藜蘆胺降壓作用的實(shí)驗(yàn)研究

王 清 李 偉 楊 銘 陳穎麗 張殿文 李明愛(ài)

(吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥藥理所，吉林 長(zhǎng)春 130012)

藜蘆主要化學(xué)成分為藜蘆生物堿，藜蘆生物堿對(duì)多種麻醉動(dòng)物均有明顯而持久的降壓作用，且無(wú)快速耐受現(xiàn)象，對(duì)腎性高血壓犬和高血壓家兔亦有顯著的降壓作用。其降壓機(jī)制主要是作用于頸動(dòng)脈竇及心肺感受區(qū)，經(jīng)竇神經(jīng)及迷走傳入纖維反射性地抑制血管運(yùn)動(dòng)中樞，引起血壓下降;離體兔耳及貓后肢灌流實(shí)驗(yàn)表明其無(wú)直接擴(kuò)張血管作用〔1〕。藜蘆共有8個(gè)品種，本研究所用藜蘆為百合科(liliaceae)植物黑藜蘆(veratrum nigrum L.)的干燥根及根莖，此為正品。本研究前期報(bào)道黑藜蘆生物堿對(duì)正常貓、自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)和腎性高血壓大鼠均有明顯的降壓和減慢心率作用，其降壓作用與劑量呈正相關(guān)，并具有降壓明顯、作用溫和及持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)。在降壓的同時(shí)，未見(jiàn)明顯的副作用，反復(fù)給藥無(wú)快速耐受性〔2〕。本文就近期從黑藜蘆總生物堿中提取分離出的藜蘆胺單體降壓作用進(jìn)行系統(tǒng)的分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 Wistar大鼠，體重180～190 g，雄性，購(gòu)自吉林省藥品檢驗(yàn)所，合格證號(hào):10-5113;SHR大鼠，體重150～250 g，雌雄各半，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào):京2002-2003。貓，體重2.5～3.6 kg，雌雄各半，市售。

1.1.2 藥物 藜蘆胺，由本院植化室提供，批號(hào):030904。實(shí)驗(yàn)前用吐溫-80配成適宜濃度的混懸液，置4℃冰箱保存?zhèn)溆?。?yáng)性對(duì)照藥司樂(lè)平，哈藥集團(tuán)三精制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào):0301183。吐溫-80，上海三浦化工有限公司生產(chǎn)，批號(hào):20030419。烏拉坦，中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司生產(chǎn)，批號(hào):20021104;鹽酸氯胺酮注射液，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào):KH20011;地西泮(安定)注射液，上海旭東海普藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào):031101;丙二醇，北京化工廠(chǎng)生產(chǎn)，批號(hào):20030323。

1.1.3 儀器 BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，成都泰盟科技有限公司;RBP-1型大鼠血壓計(jì)，中日友好臨床醫(yī)學(xué)研究所。

1.2 方法

1.2.1 對(duì)正常貓血壓的監(jiān)測(cè) 采用頸動(dòng)脈直接測(cè)壓法〔3〕，取健康貓30只，隨機(jī)等分5組，每組6只。將動(dòng)物以20%烏拉坦1 g/kg腹腔注射麻醉，仰位固定手術(shù)，暴露左頸總動(dòng)脈，左頸總動(dòng)脈插管并連接于PT14M2型壓力傳感器上。借助于JH-2型肌張力換能傳感器連于貓胸廓呼吸明顯處記錄呼吸;四肢連接心電導(dǎo)線(xiàn)，以上信號(hào)通過(guò)BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)同步記錄。術(shù)畢穩(wěn)定30 min后，測(cè)給藥前血壓正常值，然后十二指腸一次給予藜蘆胺 1.0、0.5、0.25 mg/kg，陽(yáng)性對(duì)照組予司樂(lè)平0.156 mg/kg，空白對(duì)照組給予丙二醇溶液，體積均為5 ml/kg。記錄給藥前及給藥后15～150 min的收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、平均壓(MP)、心率(HR)和呼吸的變化。

1.2.2 SHR血壓監(jiān)測(cè) 采用尾動(dòng)脈間接測(cè)壓法〔3〕，取SHR 50只，于實(shí)驗(yàn)前1 w每日定時(shí)測(cè)量尾動(dòng)脈SBP 1次，取其平均值作為藥前值。按SBP水平、體重隨機(jī)分為五組，每組10只，第一組為高血壓模型組，給予蒸餾水;第二組為陽(yáng)性對(duì)照藥組，給予司樂(lè)平0.36 mg/kg;第三、四、五組分別給予藜蘆胺2.24、1.12、0.56 mg/kg，灌胃給藥，體積均為20 ml/kg。分別于藥后0.5、1、1.5、2、3、4、6、8 h 以 RBP-1 型大鼠血壓計(jì)各測(cè)量血壓1 次。

