干擾素α-2a治療慢性乙肝患者血清Th1/Th2亞群細(xì)胞因子的水平變化及意義

谷斌

湖南省郴州市第二人民醫(yī)院，湖南郴州 423000

慢性病毒性肝炎的發(fā)生機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，研究證實(shí)，T淋巴細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子功能失調(diào)與慢性肝病發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[1]，慢性病毒性肝炎目前治療效果不理想。本文中筆者對90例慢性乙型肝炎患者應(yīng)用大劑量干擾素α（IFN-α）治療前后 T淋巴細(xì)胞亞群及 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的變化進(jìn)行了觀察，旨在探討干擾素療效與機(jī)體免疫狀態(tài)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2008年4月～2010年10月收治入院的慢性乙型肝炎患者90例，均符合2005年慢性乙型肝炎防治指南的臨床診斷分型標(biāo)準(zhǔn)[2]，其中，男68例，女22例；年齡24～48歲，平均（45.6±5.3）歲。隨機(jī)將90例患者設(shè)為HBeAg陽性組，給予IFN-α治療。選擇我院同期健康獻(xiàn)血者90例作為HBeAg陰性組，其中，男61例，女29例；年齡24～63歲，平均（42.6±6.7）歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

干擾素α-2a（北京凱因生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號：20080301-13），劑量是 3～5 MU/次，治療初 2～4 周每日 1 次，以后隔日1次，療程1年。干擾素α-2a治療5～8周，有應(yīng)答的患者常出現(xiàn)ALT升高，一般在治療后3～4個(gè)月ALT即恢復(fù)正常，不提倡給予降酶藥。但如果出現(xiàn)黃疸，應(yīng)停用，予以對癥處理，待黃疸消退后可繼續(xù)使用。干擾素治療達(dá)到完全應(yīng)答后，繼續(xù)治療3個(gè)月，可鞏固療效，防止復(fù)發(fā)。如果療程結(jié)束時(shí)仍處于部分應(yīng)答的病例可延長療程，或改用其他抗病毒藥物。

1.3 觀察指標(biāo)

血清 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10 水平檢測采集 IFN-α 治療前，治療第3、6、9和12個(gè)月患者血清和健康獻(xiàn)血者的血清，-80℃凍存。采用西門子IMMULITE.1000化學(xué)發(fā)光檢測儀， 化學(xué)發(fā)光法檢測血清 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平，ELISA試劑盒是美國Genzyme公司產(chǎn)品，晶美生物有限公司分裝。檢測結(jié)果以pg/ml為單位。具體步驟按說明書進(jìn)行，肝功能、血常規(guī)送檢驗(yàn)科常規(guī)檢查。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn)，以 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10與HBV-DNA含量變化相關(guān)性以直線相關(guān)性分析評價(jià)。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者檢測結(jié)果比較

見表1、2。90例慢性乙型肝炎患者血清中治療前后的IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10含量不斷變化趨勢與HBV-DNA 拷貝數(shù)相關(guān)，其相關(guān)系數(shù) r=-0.851、-0.732、0.817、0.835，均 P＜0.05。 由表2可知，治療第3、6、9、12個(gè)月時(shí)與HBeAg陰性組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 治療前后Th1/Th2平衡檢測結(jié)果比較

治療后Th1/Th2有逐漸升高的趨勢，在第6、9個(gè)月時(shí)接近1，但治療第12個(gè)月時(shí)又有下降趨勢，總體上仍以Th2優(yōu)勢反應(yīng)為主，而HBeAg陽性完全應(yīng)答組則由治療前的Th2優(yōu)勢應(yīng)答轉(zhuǎn)為Th1優(yōu)勢應(yīng)答（圖1）。

表1 90例患者治療前后ALT、HBV-DNA含量、Th1細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ及Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-10血清濃度變化（x±s）

表 2 治療前后血清 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10 水平檢測結(jié)果（x±s，ng/ml）

