針氧療法對(duì)慢性鼻-鼻竇炎兔血清中IL-8、TNF-a的影響

呂品,李勝濤,邙玲玲,周新穎

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針氧療法對(duì)慢性鼻-鼻竇炎兔血清中IL-8、TNF-a的影響

呂品1,李勝濤2,邙玲玲3,周新穎2

(1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院,北京 100029;2.成都中醫(yī)藥大學(xué),四川 610075;3.天津市河?xùn)|區(qū)常州醫(yī)院,天津 300250)

從對(duì)慢性鼻-鼻竇炎兔血清中白細(xì)胞介素8(IL-8)、腫瘤壞死因子(TNF-a)影響的角度,揭示針氧療法治療慢性鼻-鼻竇炎的分子生物學(xué)機(jī)制。取體重1.5～3.0 kg健康新西蘭大白兔45只,隨機(jī)分為正常組、模型組、西藥組、針刺組、針氧組,共5組,每組9只。隨后建立兔慢性鼻-鼻竇炎模型。造模后第43天開始,西藥組服克拉霉素片,針刺組針刺5組穴位,針氧組在針刺組基礎(chǔ)上加氧療。治療2星期后,心臟取血提取血清,用ELISA法測(cè)各組新西蘭兔血清中IL-8、TNF-a含量。模型組兔血清IL-8含量明顯升高,與正常組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.01)。針氧治療后多數(shù)兔血清中IL-8含量降低,但與模型組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。模型組兔血清TNF-a含量明顯升高,與正常組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.01)。針氧治療后兔血清TNF-a含量降低,與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。針氧療法能有效改善炎癥所引起的兔全身表現(xiàn),降低部分兔血清中IL-8含量,降低兔血清中TNF-a含量,從而抑制炎癥的發(fā)展。

針刺;針氧療法;鼻竇炎;酶聯(lián)免疫吸附法;白細(xì)胞介素8;腫瘤壞死因子

慢性鼻-鼻竇炎是單一鼻竇或各鼻竇黏膜的慢性化膿性疾病[1],是一種常見多發(fā)性耳鼻喉科疾病。慢性鼻-鼻竇炎病程長(zhǎng),反復(fù)發(fā)作,難以治愈。主要局部癥狀為嚏噴、鼻塞、膿涕、嗅覺障礙、面部疼痛或壓迫感、頭痛等。本研究是通過實(shí)驗(yàn)觀察針氧療法對(duì)慢性鼻-鼻竇炎兔炎性細(xì)胞因子的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

健康新西蘭大白兔45只,體重1.5～3.0 kg。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)造模

取門診慢性鼻-鼻竇炎患者上頜竇穿刺沖洗液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),得到1麥?zhǔn)蠁挝坏募?xì)菌懸濁液。參考林彬等[2]報(bào)道的竇口不完全堵塞加竇腔留置棉絮的造模方法,建立兔慢性鼻-鼻竇炎模型。具體造模方法如下。整個(gè)手術(shù)過程在無菌操作的前提下進(jìn)行,將健康新西蘭大白兔用戊巴比妥鈉2 mL/kg耳緣靜脈注射麻醉后,將其鼻背正中的毛剪短、刮光。常規(guī)消毒、鋪巾,1%利多卡因術(shù)區(qū)浸潤(rùn)麻醉,沿鼻背正中線切一縱長(zhǎng)切口,取雙側(cè)上頜竇前壁,分離皮下組織及骨膜。用上頜竇穿刺針在上頜竇前壁圓孔凹陷處鉆開直徑大約1.5 mm的小孔。取少量棉絮通過上頜竇前壁所鉆的小孔,將其置放在竇口及竇腔中,不必完全堵塞竇口。而后用1 mL注射器抽取上述1 mL細(xì)菌懸濁液,小心緩慢通過小孔注入模型組、西藥組、針刺組、針氧組兔竇腔內(nèi)。碘伏消毒手術(shù)創(chuàng)面,將骨膜、皮膚逐層縫合。飼養(yǎng)42 d,建立CRS模型。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組與治療

