復(fù)方除痹湯對(duì)大鼠佐劑型關(guān)節(jié)炎血液流變學(xué)的影響

盧雯雯 吳國(guó)琳 李劍平 余國(guó)友 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院 杭州 310003

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以關(guān)節(jié)滑膜為主要靶組織的慢性系統(tǒng)性炎癥性的自身免疫性疾病，屬于中醫(yī)“痹癥”范疇。筆者在臨床工作中發(fā)現(xiàn)復(fù)方除痹湯加減能改善類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的腫脹、疼痛等癥狀。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用復(fù)方除痹湯（由白附、防風(fēng)、羌活、白芷等組成）加雷公藤多苷片治療大鼠佐劑型關(guān)節(jié)炎，觀察血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)的變化，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性SD大鼠64只，體重170～200g，清潔級(jí)，由浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心提供。

1.2 材 料 復(fù)方除痹湯的原材料（白附、防風(fēng)、羌活、白芷等）購(gòu)于浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院中藥房，并煎制濃縮成每毫升含生藥1g的中藥煎劑；福氏完全佐劑（上海升正生物技術(shù)有限公司）；雷公藤多苷片（浙江得恩德制藥有限公司）；血液流變學(xué)分析儀（SA-6000賽科希德公司（北京））。

1.3 方 法 參照文獻(xiàn)方法[1]，進(jìn)行佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠造模。將64只SD大鼠隨機(jī)分為正常組10只，模型組18只，雷公藤組、復(fù)方除痹湯組、復(fù)方除痹湯+雷公藤組各12只。除正常組外其余各組大鼠左側(cè)足底常規(guī)消毒后，足跖皮內(nèi)注射福氏完全佐劑50μL致炎，其中致炎30min前和致炎后8h、22h、32h、46h和56h分別給藥1次；正常組和模型組給予蒸餾水20mL/kg灌胃，雷公藤組給雷公藤多苷片40mg/kg，復(fù)方除痹湯組給予湯劑8g/kg，復(fù)方除痹湯+雷公藤組給予湯劑8g/kg+雷公藤多苷片40mg/kg。然后停藥至第17天觀察繼發(fā)性病變情況，第17天開(kāi)始繼續(xù)灌胃給藥，1天1次，劑量同上。致炎后第28天全部大鼠股動(dòng)脈放血致死，取2～3mL全血置于肝素抗凝管中行血液流變學(xué)檢測(cè)。

1.4 觀察指標(biāo) 血液流變儀檢測(cè)血液流變學(xué)指標(biāo)：全血黏度（低、中、高切）、卡松黏度、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞壓積及聚集指數(shù)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 一般情況 正常組大鼠被毛緊密貼身、毛色光澤，精神良好、活動(dòng)敏捷，食量正常，大便呈顆粒狀；模型組大鼠在足跖注射佐劑誘發(fā)關(guān)節(jié)炎期間，由于關(guān)節(jié)腫脹、疼痛而活動(dòng)減少，被毛較松散，毛色偏暗，精神狀態(tài)偏差，食量減少，并有不同程度的便溏，體重較正常組增長(zhǎng)緩慢。各用藥組大鼠的被毛、色澤、精神狀態(tài)、活動(dòng)量、食量均優(yōu)于模型組。實(shí)驗(yàn)期間，除復(fù)方除痹湯組大鼠因灌胃不慎死亡1只，其余大鼠均存活。在大鼠處死采血過(guò)程中模型組、復(fù)方除痹湯組各2個(gè)標(biāo)本出現(xiàn)血液凝結(jié)現(xiàn)象，無(wú)法檢測(cè)指標(biāo)。

2.2 各組佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠血黏度水平 模型組大鼠全血低切、中切、高切及卡松黏度均明顯高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，雷公藤組和復(fù)方除痹湯組血黏度各指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；復(fù)方除痹湯+雷公藤組全血低切、中切、高切指標(biāo)有一定程度下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；卡松黏度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。雷公藤組大鼠全血低切、中切、高切及卡松黏度均低于復(fù)方除痹湯組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 五組大鼠血黏度比較（） mpa·s

