絕經(jīng)期前后婦女血漿脂聯(lián)素、纖維蛋白原水平研究

于紅玖，常 虹，秦 宇，呂 田

(大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 特需醫(yī)療部，遼寧 大連 116011)

流行病學(xué)研究表明，絕經(jīng)后婦女心血管病、糖尿病等代謝相關(guān)疾病發(fā)病率較絕經(jīng)前增高，推測(cè)這些疾病的發(fā)生可能與絕經(jīng)后婦女體內(nèi)激素水平的變化有關(guān)。近年來，大量國內(nèi)外研究證實(shí)脂聯(lián)素(adiponectin,APN)與代謝綜合征(Metabolic syndrome，MS)，冠心病(Coronary heart disease，CHD)的發(fā)病密切相關(guān)。有學(xué)者推測(cè)APN參與絕經(jīng)后婦女疾病的發(fā)生、發(fā)展過程，APN水平的升高對(duì)機(jī)體是一種保護(hù)作用，推測(cè)絕經(jīng)后婦女APN水平下降，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生；但也有學(xué)者提出相反的觀點(diǎn)。

本研究對(duì)大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院體檢中心86名年齡在40～65歲的絕經(jīng)期前后婦女的血漿APN、纖維蛋白原(fibrinogen,Fig)水平進(jìn)行測(cè)定，探討APN、Fig在絕經(jīng)期前后婦女水平的表達(dá)及二者關(guān)系，為今后的研究及臨床工作提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究人群選自 2009年10～11月于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院體檢中心體檢者。年齡40～65歲，女性，漢族，詳細(xì)的月經(jīng)史，可合并輕度高血壓(收縮壓SBP<160 mmHg和/或舒張壓DBP<100 mmHg) )和/或高血脂。排除患有女性生殖系統(tǒng)疾病、冠心病、糖尿病、肝腎功能不全、血液系統(tǒng)疾病、嚴(yán)重感染性疾病、惡性腫瘤、中風(fēng)、垂體瘤及甲狀腺疾病者。將研究對(duì)象按絕經(jīng)與否分為兩組：絕經(jīng)期前婦女組42例，年齡(44.12±3.28)歲；絕經(jīng)期后婦女組44例，年齡(56.67±4.35)歲。入選者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 體重指數(shù)(BMI)計(jì)算：受檢者空腹、免冠、脫鞋，僅穿單衣，測(cè)量凈身高(m)、體重(kg)，從而計(jì)算體重指數(shù)(BMI)=體重(kg)/身高(m)2。

1.2.2 Fig、生化指標(biāo)測(cè)定：所有入選者于體檢當(dāng)日，抽空腹外周靜脈血實(shí)驗(yàn)室化驗(yàn)血常規(guī)；Fig檢測(cè)采用Clouse法。同時(shí)以日立7170S自動(dòng)生化儀采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、尿素氮(Ure)、肌酐(Cre)、尿酸(UA)水平。

1.2.3 血漿APN測(cè)定：所有入選者在抽取上述空腹靜脈血標(biāo)本同時(shí)，留取2 mL靜脈血，以2%EDTA抗凝后離心3000 r/min 15 min，留取上清液血漿0.5 mL，放置-80℃冰箱保存，保存時(shí)間<3個(gè)月。采用美國Linco公司的放射免疫試劑盒，應(yīng)用放射免疫法測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 絕經(jīng)前后兩組間臨床資料的比較

86例體檢者身高、HDL-C、AST、ALT、Cre、UA、FPG、WBC方面，絕經(jīng)前組與絕經(jīng)后組比較，差異均無顯著性意義。而年齡、體重、WC、BMI、SBP、DBP、TC、TG、LDL-C、Ure、HB、APN、Fig兩組相比，差異有顯著性意義(P<0.05)。其中，絕經(jīng)前組血漿APN水平為(7.67±3.47)ng/mL，絕經(jīng)后組為(11.24±4.59)ng/mL，兩組差異有非常顯著性意義(P<0.01)。絕經(jīng)前組血漿Fig水平為(3.07±0.86)g/L，絕經(jīng)后組為(3.91±0.85)g/L，絕經(jīng)前組明顯低于絕經(jīng)后組，差異也有非常顯著性意義(P<0.01)。見表1。