1.2.3 對(duì)結(jié)扎腎動(dòng)脈所致腎性高血壓大鼠血壓的影響 采用尾動(dòng)脈間接測(cè)壓法〔3〕，取Wistar大鼠，將每只大鼠置于RBP-1型大鼠血壓儀中，測(cè)其清醒時(shí)正常尾動(dòng)脈SBP，連續(xù)測(cè)3次，取其平均值作為正常值。制備腎性高血壓大鼠〔3〕，以安定5 mg/kg和氯胺酮50 mg/kg混合劑腹腔注射麻醉。將動(dòng)物側(cè)臥位固定，剪去腹部手術(shù)部位皮毛，皮膚消毒后，于側(cè)腹部正中切開(kāi)皮膚及肌層，暴露左腎，于腎門(mén)處小心分離腎動(dòng)脈，用內(nèi)徑0.2 mm的銀夾夾閉腎動(dòng)脈，右腎不觸及。術(shù)后4 w測(cè)SBP 1次，以SBP升高4 kPa以上者作為腎血管性高血壓大鼠模型。取合格高血壓大鼠45只，隨機(jī)等分五組，模型對(duì)照組給予蒸餾水;陽(yáng)性藥對(duì)照組給予司樂(lè)平0.36 mg/kg;藜蘆胺2.24、1.12、0.56 mg/kg組，灌胃給藥，1次/d，連續(xù) 8 d，給藥體積均為20 ml/kg。給藥后第 1、2、4、6、8 天測(cè) SBP 和 HR。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)及χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)正常貓血壓的影響 藜蘆胺對(duì)正常貓的SBP、MP、DBP均有明顯的降低作用，于藥后30 min起效，并可持續(xù)作用150 min以上。對(duì)心率亦有一定的降低作用，但無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;同時(shí)可明顯減慢呼吸頻率，但對(duì)呼吸幅度無(wú)明顯影響，其降壓作用強(qiáng)度隨給藥劑量的增加而增強(qiáng)。藜蘆胺大、中劑量組的降壓作用強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間與司樂(lè)平作用相近或略強(qiáng)，后者在降壓的同時(shí)略有加快心率的作用。見(jiàn)表1～表3。

2.2 對(duì)SHR血壓的影響 藜蘆胺大、中劑量組對(duì)SHR動(dòng)脈SBP于給藥后1.5 h有明顯的降壓作用。同時(shí)可明顯減慢心率;司樂(lè)平于藥后0.5～6 h均有明顯的降壓作用，對(duì)心率有一定的加快作用，其降壓作用及持續(xù)時(shí)間均強(qiáng)于藜蘆胺，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表4。

2.3 對(duì)腎性高血壓大鼠血壓的影響 藜蘆胺于每日給藥后1～8 d內(nèi)，對(duì)腎性高血壓大鼠均有明顯降低SBP和減慢HR的作用，其降壓作用隨給藥劑量的增加而增強(qiáng);而陽(yáng)性對(duì)照藥司樂(lè)平在降低血壓的同時(shí)，尚可明顯加快HR，且后者的降壓作用強(qiáng)于藜蘆胺。見(jiàn)表5。

表1 藜蘆胺對(duì)正常貓SBP的影響(x ±s，n=6，k Pa)

表2 藜蘆胺對(duì)正常貓DBP的影響(x ±s，n=6，kPa)

表4 藜蘆胺對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠SBP的影響(x ±s，n=10，k Pa)

表5 藜蘆胺對(duì)腎性高血壓大鼠SBP的影響(x ± s，n=9，kPa)

3 討論

高血壓是中、老年人多發(fā)病、常見(jiàn)病，同時(shí)也是心、腦血管疾病的主要誘發(fā)因素之一。現(xiàn)已位于各種疾病引起死亡的第3位，已被醫(yī)學(xué)界稱(chēng)為人類(lèi)的第一殺手。據(jù)2004年我國(guó)衛(wèi)生組織初步調(diào)查統(tǒng)計(jì)，我國(guó)高血壓患者已超過(guò)1.35億，且每年呈上升趨勢(shì)。因此，降壓藥物的篩選和開(kāi)發(fā)研究具有重要現(xiàn)實(shí)意義。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藜蘆胺對(duì)正常貓、SHR和腎性高血壓大鼠均有明顯的降壓作用，并可減慢心率，特別是對(duì)高血壓模型動(dòng)物作用良好，對(duì)于指導(dǎo)臨床應(yīng)用具有實(shí)際價(jià)值，且具有降壓作用緩和與持久的特點(diǎn)。陽(yáng)性對(duì)照藥司樂(lè)平雖降壓作用強(qiáng)而持久，但同時(shí)存在著一過(guò)性低血壓及加快心率的不足。研究證明，黑藜蘆生物堿對(duì)正常貓、SHR和腎性高血壓大鼠亦有明顯的降壓和減慢心率作用〔2〕。由此可見(jiàn)，藜蘆胺具有與藜蘆生物堿相似或相近的藥理活性，提示其可能是藜蘆生物堿降壓作用的主要有效成分之一。因此，通過(guò)進(jìn)一步系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究，將藜蘆胺開(kāi)發(fā)研制成新型降壓藥物具有良好的前景。

1 王本祥.新編中藥學(xué)辭典〔M〕.天津:天津科學(xué)技術(shù)出版社，1996:1363-4.

2 李 偉，楊 銘，王 清，等.藜蘆堿降壓作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中華現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)雜志，2006;2(4):292-6.

3 徐叔云，卞如濂.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)〔M〕.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1991:804-17.