將45只健康新西蘭兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1星期后,按隨機(jī)數(shù)字表法分為5組,即正常組、模型組、西藥組、針刺組、針氧組,每組9只。自造模后第43天開始,西藥組將備用的克拉霉素按25 mg/kg·d[3]灌服給藥;針刺組將兔固定在兔架上,從面部到下肢,依次針刺雙側(cè)迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴和后三里穴,留針15 min;針氧組將兔固定在兔架上,從面部到下肢,依次針刺雙側(cè)迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴和后三里穴,針刺后將兔架放入密封箱后,給氧10 min。每日治療1次,療程共14 d。

1.2.3 取材

治療結(jié)束后,心臟取血裝入離心管內(nèi),3000×離心15 min后用移液器取出上清液,獲取血清,－20℃冰箱保存。

1.2.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法

酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清中白細(xì)胞介素8(IL-8)、腫瘤壞死因子(TNF-a)濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,各組數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,等級(jí)資料采用兩個(gè)組別的非參數(shù)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 一般情況觀察

適應(yīng)性喂養(yǎng)至造模前,各組新西蘭兔體重均自然增加,行動(dòng)敏捷,進(jìn)食正常,皮毛密集而有光澤,鼻、唇部濕潤(rùn)清潔,眼睛明亮,大便正常,無死亡。

造模2 d后,模型組、西藥組、針刺組、針氧組兔陸續(xù)普遍出現(xiàn)精神差,活動(dòng)減少,進(jìn)食及飲水量有所下降。在造模第5天,各治療組和模型組兔進(jìn)食及飲水量明顯下降,倦怠懶動(dòng),大便溏稀、皮毛光澤度差。西藥組和針刺組經(jīng)治療后,精神轉(zhuǎn)佳,活動(dòng)較治療前多,進(jìn)食及飲水量稍有增加。針氧組經(jīng)治療后,精神轉(zhuǎn)佳,活動(dòng)如常,進(jìn)食及飲水量顯著增加,皮毛恢復(fù)光澤。

2.2 主要癥狀體征觀察

造模前,各組兔無鼻塞、膿涕癥狀,個(gè)別兔偶爾打噴嚏,屬正常生理反應(yīng)。造模后至治療前,各組兔(除正常組)鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀明顯。治療后,西藥組和針氧組兔鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀消失。針刺組噴嚏癥狀消失,鼻塞癥狀減輕,膿涕量較治療前有所減少,但仍然不斷流出。正常組兔,始終無鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀。模型組從造模成功至處死時(shí),鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀明顯。

2.3 血清中IL-8含量的測(cè)定

模型組兔血清IL-8含量明顯升高,與正常組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.01)。西藥治療后兔血清中IL-8含量明顯降低,與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。針刺治療后個(gè)別兔血清中IL-8含量降低,與模型組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。針氧治療后多數(shù)兔血清中IL-8含量降低(只有1例含量增高,比模型組高出很多,分析原因可能是因?yàn)椴杉簳r(shí)被感染),但與模型組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。詳見表1。

表1 各組兔血清IL-8含量比較 (±s)

注:與正常組比較1)＜0.01;與模型組比較2)＜0.05

2.4 血清中TNF-a含量的測(cè)定

模型組兔血清TNF-a含量明顯升高,與正常組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.01)。西藥治療后兔血清TNF-a含量下降,與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.01)。針刺治療后兔血清TNF-a含量略有所下降,與模型組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。針氧治療后兔血清TNF-a含量下降,與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。詳見表2。

表2 各組兔血清TNF-a含量 (±s)

注:與正常組比較1)＜0.01;與模型組比較2)＜0.05,3)＜0.01

3 討論

3.1 慢性鼻-鼻竇炎的治療方法

目前慢性鼻-鼻竇炎的治療,西醫(yī)以鼻內(nèi)窺鏡手術(shù)和西藥為主,中醫(yī)以內(nèi)服中藥為主及中藥外敷、針灸、氧療等方法。西醫(yī)治療方法存在著一些不足,如細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)會(huì)使抗生素療效降低,局部長(zhǎng)期應(yīng)用血管收縮劑可導(dǎo)致藥物性鼻炎,手術(shù)治療會(huì)產(chǎn)生手術(shù)諸多后遺癥等。中藥治療慢性鼻竇炎效果較好,但對(duì)于不適宜服用中藥的患者,治療慢性鼻竇炎就缺少良效方法。面對(duì)這些問題,迫切需要尋求一種療效確切、穩(wěn)定、副反應(yīng)少的新治療方法。針氧療法治療慢性鼻-鼻竇炎缺乏相關(guān)報(bào)道和規(guī)范化的研究,也缺乏隨機(jī)對(duì)照的綜合研究。如何運(yùn)用針氧療法治療慢性鼻-鼻竇炎對(duì)于臨床治療來說是一個(gè)值得關(guān)注的問題。