2.2 絕經(jīng)前后是否合并高血壓分組比較結(jié)果

2.2.1 血漿APN按絕經(jīng)前后是否合并高血壓進(jìn)行分組比較：絕經(jīng)前未患高血壓者(n=31) APN水平為(8.44±3.46) ng/mL；絕經(jīng)前患高血壓者(n=11) APN水平為(4.23±2.31) ng/mL；絕經(jīng)后未患高血壓者(n=30) APN水平為(11.06±5.08)ng/mL；絕經(jīng)后患高血壓者(n=14) APN水平為(8.53±3.63) ng/mL；絕經(jīng)前、后患高血壓者APN水平均分別低于絕經(jīng)前、后未患高血壓患者，差異有顯著性意義(P<0.05)；絕經(jīng)前未患高血壓者APN水平低于絕經(jīng)后未患高血壓患者，差異也有顯著性意義(P<0.01)。同時(shí)，絕經(jīng)前患高血壓者APN水平低于絕經(jīng)后患高血壓者，差異有顯著性意義(P<0.05)。但是，絕經(jīng)前未患高血壓者APN水平與絕經(jīng)后患高血壓者差異無顯著性意義(P=1.1)。見圖1。

表1 絕經(jīng)前后兩組臨床及實(shí)驗(yàn)室資料

圖1 絕經(jīng)前后按有無高血壓分組比較血漿APN水平

1)與無高血壓組比較，P<0.05；2)與絕經(jīng)前無高血壓組比較，P<0.01；3)與絕經(jīng)前患高血壓組比較，P<0.05

2.2.2 Fig按絕經(jīng)前后是否合并高血壓進(jìn)行分組比較：絕經(jīng)前未患高血壓者(n=31) Fig水平為2.87±0.68 g/L；絕經(jīng)前患高血壓者(n=11) Fig水平為(3.18±0.96) g/L；絕經(jīng)后未患高血壓者(n=30) Fig水平為(3.79±0.74) g/L；絕經(jīng)后患高血壓者(n=14) Fig水平為(3.91±0.99) g/L；絕經(jīng)前未患高血壓Fig水平低于絕經(jīng)后患高血壓者及未患高血壓者，差異有顯著性意義(P<0.01)，同時(shí)絕經(jīng)前患高血壓者Fig水平低于絕經(jīng)后患高血壓者及未患高血壓者，差異有顯著性意義(P<0.05)，絕經(jīng)后患與未患高血壓者比較差異無顯著性意義(P=0.97)。

2.3 Pearson相關(guān)分析

2.3.1 APN與各檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)分析：以APN為因變量，多種檢測(cè)指標(biāo)如：年齡、身高、體重、WC、BMI、SBP、DBP、TC、TG、LDL-C、HDL-C、AST、ALT等為自變量，進(jìn)行Pearson相關(guān)分析。本研究顯示血漿APN水平與身高、SBP、DBP、AST、ALT、Ure、Cre、UA、HB無明顯相關(guān)性(P>0.05)，與體重、WC、BMI、TC、TG、LDL-C、FPG、WBC呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與Fig呈正相關(guān)(P<0.01)，與年齡、HDL-C呈正相關(guān)(P<0.05)。見表2。

2.3.2 Fig與各檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)分析：以Fig為因變量，多種檢測(cè)指標(biāo)如：年齡、身高、體重、WC、BMI、SBP、DBP、TC、TG、LDL-C、HDL-C、AST、ALT等為自變量，進(jìn)行Pearson相關(guān)分析。結(jié)果顯示Fig水平與年齡、身高、SBP、DBP、AST、ALT、TC、TG、HDL-C、LDL-C、Ure、Cre、UA、FPG、WBC、HB無明顯相關(guān)性(P>0.05)，與APN、體重、WC、BMI呈正相關(guān)(P<0.01)。見表3。

表2 APN與各變量的Pearson相關(guān)分析

表3 血漿Fig與各變量的Pearson 相關(guān)分析

2.4 多元逐步回歸分析

2.4.1 APN與各變量的多元逐步回歸分析：以APN為因變量，年齡、身高、體重、WC、BMI、SBP、DBP、TG、TC、HDL-C、LDL-C、FPG、AST、ALT、Ure、Cre、UA、WBC、HB、Fig為自變量進(jìn)行多元逐步回歸分析顯示，年齡、TG、FPG進(jìn)入APN的回歸方程，是影響血漿APN 的獨(dú)立因素。見表4。

2.4.2 Fig與各變量的多元逐步回歸分析：以Fig為因變量，年齡、身高、體重、APN、WC、BMI、SBP、DBP、TG、TC、HDL-C、LDL-C 、FPG、AST、ALT、Ure、Cre、UA、WBC、HB為自變量，進(jìn)行多元逐步回歸分析顯示，身高、BMI、HDL-C、LDL -C進(jìn)入Fig方程，是影響血漿Fig的獨(dú)立因素。見表5。

表4 APN與各變量的多元逐步回歸分析

表5 Fig與各變量的多元逐步回歸分析

3 討 論

APN是一種脂肪細(xì)胞分泌的特有細(xì)胞因子，1995年由Scherer等[1]在小鼠3T3脂肪細(xì)胞中首次發(fā)現(xiàn) ；Nakano等[2]提純出人血漿中的APN蛋白。自此人類APN的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、生理功能被廣泛研究。目前研究發(fā)現(xiàn)，APN在血液中大量存在，分泌無明顯的晝夜節(jié)律，不受進(jìn)餐的影響，一般男性APN水平低于女性。APN具有多種重要的生理功能：①增強(qiáng)游離脂肪酸氧化，增加葡萄糖攝取，抑制糖原分解[3]；②通過多種途徑抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗炎[4]；③參與多種腫瘤發(fā)生、發(fā)展[5,6]。