表1 五組大鼠血黏度比較（） mpa·s

注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05

組 別 n/只 全血低切1 低切2 中切 高切 卡松黏度正常組 10 20.04±3.03 8.50±1.11 4.71±0.55 3.44±0.39 2.74±0.32模型組 16 28.94±2.66** 12.13±1.04** 6.62±0.57** 4.81±0.46** 3.66±0.60**雷公藤組 12 28.91±1.88 12.01±1.31 6.73±0.61 4.78±0.50 3.61±0.44復(fù)方除痹湯組 9 31.41±3.56 12.08±1.10 6.86±0.56 4.88±0.38 3.81±0.30復(fù)方除痹湯+雷公藤組 12 26.62±1.93△ 11.17±0.75△ 6.18±0.38△ 4.48±0.30△ 3.58±0.28

2.3 各組佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及聚集性比較 與正常組比較，模型組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞壓積上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），紅細(xì)胞聚集指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與模型組比較，復(fù)方除痹湯+雷公藤組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞壓積下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其余各用藥組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞壓積和紅細(xì)胞聚集指數(shù)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。雷公藤組大鼠紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞聚集指數(shù)均低于復(fù)方除痹湯組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表 2。

表2 五組大鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及聚集性比較（）

表2 五組大鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及聚集性比較（）

注：與正常組比較，*P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05。

組 別 n/只 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)/×1012/L 紅細(xì)胞壓積/% 紅細(xì)胞聚集指數(shù)正常組 10 7.45±0.25 42.29±1.11 5.83±0.61模型組 16 7.93±0.56* 44.01±2.04* 6.04±0.47雷公藤組 12 7.92±0.47 43.83±2.10 5.98±0.38復(fù)方除痹湯組 9 7.70±0.59 43.92±1.23 6.43±0.53復(fù)方除痹湯+雷公藤組 12 7.53±0.45△ 42.63±1.14△ 5.92±0.50

3 討論

中醫(yī)認(rèn)為，血瘀是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎主要病機(jī)之一。風(fēng)寒濕熱之邪留著關(guān)節(jié)、經(jīng)絡(luò)日久，寒邪凝滯，濕邪阻痹，經(jīng)絡(luò)氣血運(yùn)行不利而變生瘀血、痰濁，深入筋骨，停留關(guān)節(jié)骨骼，痰瘀膠結(jié)，痹阻加重，關(guān)節(jié)僵硬變形[2]?！夺t(yī)林改錯(cuò)》指出：“痛久必有瘀血”、“瘀血致痹”。血液流變學(xué)是研究中醫(yī)“血瘀”的一個(gè)重要指標(biāo)[3]。全血黏度增高往往導(dǎo)致血液循環(huán)減慢及組織氧飽和度降低。目前不少報(bào)道指出類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的血液流變學(xué)指標(biāo)存在明顯異常，如全血黏度、血漿黏度增高，血小板黏附率上升，紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞電泳時(shí)間偏長(zhǎng)，血沉偏快等[4]。因此改善血流變學(xué)指標(biāo)也是中醫(yī)治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的目的之一。

在本研究中，模型組大鼠全血低切、中切、高切、卡松黏度、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及紅細(xì)胞壓積均明顯高于正常組，表明佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠模型存在血液流變學(xué)異常。與模型組相比，復(fù)方除痹湯+雷公藤組全血低切、中切、高切指標(biāo)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及紅細(xì)胞壓積下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；卡松黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。雷公藤組大鼠全血低切、中切、高切、卡松黏度、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞聚集指數(shù)均低于復(fù)方除痹湯組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，復(fù)方除痹湯聯(lián)合雷公藤對(duì)佐劑型關(guān)節(jié)炎模型大鼠血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)具有一定的改善作用。復(fù)方除痹湯可能通過(guò)改善血液流變學(xué)和微循環(huán)，發(fā)揮抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用。

本實(shí)驗(yàn)中單獨(dú)使用雷公藤多苷片及復(fù)方除痹湯時(shí)對(duì)于佐劑型大鼠血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)未見(jiàn)明顯的影響，考慮與藥物劑量或動(dòng)物樣本數(shù)偏少有關(guān)。

［1］徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：919-921.

［2］田雨，薛軼燕，蘇勵(lì).痹證必有瘀［J］.陜西中醫(yī)，2006，27（5）：578-579.

［3］王鴻儒.血液流變學(xué)［M］.北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997：151.

［4］齊寶慶，李英.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血流變變化的探討［J］.天津醫(yī)藥，2003，31（8）：549.