產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析

鄧江錦

（廣東省揭西縣人民醫(yī)院，廣東 揭西 515400）

近年來產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌株引起醫(yī)院感染有明顯增加趨勢，為正確選用抗菌藥物和控制院內(nèi)感染流行，我科對臨床各科室的產(chǎn)ESBLs菌株做全面檢測，分析探討產(chǎn)ESBLs菌株的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布和耐藥性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 菌株來源

307株實(shí)驗(yàn)菌即大腸埃希菌（ECO）和肺炎克雷伯菌（KPN）均分離自我院門診及住院病人的不同臨床標(biāo)本，涉及科室包括神經(jīng)外科、內(nèi)科、ICU、泌尿外科、消化內(nèi)科、呼吸內(nèi)科、燒傷科、傳染科、骨科、腫瘤科、婦產(chǎn)科等，包括血液、痰、糞、尿、前列腺液、穿刺液等。

表2 產(chǎn)ESBLs菌與非產(chǎn)ESBLs菌耐藥率的比較

1.2 材料

頭孢他啶（CAZ）、頭孢噻肟（CTX）、氨曲南（ATM）、頭孢哌酮（CFP）、頭孢曲松（CRO）、阿莫西林/克拉維酸（AMC）、頭孢噻肟/克拉維酸（CD03）藥敏紙片均購于美國輝瑞制藥有限公司，氧氟沙星（OFX）、亞胺培南（IPM）等其他藥敏紙片、M-H購于杭州天和生物試劑有限公司。

1.3 菌種鑒定

①ESBLs初篩實(shí)驗(yàn)：按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[1]常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)菌分離、培養(yǎng)。使用Nccls（美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)）推薦方法，待檢菌株K-B法制備菌液、接種平皿后常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法操作。貼兩種以上頭孢菌素如頭孢他啶或頭孢噻肟等，35℃孵育24h，測其抑菌環(huán)直徑，并按可疑菌株標(biāo)準(zhǔn)納入。②確證實(shí)驗(yàn)：K-B法將產(chǎn)ESBL的菌株接種于MH平皿，貼頭孢噻肟/克拉維酸等復(fù)合劑紙片，當(dāng)任何一種復(fù)合劑紙片抑菌環(huán)直徑比單獨(dú)藥敏紙片抑菌環(huán)直徑超過5mm，即可確證該菌株產(chǎn)ESBLs。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次研究所得數(shù)據(jù)均由SPSS13.0軟件統(tǒng)計(jì)包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組計(jì)數(shù)資料或療效比較采用χ2檢驗(yàn)，組間對比采用t檢驗(yàn)，其中以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 本研究中185株大腸埃希菌和122株肺炎克雷伯菌共檢出87株產(chǎn)ESBLs菌株，總檢出率為28.3%。其中ECO產(chǎn)ESBLs菌株檢出率為28.1%（52株），KPN產(chǎn)ESBLs菌株檢出率為28.6%（35株）。

2.2 產(chǎn)ESBLs菌株在各病區(qū)檢出率（詳見表1）。在神經(jīng)外科最高，為41.7%，最低為腫瘤科13.3%。產(chǎn)ESBLs與非產(chǎn)ESBLs菌株耐藥率比較（表2），產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對常用抗菌藥物的耐藥率，除亞胺培南外，均顯著高于非產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌（P＞0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 不同科室送檢標(biāo)本中產(chǎn)ESBLs菌檢出率

3 討 論

由于三代頭孢菌素等大量超廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素在臨床上的應(yīng)用，使細(xì)菌的耐藥性發(fā)生了新的變化，由質(zhì)粒介導(dǎo)的超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的產(chǎn)生，可使β-內(nèi)酰胺類抗生素的β-內(nèi)酰胺環(huán)水解，喪失抗菌活性[2]。該酶主要由腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生，是TEM-1、TEM-2及SHV-1的突變酶，能水解青霉素類、頭孢菌素類及單環(huán)類抗生素，但對頭霉素類和碳青霉烯類無明顯作用。由于其作用廣泛，可以水解頭孢噻肟，或者水解頭孢他啶等，因此被稱作超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）[3]。

據(jù)統(tǒng)計(jì)，ESBLs主要由大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)生，本研究中185株大腸埃希菌和122株肺炎克雷伯菌共檢出87株產(chǎn)ESBLs菌株，總檢出率為28.3%，其中大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率為28.，1%，肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs菌株為28.6%。在臨床各科室都有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)ESBLs菌株，說明抗生素臨床使用的合理性還有待提高。外科主要是神經(jīng)外科和燒傷病房。根據(jù)我們的調(diào)查，神經(jīng)外科患者病情一般比較復(fù)雜，在抗生素使用上一般種類多且時(shí)間長，特別是頭孢菌素類抗生素劑量和時(shí)間，加上患者自身因素如年齡偏大、抵抗力低，臥床時(shí)間較長等，因而容易出現(xiàn)產(chǎn)ESBLs菌株。內(nèi)科以呼吸內(nèi)科最高，檢出率為36.1%，主要由于該科患者年齡較大，絕大部分為老年患者，不少患者超過10年慢支病史等，長年服用各種抗菌素，且不少合并有心臟等多種臟器衰竭，并發(fā)癥較多，因而其檢出率在內(nèi)科為最高。在一定程度上說抗菌素的使用過程是培養(yǎng)耐藥菌株的過程，使用越廣泛，其敏感性就越差。ESBLs耐藥范圍擴(kuò)大、耐藥性轉(zhuǎn)移廣、發(fā)生率增長快以及新基因型的不斷發(fā)現(xiàn)[4]，給臨床治療和醫(yī)院感染控制帶來不少困難，因而需要提高醫(yī)務(wù)人員的認(rèn)識，加強(qiáng)抗菌藥物的使用，才能從根源上控制產(chǎn)ESBLs的菌株的局部流行。

[1] 葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].2版.南京:東南大學(xué)出版社,1997;500-509.

[2] 葉曉光,王若倫,林紅燕,等.產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌耐藥譜動(dòng)態(tài)觀察[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2004,14(5):492-495.

[3] 劉朝暉,陳勁龍,葉惠芬,等.克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的檢測及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2003,13(4):375-377.

[4] 倪語星,毛向群,王志軍.質(zhì)粒介導(dǎo)的超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的耐藥性問題及檢測[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22(增刊):19.