3 討論

病毒性肝炎是一種肝細(xì)胞破壞的過程也是病毒清除的過程，由于病毒的特性和機(jī)體在漫長感染過程中的反復(fù)自身感染和免疫耐受，因此清除過程大多不力，導(dǎo)致了病程遷延[3-4]。干擾素可以說是目前在國際上公認(rèn)對乙肝、丙肝病毒復(fù)制有抑制作用的藥物[5-6]。干擾素對免疫的調(diào)控作用有助于這種免疫清除過程過程，但必須在機(jī)體自身有免疫清除反應(yīng)時(shí)干擾素的作用才較為理想[7]。干擾素α治療乙型肝炎可明顯提高外周血CD4+數(shù)量，并使CD8+細(xì)胞大量進(jìn)入肝內(nèi)，以增強(qiáng)細(xì)胞毒活性；亦可通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞，抗原遞呈細(xì)胞功能和細(xì)胞因子產(chǎn)生，維持細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的平衡來發(fā)揮其抗病毒作用[8]。本文中筆者者還觀察了干擾素α治療有效組治療前后Th細(xì)胞因子的變化，Th活化后可釋放細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)T、B細(xì)胞、單核細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞活性，機(jī)體對細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞外抗原的免疫應(yīng)答主要受Th1和Th2調(diào)節(jié)?；罨腡h1產(chǎn)生IL-2和IFN-γ；活化的Th2釋放IL-4及IL-10等細(xì)胞因子。Th1與Th2參與調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)以及器官功能的自我穩(wěn)定，細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫應(yīng)答在肝細(xì)胞炎癥壞死、病毒清除及病毒持續(xù)存在等方面的免疫機(jī)制中均起著中心作用。經(jīng)干擾素α治療后Th1/Th2平衡檢測結(jié)果治療后Th1/Th2有逐漸升高的趨勢，在第6、9個(gè)月時(shí)接近1，但治療第12個(gè)月時(shí)又有下降趨勢，總體上仍以Th2優(yōu)勢反應(yīng)為主，而HBeAg陽性完全應(yīng)答組則由治療前的Th2優(yōu)勢應(yīng)答轉(zhuǎn)為Th1優(yōu)勢應(yīng)答。表明干擾素既能抑制HBV-DNA復(fù)制又能調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞因子比例平衡，使免疫反應(yīng)由Th2型向Th1型逆轉(zhuǎn)。其作用機(jī)制可能是干擾素可以促進(jìn)Th1細(xì)胞發(fā)育，抑制Th2細(xì)胞發(fā)育，進(jìn)而促進(jìn)IFN-γ等Th1型細(xì)胞因子的分泌，抑制IL-4等Th2型細(xì)胞因子的分泌，提高細(xì)胞免疫反應(yīng)，抑制體液免疫反應(yīng)，從而增強(qiáng)CD8 T細(xì)胞的活性，清除細(xì)胞內(nèi)病毒，降低血清HBV-DNA的含量[9-10]。

由此可見，干擾素應(yīng)用的目的應(yīng)該包括抑制病毒復(fù)制和清除復(fù)制病毒的“機(jī)器”。慢性病毒性肝炎是由于乙肝、丙肝病毒感染肝細(xì)胞而導(dǎo)致的疾病。因此，如果干擾素能夠徹底清除或減少肝炎病毒的數(shù)量，那么肝臟就可以行使自身的免疫功能使肝臟炎癥消退，并通過其極強(qiáng)的再生代謝能力逐漸康復(fù)[11-12]。研究認(rèn)為，乙肝病毒水平感染的時(shí)間少于2年者，用干擾素制劑后，HBsAg、HBeAg及乙肝病毒脫氧核糖核酸的消失比較容易；患者肝臟活檢病理改變輕者，沒有或稍有肝臟纖維化者的效果較好；同時(shí)根據(jù)治療后HBV-DNA復(fù)制指標(biāo)陰轉(zhuǎn)及HBeAg/HBeAb轉(zhuǎn)換情況。由此可見，干擾素治療慢性乙型肝炎患者是通過調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞的平衡，提高Th1細(xì)胞免疫反應(yīng)，抑制Th2體液免疫反應(yīng)，從而抑制HBVDNA復(fù)制。

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