃藥子對(duì)小鼠肝臟的毒性機(jī)制(簡報(bào)) [J].分子細(xì)胞生物學(xué)報(bào),2006,39(6):5682-5721.

    [4] 尹明華,洪森榮.黃獨(dú)的莖尖培養(yǎng)和病毒檢測 [J].中草藥,2009,40(9):1462-1466.

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