角蛋白19表達(dá)與前列腺癌Gleason分級、PSA水平及預(yù)后的關(guān)系研究

(南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院，湖南衡陽421001)

目前，前列腺癌發(fā)病和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制還不清楚，因此，尋找前列腺癌的生物標(biāo)記物對于其早期診斷、臨床分期和預(yù)后判斷具有重要意義。角蛋白19(CK19)的表達(dá)隨上皮細(xì)胞的類型、分化程度及組織的發(fā)育狀況不同而改變，其與細(xì)胞增殖、分化、侵襲轉(zhuǎn)移及細(xì)胞周期等有關(guān)［1，2］。本研究旨在討論CK19在前列腺癌中的表達(dá)及其與Gleason分級、前列腺特異性抗原(PSA)水平及臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 所有標(biāo)本來自2006～2010年南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院，74例前列腺癌根治術(shù)標(biāo)本或穿刺標(biāo)本，術(shù)前未進(jìn)行任何放療、化療及內(nèi)分泌治療。標(biāo)本采用10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，作4 μm厚切片。25例良性前列腺增生標(biāo)本作為對照組。SP免疫組化試劑盒為福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司產(chǎn)品，CK19兔抗人單克隆抗體購自美國Santa Cruz公司。

1.2 方法

1.2.1 Gleason分級 所有前列腺癌標(biāo)本采用Gleason評分體系進(jìn)行評分［3］，由兩位病理醫(yī)生獨(dú)立作出診斷，意見不一致的最后再閱片會診。評分標(biāo)準(zhǔn)如下:Gleason 2～4分高分化;Gleason 5～7分中分化;Gleason 8～10分低分化。

1.2.2 免疫組織化學(xué) 免疫組織化學(xué)染色采用SP法進(jìn)行，按照試劑說明書進(jìn)行。CK19一抗?jié)舛葹?∶100。結(jié)果判斷:CK19免疫反應(yīng)陽性物質(zhì)主要在胞質(zhì)和胞膜表達(dá)，根據(jù)切片的染色強(qiáng)度分為:無色，陰性;淺黃色，弱陽性;棕黃色，陽性;棕褐色，強(qiáng)陽性。陽性率=(弱陽性+陽性+強(qiáng)陽性)/總例數(shù)×100%。

1.2.3 PSA檢測 所有病例在本院門診行PSA濃度檢測，采用LEIA化學(xué)法，取100 μl待測樣品在全自動化學(xué)發(fā)光分析儀上自動完成檢測。

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，兩兩比較采用t檢驗，兩者以上之間比較采用ANOVA，以P≤0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 基本資料PSA＜10 ng/ml、10～20 ng/ml、＞20 ng/ml的前列腺癌患者比例分別為32.4%(24/74)、41.9%(31/74)和25.7%(19/74)。74例前列腺癌患者，Gleason評分2～4分占29.7%(22/74)，Gleason評分5～7分48.6%(36/74)，Gleason評分8～10分21.6%(16/74)。

2.2 CK19的表達(dá) CK19在前列腺癌中的陽性率是77.0%(57/74)，在良性前列腺增生中是12.0%(3/25)，P＜0.05。

2.3 CK19表達(dá)與Gleason分級的關(guān)系 CK19在Gleason評分為2～4分、5～7分、8～10分中的陽性率分別為50.0%(11/22)、86.1%(31/36)和93.8%(15/16)，隨著Gleason評分的升高，CK19表達(dá)增加(P＜0.05)。

2.4 CK19表達(dá)與PSA水平的關(guān)系 CK19陽性率在PSA 水平為＜10 ng/ml、10～20 ng/ml、＞20 ng/ml中的陽性率分別為45.8%(11/24)、90.3%(28/31)和94.7%(18/19)，隨著PSA水平增高的增加，CK19表達(dá)增加(P＜0.05)。

2.5 CK19表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 CK19表達(dá)與臨床分期、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)，與年齡無關(guān)(P＞0.05)。

3 討論

CK19是細(xì)胞角蛋白家族中最小的成員之一，廣泛分布于正常組織的表面。CK19與細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖、分化及腫瘤在侵襲轉(zhuǎn)移等有關(guān)［4～6］。CK19在甲狀腺癌、乳腺癌、肺癌和肝癌等腫瘤中都有不同程度的表達(dá)［7～9］。本研究中發(fā)現(xiàn)，CK19在前列腺癌中的陽性率明顯高于良性前列腺增生，說明CK19與前列腺癌的發(fā)生有關(guān)。

Gleason評分是國際上評價前列腺癌分化、惡性程度和預(yù)后的主要標(biāo)準(zhǔn)。Gleason評分為2～4分、5～7分、8～10分，分別代表高分化、中分化、低分化的前列腺癌。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著Gleason評分的增加，前列腺癌分化越差，CK19表達(dá)增加，說明CK19表達(dá)與前列腺癌分化有關(guān)，可作為前列腺癌Gleason分級的預(yù)測指標(biāo)之一。檢測CK19表達(dá)水平對于判斷前列腺癌的惡性程度及預(yù)后具有一定參考價值。PSA是一種只由前列腺上皮細(xì)胞產(chǎn)生的酶，臨床上作為前列腺癌的診斷指標(biāo)之一。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著PSA水平的增高，CK19表達(dá)增加，CK19表達(dá)與PSA水平呈正相關(guān)。因此，聯(lián)合檢測CK19和PSA水平，可為前列腺癌的早期診斷提供有意義的臨床依據(jù)。他們之間是否存在著更加密切作用機(jī)制，尚需要進(jìn)一步實驗研究。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)CK19表達(dá)與臨床分期、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。說明CK19表達(dá)能作為臨床上前列腺癌預(yù)后判斷的指標(biāo)之一。因此，臨床上檢測CK19表達(dá)對于前列腺癌的Gleason分級、PSA水平及預(yù)后判斷具有一定的參考意義，進(jìn)一步研究CK19在前列腺癌發(fā)病中的分子機(jī)制很有必要。

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