3.2 選穴依據(jù)

鼻淵者與肺、脾、腎有密切的聯(lián)系,其證有虛、實(shí)之分。實(shí)者以脾胃濕熱及外感風(fēng)熱為多見;虛者以肺氣虛寒、脾氣虛弱、腎氣不足為多見。因此擬定針氧治療慢性鼻-鼻竇炎治療原則為疏風(fēng)清熱,宣肺降濁,健脾益氣,扶正祛邪。文獻(xiàn)研究表明[4],臨床選穴也有一定規(guī)律可循。根據(jù)對(duì)兔的可操作性選取迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴和足三里穴。肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴均為背俞穴,是臟腑經(jīng)氣到達(dá)體表的重要位置,背部有大團(tuán)的免疫細(xì)胞平時(shí)處于休眠狀態(tài),調(diào)整背俞穴激活了免疫細(xì)胞,提高了免疫力,有效地增強(qiáng)抵抗疾病的能力。

根據(jù)經(jīng)絡(luò)所過,主治所及的原理,近取鼻旁陽明大腸經(jīng)末穴迎香兩穴,疏風(fēng)清肺熱而通鼻竅。通過瀉法可使毛細(xì)血管收縮,鼻孔縮小,鼻癢、噴嚏、鼻分泌物減少,從而改善過敏性鼻炎癥狀及體征[5]。現(xiàn)代研究顯示,針刺治療可改善局部血液循環(huán),加速炎性產(chǎn)物的吸收和排泄,起到消炎退腫的作用[6,7]。肺俞屬膀胱經(jīng)腧穴,位于背部,具有疏風(fēng)瀉熱,宣肺解表,肅肺降濁作用。肺臟的濕熱之氣外傳于膀胱經(jīng),肺俞穴有散發(fā)肺臟之熱作用。針灸背部的肺俞穴,通過其經(jīng)絡(luò)系統(tǒng),可調(diào)節(jié)肺臟功能,調(diào)和氣血陰陽,損有余而補(bǔ)不足,使人體氣血維持動(dòng)態(tài)的平衡。脾俞具有健脾利濕、調(diào)整消化道的功能。電針百會(huì)、脾俞穴[8],針后30 min、60 min、90 min時(shí)白細(xì)胞總數(shù)顯著升高。白細(xì)胞具有吞噬、殺傷細(xì)菌及異物和免疫功能。電針機(jī)體后,通過經(jīng)絡(luò)、神經(jīng)-體液系統(tǒng)等的調(diào)節(jié),使白細(xì)胞總數(shù)升高,增強(qiáng)機(jī)體的防御能力和抗病能力,起到扶正祛邪的作用。腎具有受藏肺所吸入之清氣的功能。腎受藏清氣的功能,是腎氣的固攝作用之一。腎俞穴具有補(bǔ)益腎氣的作用,使之固攝作用得以發(fā)揮。腎俞穴是經(jīng)脈氣血流注多的地方,具有補(bǔ)益氣血之功效。足三里為足陽明胃經(jīng)合穴,胃經(jīng)起于鼻旁,具有調(diào)理脾胃,補(bǔ)益氣血,疏風(fēng)化濕,扶正祛邪之功效。足三里穴是陽明經(jīng)穴,根據(jù)陽明經(jīng)多氣多血的中醫(yī)理論選穴,足三里能健脾,消除腹脹,助消化[9]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明刺激足三里能夠調(diào)整全身功能,提高機(jī)體免疫力[10]。

