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    綠色分子印跡技術(shù)簡(jiǎn)論

    2011-04-10 21:19:16張孝剛朱秋勁
    化學(xué)研究 2011年4期
    關(guān)鍵詞:水相印跡單體

    張孝剛,朱秋勁,2*

    (1.貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,貴州貴陽550025; 2.貴州大學(xué)食品科學(xué)工程研究中心,貴州貴陽550025)

    綠色分子印跡技術(shù)簡(jiǎn)論

    張孝剛1,朱秋勁1,2*

    (1.貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,貴州貴陽550025; 2.貴州大學(xué)食品科學(xué)工程研究中心,貴州貴陽550025)

    解析了綠色分子印跡技術(shù)(GMIT)的概念;結(jié)合水相和其他新型分子印跡技術(shù)、聚合物輔助設(shè)計(jì)及新型原材料的發(fā)展,簡(jiǎn)要闡述 GMIT的發(fā)展動(dòng)向.指出在綠色化學(xué)日益深入人心的今天,有必要深入探索和發(fā)展綠色分子印跡技術(shù),從而拓展分子印跡技術(shù)研究領(lǐng)域、促進(jìn)綠色化學(xué)的發(fā)展.

    綠色化學(xué);分子印跡技術(shù);簡(jiǎn)論

    20世紀(jì)以來,化學(xué)工業(yè)的迅猛發(fā)展給人類帶來了巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益,但能源、資源危機(jī),環(huán)境污染等問題也隨之日趨加劇.可持續(xù)發(fā)展更成為實(shí)現(xiàn)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)和環(huán)境轉(zhuǎn)變的必然目標(biāo).1991年綠色化學(xué)首先由美國(guó)化學(xué)會(huì)提出,并成為美國(guó)國(guó)家環(huán)保局的中心口號(hào)[1].2010年6月中國(guó)化學(xué)會(huì)第27屆學(xué)術(shù)年會(huì),綠色化學(xué)作為一個(gè)分會(huì)場(chǎng),以可持續(xù)發(fā)展的綠色化學(xué)與技術(shù)為主題,推行綠色反應(yīng)物,綠色催化、合成和原子經(jīng)濟(jì)性.綠色化學(xué)在全世界成為了一項(xiàng)戰(zhàn)略性任務(wù).然而,分子印跡技術(shù)(MIT)是集高分子化學(xué)、生物化學(xué)等學(xué)科為一體的邊緣科學(xué),屬于超分子化學(xué)研究范疇[2].發(fā)展至今,在分子印跡聚合物(MIPs)制備過程中,無論是原料的選擇、利用率,還是有害原材料殘留對(duì)生態(tài)環(huán)境的影響等各方面都還不曾提到綠色化學(xué)層面上來.同時(shí),MIT在現(xiàn)代生物化工領(lǐng)域的應(yīng)用[3]也缺乏對(duì)聚合物安全性的評(píng)價(jià),影響了MIT在醫(yī)藥、食品等方面的應(yīng)用.但不少研究具備綠色化學(xué)的特點(diǎn),而且聚合物安全性隨著其應(yīng)用的推廣急需評(píng)價(jià).因此,推廣綠色化學(xué)的今天,對(duì)綠色分子印跡技術(shù)的思考與探索,進(jìn)行MIPs應(yīng)用安全性評(píng)價(jià)十分必要.

    在此,作者力求解析綠色分子印跡的概念,并結(jié)合水相和其他新型印跡技術(shù)、聚合物輔助設(shè)計(jì),以及新型原材料的發(fā)展對(duì)綠色分子印跡及其發(fā)展動(dòng)向進(jìn)行闡述.為MIT融入綠色化學(xué),成為一項(xiàng)應(yīng)用廣泛、高效、無污染的安全新技術(shù)提供新的發(fā)展思路.

