益氣化痰祛瘀方對(duì)冠心病大鼠纖溶系統(tǒng)的影響*

河北省樂亭縣中醫(yī)院 左海寧 張東梅 張文立 趙淑明 (樂亭063600)

冠心病是由冠狀動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致冠脈管腔狹窄和冠脈痙攣性改變，引起冠狀動(dòng)脈供血相對(duì)不足，致使心肌缺血、缺氧所引起的心臟疾病。益氣化痰祛瘀方經(jīng)多年臨床觀察，治療冠心病的療效顯著。前期研究表明，本方通過調(diào)節(jié)冠心病大鼠6－Keto－PGF1а與TXB2的平衡狀態(tài)，以達(dá)到減輕實(shí)驗(yàn)動(dòng)物冠心病病變的作用。［1］據(jù)報(bào)道，冠心病的發(fā)生、發(fā)展與纖溶系統(tǒng)的異常亦有著密切的關(guān)系，本研究旨在通過實(shí)驗(yàn)觀察益氣化痰祛瘀方對(duì)冠心病大鼠心肌和主動(dòng)脈組織PAI－1、t－PA表達(dá)的影響，了解其對(duì)冠心病大鼠纖溶系統(tǒng)的影響。

1 材料與方法

1.1 藥物及組成 益氣化痰祛瘀方由黃芪、桂枝、瓜蔞、薤白、半夏、川芎、赤芍、三七等組成，由河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院中藥制劑室水煎濃縮備用;復(fù)方丹參滴丸(天津天士力制藥股份有限公司);垂體后葉素注射液 (南京新百藥業(yè)有限公司)。

1.2 儀器與試劑 BL－420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、PM－10AD光學(xué)顯微鏡、Motic6.0數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng);PAI－1、t－PA免疫組化試劑盒。

1.3 動(dòng)物分組、模型建立及給藥方法 健康雄性SD大鼠60只 (河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證號(hào):810054)，體質(zhì)量 (170±10)g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組 (簡稱正常組)、模型對(duì)照組 (簡稱模型組)、益氣化痰祛瘀方高劑量組 (簡稱高劑量組)、益氣化痰祛瘀方低劑量組(簡稱低劑量組)、復(fù)方丹參滴丸對(duì)照組 (簡稱對(duì)照組)，每組12只;除正常組外，按參考文獻(xiàn)［2］建立大鼠冠心病模型，喂飼高脂飼料 (2%膽固醇、10%豬油、0.2%丙基硫氧嘧啶、0.5%膽酸鈉、87.3%基礎(chǔ)飼料)6周，同時(shí)灌服藥物，高劑量組給予益氣化痰祛瘀方藥22.28 g/kg·d－1、低劑量組給予益氣化痰祛瘀方藥11.14 g/kg·d－1，對(duì)照組給予復(fù)方丹參滴丸0.17 g/kg·d－1，正常組和模型組給予等體積蒸餾水灌胃，1次/d。于末次灌胃前72 h始，除正常組外，每次灌胃30 min后，腹腔注射垂體后葉素30 u/kg·d－1，連續(xù)3 天。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

1.4.1 心電圖檢測(cè):實(shí)驗(yàn)6周末，末次腹腔注射垂體后葉素12 h后，20%烏拉坦腹腔注射麻醉，連接BL－420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，將其針狀電極分別插入大鼠左前肢和雙后肢皮下，記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖ST段抬高或降低的幅度 (mv)。

1.4.2 心肌和主動(dòng)脈組織PAI－1、t－PA表達(dá)的檢測(cè):

剖取心臟和升主動(dòng)脈，在心尖部取適量的心肌組織，濾紙吸干，4%多聚甲醛固定，采用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測(cè)心肌和主動(dòng)脈組織PAI－1、t－PA表達(dá)，每張切片選擇5個(gè)高倍視野，連接Motic Med 6.0數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)陽性細(xì)胞光密度值，取其均值。

2 結(jié)果

2.1 益氣化痰祛瘀方對(duì)冠心病大鼠心電圖ST段的影響

從表1可見，模型組大鼠心電圖ST段的變化值明顯高于正常組(P＜0.01);給藥后，各用藥組大鼠心電圖ST段的變化值均明顯低于模型組 (P＜0.01);各治療組之間比較差異無顯著性 (P＞0.05)。

2.2 益氣化痰祛瘀方對(duì)冠心病大鼠心肌、主動(dòng)脈組織PAI－1、t－PA表達(dá)的影響 從表1可見，模型組大鼠心肌和主動(dòng)脈組織PAI－1表達(dá)增強(qiáng) (P＜0.01)，t－PA表達(dá)減弱 (P＜0.01);各給藥組大鼠心肌和主動(dòng)脈組織PAI－1表達(dá)均較模型組減弱 (P＜0.01)，t－PA表達(dá)均較模型組增強(qiáng) (P＜0.01);且高、低劑量組優(yōu)于對(duì)照組 (P＜0.05或P＜0.01)，但高、低劑量組間差異無顯著性 (P＞0.05)。

表1 各組大鼠心電圖ST段變化以及心肌、主動(dòng)脈組織PAI－1、t－PA的表達(dá)情況(±s，n=12)

表1 各組大鼠心電圖ST段變化以及心肌、主動(dòng)脈組織PAI－1、t－PA的表達(dá)情況(±s，n=12)