3.3 針氧療法原理

氧是新陳代謝的關(guān)鍵物質(zhì),是生命活動(dòng)的第一要素。缺氧引起疾病及病變導(dǎo)致缺氧的情況很多,因此氧療在各種疾病的治療、預(yù)防和康復(fù)中得到廣泛的應(yīng)用。常壓吸氧后血氧分壓可提高50%,氧向組織的彌散距離迅速增加,血液黏度降低,微循環(huán)改善,血管收縮,減輕組織水腫,吞噬細(xì)胞功能加強(qiáng),有利于壞死組織的修復(fù)和清除,加快側(cè)支循環(huán)的建立,清除無氧代謝的酸性產(chǎn)物,并有免疫調(diào)節(jié)作用。針刺通過刺激穴位,改善局部血液循環(huán),調(diào)節(jié)局部免疫功能,促進(jìn)炎癥恢復(fù),對(duì)炎癥的滲出、變質(zhì)、增生病理變化過程均有調(diào)整作用,既能促進(jìn)炎癥的防衛(wèi)反應(yīng),又能抑制損傷反應(yīng)。

關(guān)于針刺配合吸氧的作用機(jī)理目前尚無明確實(shí)驗(yàn)研究證實(shí),但研究表明氧氣除可以滿足機(jī)體各器官新陳代謝時(shí)對(duì)氧氣的需要外,還可增加有氧代謝以達(dá)到改善各臟器功能的作用。長(zhǎng)期鼻塞會(huì)引起大腦及全身各組織的缺氧,在針刺的同時(shí)吸入氧氣可迅速改善患者腦細(xì)胞缺氧現(xiàn)象,氧氣被吸入終末支氣管和肺泡,能迅速進(jìn)入血液循環(huán),改善血液黏稠度,提高動(dòng)脈血氧含量及飽和度,促進(jìn)代謝。采取針刺配合氧療的治療方法,針刺不僅能疏通經(jīng)絡(luò),暢調(diào)氣血,同時(shí)對(duì)氧起到引經(jīng)定位,直達(dá)病所的作用。針氧療法既能促進(jìn)炎癥灶的愈合,又能控制組織的增生性病變的發(fā)展,改善兔整體機(jī)能,從而使慢性鼻-鼻竇炎兔機(jī)體逐步恢復(fù)正常。

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Effect of Acupuncture plus Oxygen Therapy on Serum IL-9 and TNF-ain Chronic Rhinosinusitis Rabbits

1,-2,-3,-2.

1.’,100029,; 2.,610075,; 3.,300250,

To explore the molecular biological mechanism of combined acupuncture and oxygen therapy in treating chronic rhinosinusitis by studying the serum IL-8 and TNF-ain chronic rhinosinusitis rabbits.Forty-five healthy New Zealand white rabbits (weight 1.5～3.0 kg) were randomly divided into five groups, a normal group, a model group, a western medication group, an acupuncture group, and an acupuncture-oxygen group, with 9 in each group. On the 43rd day after the chronic rhinosinusitis rabbit models were successfully developed, the Western medication group started to take Clarithromycin tablets, the acupuncture group received acupuncture treatment with 5 groups of acupoints, and the acupuncture-oxygen group received additional oxygen therapy plus acupuncture. Blood was drawn via intracardiac puncture for extracting blood serum after 2-week treatment, and ELISA was used for determining the contents of serum IL-8 and TNF-a.Compared with the normal group, the content of serum IL-8 was significantly higher in the model group (＜0.01). Reduction of serum IL-8 content was detected in majority of rabbits in the acupuncture-oxygen group, but without significant difference compared with the model group (＞0.05). Compared with the normal group, the content of serum TNF-awas significantly higher in the model group (＜0.01). Compared with the model group, the content of serum TNF-awas significantly lower in the acupuncture-oxygen group (＜0.05).Combined acupuncture and oxygen therapy can effectively improve the general symptoms in rabbits induced by inflammation, and reduce the content of rabbit serum IL-8 to some extent, and definitely reduce the content of rabbit serum TNF-a, inhibiting the development of inflammation.

Acupuncture; Acupuncture-oxygen therapy; Sinusitis; Enzyme-linked immunosorbent assay; IL-8; TNF-a

1005-0957(2011)08-0574-03

R2-03

A

10.3969/j.issn.1005-0957.2011.08.574

2011-05-20

呂品(1983 - ),女,碩士