絕經(jīng)后婦女作為特殊群體，其MS、糖尿病、CHD、肥胖癥、癌癥等發(fā)病率均增高，是否與APN相關(guān)；APN是否參與絕經(jīng)后婦女疾病的發(fā)生、發(fā)展過程； APN水平的測(cè)定，能否為疾病的及早診治提供一種有效途徑；仍是目前亟待解決的問題。Chu等[7]在絕經(jīng)后MS婦女的IR及APN、廋素、抵抗素及生長素的測(cè)定研究中，發(fā)現(xiàn)與絕經(jīng)前對(duì)照組相比，絕經(jīng)后組婦女APN和生長素降低，而廋素和抵抗素升高。Jaak和Toivo[8]對(duì)150名女性，按年齡分組，研究APN濃度在健康絕經(jīng)期前后婦女水平的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)中年和老年絕經(jīng)后婦女高于中年絕經(jīng)期前婦女，差異有顯著性意義，中年和老年絕經(jīng)后婦女之間APN水平差異無顯著性意義。Gavrila A等[9]對(duì)121名婦女進(jìn)行研究，也得出結(jié)論，絕經(jīng)后婦女APN水平顯著升高，差異有顯著性意義。本研究對(duì)86名女性，按絕經(jīng)期分組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，絕經(jīng)前組APN水平低于絕經(jīng)后組APN水平，差異有顯著性意義(P<0.01)。該結(jié)論與多數(shù)國外學(xué)者研究一致。絕經(jīng)后婦女APN水平不下降反而升高，其升高的具體機(jī)制尚不清楚，但APN水平的升高對(duì)機(jī)體有一定的保護(hù)作用，APN是否在某種程度上延緩并相對(duì)降低了絕經(jīng)后期患病率，還有待于進(jìn)一步研究證實(shí)。

血漿APN的高低與高血壓的相關(guān)性一直是眾多學(xué)者的研究熱點(diǎn)，一直存有爭議?，F(xiàn)多數(shù)研究支持原發(fā)性高血壓(Essential hypertension，EH)患者APN水平減低的論點(diǎn)。Adamczak等[10]首次報(bào)道了APN與EH之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)EH患者APN水平明顯低于對(duì)照組，而且APN水平與收縮壓、舒張壓及平均動(dòng)脈壓呈負(fù)相關(guān)，認(rèn)為APN可能在EH的發(fā)病中起一定作用。而Mallamaci等[11]的研究認(rèn)為，高血壓患者APN水平并不降低，反而升高。本研究結(jié)果表明：絕經(jīng)前后合并高血壓者血漿APN水平均低于絕經(jīng)前后未患高血壓者，差異有顯著性意義(P均<0.05)，而絕經(jīng)前未患高血壓者低于絕經(jīng)后未患高血壓者，差異有顯著性意義(P<0.01)。同時(shí)，絕經(jīng)前患高血壓者低于絕經(jīng)后患高血壓者，差異有顯著性意義(P<0.05)，但是絕經(jīng)前未患高血壓者與絕經(jīng)后患高血壓者之間差異無顯著性意義(P=1.1)。雖然按絕經(jīng)前后婦女是否合并高血壓分組，產(chǎn)生了有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的P值，但Pearson相關(guān)分析顯示，血清APN水平與收縮壓、舒張壓無直線相關(guān)性，絕經(jīng)期前后婦女是較為特殊的一個(gè)群體，這一時(shí)期體內(nèi)多種激素水平發(fā)生變化，對(duì)血壓的影響因素也多種多樣，且入選者大多血壓控制穩(wěn)定，相對(duì)結(jié)果受到影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果尚不能說明APN與高血壓之間無相關(guān)性。針對(duì)絕經(jīng)前后合并高血壓與APN水平的分析，需要進(jìn)一步排除其他影響因素，擴(kuò)大樣本研究。

本研究顯示年齡是影響APN水平的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。APN與年齡呈正相關(guān)，這一結(jié)果與國外眾多學(xué)者研究相一致。Daimon M等[12]研究發(fā)現(xiàn)，血清脂聯(lián)素水平與年齡呈正相關(guān)(r=0.312，P<0.001)Jaak和Toivo[8]及Gavrila A等[9]針對(duì)絕經(jīng)期前后婦女APN水平研究中，也證實(shí)了年齡與APN水平呈正相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)前血漿APN水平低于絕經(jīng)后APN水平，絕經(jīng)后高APN水平可能是機(jī)體一種自我保護(hù)機(jī)制，為今后APN臨床應(yīng)用進(jìn)一步拓寬思路。