    1 綠色分子印跡技術(shù)的概念

    綠色分子印跡技術(shù)(GMIT)廣義上指:分子印跡技術(shù)的“綠色化”.就是應(yīng)用化學(xué)原理研究新的化學(xué)工藝,從源頭消除有毒、有害物質(zhì),減少有毒有害物質(zhì)的產(chǎn)生,提高M(jìn)IPs的安全性,保持環(huán)境清潔,改善生態(tài)環(huán)境,提高原料利用率,合理、高效地利用資源和能源,實(shí)現(xiàn)原子經(jīng)濟(jì)性和可持續(xù)發(fā)展.GMIT狹義上是指:采用無毒害安全的功能單體、交聯(lián)劑、致孔劑和溶劑等,利用科學(xué)的方法研究最佳反應(yīng)物的種類和配比,防止有毒有害物質(zhì)產(chǎn)生,廉價(jià)、高效和安全地制備在空間結(jié)構(gòu)和結(jié)合位點(diǎn)上與某一模板分子完全匹配聚合物的實(shí)驗(yàn)技術(shù).

    綠色化學(xué)是一種有原則的利用,研究的主要問題是綠色化學(xué)的12項(xiàng)原則[4],主要是從源頭制止污染,避免產(chǎn)生有害物質(zhì),減少副產(chǎn)品,提高原料利用率,開發(fā)新型可再生、安全的原材料;保護(hù)生態(tài)和環(huán)境,實(shí)現(xiàn)原子經(jīng)濟(jì)性和可持續(xù)發(fā)展.而MIT從1972年Wulff等[5]首次成功制得MIPs以來,對(duì)MIT的作用機(jī)理、制備方法、印跡條件等的探索都取得了突破性的進(jìn)展,MIT技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于色譜、固相萃取、化學(xué)仿生傳感器和醫(yī)藥等領(lǐng)域.但在MIPs的制備過程中,對(duì)功能單體、交聯(lián)劑、溶劑等的種類和用量的選擇,試劑利用率、最終聚合物得率和吸附效率的評(píng)價(jià)都還不能準(zhǔn)確預(yù)測(cè).大多數(shù)是通過物質(zhì)類比或在前人基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化制備MIPs,耗費(fèi)大量的人力和物力,最終聚合物的產(chǎn)率低、成本高.此外,MIPs制備中常用的試劑如甲基丙烯酸(MAA)、偶氮二異丁腈(ABIN)、三氯甲烷等也是有毒或有害的,其殘留對(duì)環(huán)境和人類健康帶來了嚴(yán)重的危害.因此,發(fā)展GMIT要遵循綠色化學(xué)研究的12項(xiàng)原則,將GMIT融入綠色化學(xué).擺脫傳統(tǒng)的研究模式,引入食品及醫(yī)藥領(lǐng)域中的安全性評(píng)價(jià)體系,開展MIPs的安全性評(píng)價(jià),為該項(xiàng)技術(shù)的發(fā)展鋪設(shè)一條新的道路.

    2 GMIT發(fā)展現(xiàn)狀

    MIT從小分子到納米尺寸生物大分子(蛋白質(zhì)分子),再到細(xì)菌[6]等更大分子的挑戰(zhàn)中,尋找一種快速、高效的制備方法或理論、安全而廣泛地應(yīng)用是共同的愿望.目前還未有GMIT的直接報(bào)道,而從眾多的研究資料中可凝煉出其發(fā)展蹤跡.

    2.1 印跡技術(shù)

    如今多數(shù)MIPs的制備很大程度上還局限在有機(jī)相中,而MIPs實(shí)際應(yīng)用面臨的天然識(shí)別系統(tǒng)多是水相體系[7],且有機(jī)溶劑資源有限,成本高,個(gè)別還有毒害作用.開發(fā)廣泛適用、安全的新技術(shù)十分必要.