注:與模型組比較，*P＜0.01;與對(duì)照組比較，△P＜0.01，△△P＜0.05

組別 ST段變化值(mv)PAI－1心肌 主動(dòng)脈t－PA心肌 主動(dòng)脈正常組 0.14±0.05* 0.121±0.027* 0.126±0.024* 0.219±0.040* 0.283±0.036*模型組 0.28±0.04 0.269±0.023 0.251±0.026 0.096±0.021 0.150±0.039對(duì)照組 0.20±0.04* 0.166±0.023* 0.184±0.026* 0.167±0.024* 0.211±0.023*高劑量組 0.19±0.03* 0.125±0.024＊△ 0.145±0.020＊△ 0.205±0.026＊△ 0.261±0.038＊△低劑量組 0.20±0.05* 0.133±0.022＊△ 0.159±0.028＊△△ 0.196±0.028＊△△ 0.255±0.046＊△△

3 討論

中醫(yī)學(xué)無冠心病之論述，據(jù)其病因、病機(jī)及證侯，屬于中醫(yī)學(xué)“胸痹”、“心痛”范疇。其發(fā)病主要是由于年老體虛或中年過勞，正氣不足，陰陽氣血失調(diào)，加之七情內(nèi)傷、飲食不節(jié)、寒冷刺激、勞逸失度等因素的影響，終致氣滯血瘀，胸陽不振，痰濁內(nèi)生，痰瘀痹阻于心脈而致本病。本病是“本虛標(biāo)實(shí)”、“虛實(shí)夾雜”的復(fù)雜過程。本虛是指氣、血、陰、陽的虧損或不足，標(biāo)實(shí)是指“陰寒、痰濁、血瘀”而言，尤以陽氣不足，痰瘀互結(jié)最為常見。據(jù)此，課題組精選益氣溫陽，化瘀祛痰中藥組成益氣化痰祛瘀方，經(jīng)臨床應(yīng)用療效顯著。方中黃芪、桂枝益氣溫陽，瓜蔞、薤白、半夏化痰寬胸，通陽散結(jié);川芎、三七、赤芍活血化瘀，行氣止痛。諸藥合用共奏益氣溫陽，化痰祛瘀，通脈止痛之功。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素除高血脂、高血壓、吸煙之外，纖溶系統(tǒng)功能異常亦是其促發(fā)因素之一，通過影響纖溶酶原激活物 (t－PA)及其抑制物 (PAI－1)的活性導(dǎo)致肌體纖溶能力降低，［3］加速動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展。纖溶系統(tǒng)主要由纖溶酶原、纖溶酶、纖溶酶原激活物 (PA)和纖溶酶原激活物抑制物組成。其中纖溶酶原激活物 (PA)有兩種類型:組織型 (t－PA)和尿激酶型(u－PA)，PA可激活纖溶酶原，降解纖維蛋白、細(xì)胞外基質(zhì)和黏附蛋白;纖溶酶原激活物抑制物有4種類型:內(nèi)皮細(xì)胞型PA I(PAI－1)、胎盤型PAI(PAI－2)、尿型PAI(API－3)和連接蛋白酶－1(protease nexin－1)，其中起重要作用的是PAI－1，具有滅活t－PA作用。

研究亦表明:纖溶系統(tǒng)的異常是導(dǎo)致血栓形成的重要原因之一，而血栓的形成與冠心病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。［4］t－PA和PAI－1是一對(duì)在維持肌體纖溶系統(tǒng)活性中起關(guān)鍵性調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)，［5］t－PA可加速纖維蛋白溶解，防止血栓形成;而PAI－I可對(duì)抗t－PA，抑制纖維蛋白溶解，促進(jìn)止血和血栓形成?？梢奝AI－1在冠心病的病理生理環(huán)節(jié)上起著關(guān)鍵作用，［6］且其高表達(dá)亦可促進(jìn)巨噬細(xì)胞和平滑肌的遷徙，加速動(dòng)脈硬化。因此，纖溶系統(tǒng)中t－PA和PAI－I平衡破壞及活性異?？赡苁枪谛牟“l(fā)生的直接原因。

本研究結(jié)果顯示:益氣化痰祛瘀方具有改善冠心病大鼠心肌缺血的功效，其作用機(jī)制可能通過下調(diào)心肌和主動(dòng)脈組織PAI－1受體表達(dá)，增強(qiáng)t－PA受體表達(dá)，調(diào)節(jié)纖溶系統(tǒng)，從而阻止冠狀動(dòng)脈粥樣硬化和血栓形成，增加冠脈血流量，改善心肌供血，達(dá)到治療冠心病的目的。

［1］趙淑明，張文立，吳中秋，等.益氣化痰祛瘀方對(duì)冠心病大鼠6－酮前列腺素F1а和血栓素B2的影響［J］.河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2011，26(2):7

［2］張明雪，常艷鵬，曹洪欣．溫陽活血中藥復(fù)方調(diào)控冠心病(心)陽虛血瘀證大鼠血小板內(nèi)受體、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用機(jī)制研究 ［J］．中華中醫(yī)藥雜志，2008，23(6):494－497

［3］馬建林，王圣，李新明，等．冠心病心絞痛患者纖溶系統(tǒng)與一氧化氮的變化［J］．心臟雜志，2007，29(1):131

［4］Gibbs CR，BlannAD，Watson RD et al．Abnormalities of hemorheo logical，endothelial，and pulatelet fun ction in patients with chronic heart failure in sinus rhythm:effects of angiotensin－converting enzyme inhibitor and beta－blocker therpy［J］．Circulation，2001，103(13):1 746－1 951

［5］Nordt TK，Lutzi S，Ruef J，et al．Attenuation by fibrates of plasmino－gen activator inhibitor type－1 expression in human arterial smooth muscle cells ［J］．Thromb Haemost，2001;86:1 305－1 313

［6］RollerRE，Janisch S，Carroll et a1．Changes in the fi－brinolytic systemin patientswith peripheral artrial occlu－sive disase undergoing percutaneous transluminal angio－plasty［J］．Thromb Res，1999，94:241－247