Fig是由肝細(xì)胞合成和分泌的重要凝血因子。血漿Fig含量、纖維蛋白單體聚合速率以及Fig分子活性增加均可引起血液流變學(xué)改變，從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化及心、腦血管疾病[13,14]。本研究發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)前血漿Fig水平低于絕經(jīng)后，血漿APN與Fig呈正相關(guān)。絕經(jīng)前后合并高血壓者血漿APN、Fig水平均低于未患高血壓者，無論是APN還是Fig均與SBP、DBP無明顯相關(guān)性。BMI、HDL-C、LDL-C是影響血清Fig的獨(dú)立因素，可能與Fig一并參與絕經(jīng)后婦女代謝性疾病的發(fā)生、發(fā)展。Fig可作為此類疾病的預(yù)測(cè)因子。

本文的研究也有很多局限，主要有以下幾個(gè)方面：(1)樣本數(shù)量相對(duì)少，可能影響結(jié)果的判斷。(2)未檢測(cè)雌、孕激素、雄激素水平，未能分析血漿APN及Fig與絕經(jīng)期前后婦女體內(nèi)激素水平的相關(guān)性。今后將進(jìn)一步進(jìn)行該方面的深入研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] Scherer PE，Williams S，F(xiàn)ogliano M，et al．A novel serum protein similar to C1q， produced exclusively in adipocytes[J]．J Biol Chem，1995，270(45)：26746-26749．

[2] Nakano Y，Tobe T，ChoMiiura NH，et al． Isolation and characterization of GBP28，a novel gelatin-binding protein purified from human plasma[J].J Biochem，1996，120 (4)：803-812．

[3] Yoon YS，Ryu D，Lee MW，et al．Adiponectin and thiazolidinedione targets CRTC2 to regulate hepatic gluconeogenesis[J]．Exp Mol Med，2009，4l(8)：577-583．

[4] Cai XJ，Chen L，Li L，et al．Adiponectin inhibits lipopolysaccaride-induced adventitial fibroblast migration and transition to myofibroblasts via AdipoRl-AMPK-iNOS pathway[J]．Mol Endocrinol，2010，24(1)：218-228．

[5] Petridou ET，Mitsiades N， Gialamas S，et al．Circulating adiponectin levels and expression of adiponectin receptors in relation to lung cancer：two case-control studies[J]. Oncology，2007，73(3-4)：261-269．

[6] Dos Santos E，Benaitreau D，Dieudonne MN，et al．Adiponectin mediated an antiproliferative response in human MDA-MB 231 breast cancer cells[J]. Oncol Rep，2008，20(4)：971-977．

[7] Chu MC，Cosper P， Orio F，et al．Insulin resistance in postmenopausal women with metabolic syndrome and the measurments of adiponectin，leptin， resistin， and ghrelin[J]． Am J Obstet Gynecol，2006，194(1)：100-104．

[8] Jaak Jürim?e， Toivo jürim?e．Plasma adiponectin concentration in healthy pre-and post menopausal women：relationship with body composition，bone mineral，and metabolic variables[J]．Am J Physiol Endocrinol Metab， 2007,293(1)：E42- E47.

[9] Gavrila A，Chan JL，Yiannakouris N，et al． Serum adiponectin levels are inversely associated with overall and central fat distribution but are not directly regulated by acute fasting or leptin administration in humans： cross-sectional and interventional studies[J]．J Clin Endocrinol Metab，2003，88(10)：4823-4831．

[10] Adamczak M，Wiecek A，F(xiàn)unahashi T，et al．Decreased plasma adiponectin concentration in patients with essential hypertension[J]．Am J Hypertens，2003， 16(1)：72-75．

[11] Mallamaci F，Zoccali C，Cuzzola F，et al． Adiponectin in essential hypertension[J]．J Nephrol，2002，15(5)：507-511．

[12] Daimon M，Oizumi T，Saitoh T， et al．Decreased serum levels of adiponectin are a risk factor for the progression to type 2 diabetes in the Japanese Population： the Funagata study[J]．Diabetes Care，2003，26(7)：2015-2020．

[13] Gao Jie, Zhao Feng-zhen,Zhang Jun-ling,et al.Relationship between Simple Obesity and Fibrinogen,Bβ448 G/A Gene Polymorphism in Children [J]．J Appl Clin Pediatr，2008，23(19)：1491-1493．

[14] Keller MA， Martinez J，Baradet TC，et al．Fibrinogen Philadelphia, a hypodysfibrinogenemia characterized by abnormal polymerization and fibrinogen hypercatabolism due to gamma S378P mutation [J]．Blood，2005，105(8)：3162-3168．