    2.1.1 水相分子印跡

    近年來,水相分子印跡的研究不斷涌現(xiàn),賴家平等[8-9]在水中利用抗菌藥甲氧芐氨嘧啶(TMP)和帶有羧基的酸性藥物吲哚美辛為模板分子制備聚合物微球,利用 HPLC進(jìn)行表征,分析其作用機(jī)理,該方法在一定程度上具有通用性.Asanuma H等[10]利用功能單體和模板在疏水相互作用下“預(yù)組織”,通過制得的環(huán)糊精(CyD)烯類單體化合物與模板(萬古霉素等)反應(yīng)制得印跡CyD高聚物.其K值是非印跡高聚物的近3倍,CyD在水中的印跡有效地加強(qiáng)了對(duì)模板分子的鍵合性質(zhì).同時(shí),將乙烯基化硅膠分散到丙烯?;腃yD和模板分子二肽(L-Phe-L-Phe或D-Phe-D-Phe)的混合液中,制得MIPs與無模板高聚物相比,保留時(shí)間延長(zhǎng)1~2 min[11].此外 Kubo[12]、蘇立強(qiáng)[13]等均成功地在水相中制備了高選擇性MIPs.

    水作為溶劑具有安全無污染、來源廣泛、可再生,且成本低廉,適合于天然生物識(shí)別系統(tǒng).在實(shí)際應(yīng)用中,如固相萃取(對(duì)酚及其衍生物進(jìn)行印跡和分析[14],對(duì)河水除草劑污染的印跡分析[15])、色譜固定相[16]、藥物控釋及新藥開發(fā)[17-18]等都取得了較多成果.這為水相分子印跡技術(shù)的進(jìn)一步探索和推廣打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ).

    2.1.2 其他印跡技術(shù)

    除水相分子印跡外,表面分子印跡技術(shù)[19]、分子印跡膜技術(shù)[20]、溶膠-凝膠印跡技術(shù)[21-22]等不斷涌現(xiàn).它們?cè)诓煌潭壬辖柚枘z、殼聚糖[23]、環(huán)糊精[21]及其衍生物為母板、載體或功能單體,或利用溶膠-凝膠過程,表面改性、修飾形成功能性結(jié)合基團(tuán)來制備MIPs.由于硅膠、殼聚糖、環(huán)糊精等具有良好的生物相容性或血液相容性[24-25]、可降解、價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn);尤其具有高安全性,不會(huì)對(duì)人體和生態(tài)環(huán)境帶來危害;與水也有良好相溶性,可應(yīng)用于水相印跡聚合物的制備、檢測(cè),以及醫(yī)藥等領(lǐng)域,前景廣闊.此外,也有報(bào)道[26]利用廉價(jià)、安全的超臨界二氧化碳作為一種“綠色溶劑”,將相轉(zhuǎn)化法和MIT相結(jié)合制備分子印跡膜.這些技術(shù)的出現(xiàn),大大提高了MIT的安全性和應(yīng)用領(lǐng)域,適于發(fā)展 GMIT.

    水相分子印跡技術(shù)為MIT在天然生物系統(tǒng)中的應(yīng)用提供依據(jù).避免了大量有機(jī)溶劑的使用.表面分子印跡技術(shù)、溶膠-凝膠印跡技術(shù)等與水相分子印跡結(jié)合[10-11],利用安全的綠色原材料作為印跡載體或單體.這些技術(shù)提高了MIT的經(jīng)濟(jì)性、安全性,擴(kuò)大了其應(yīng)用領(lǐng)域,是增進(jìn) GMIT和綠色化學(xué)發(fā)展的一大舉措.

    2.2 輔助設(shè)計(jì)MIPs

    綠色化學(xué)推行向原子經(jīng)濟(jì)性發(fā)展.但目前在針對(duì)具體模板分子制備MIPs時(shí),眾多方法選擇材料和用量通常是靠經(jīng)驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)類推,利用重復(fù)試驗(yàn)來優(yōu)化聚合條件,缺乏科學(xué)理論指導(dǎo).造成了巨大的人力、物力和時(shí)間浪費(fèi),最終聚合效率一般低于50%[27];只有少數(shù)報(bào)道具有較高聚合效率,如:Yilmaz等利用C4-二氧化硅粒子支持來獲取二氧化硅-MIP復(fù)合材料,可達(dá)到90%[28].試劑的流失,對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康帶來了嚴(yán)重的危害.輔助設(shè)計(jì)技術(shù)輔助合成MIPs,可取代部分常規(guī)實(shí)驗(yàn)嘗試,大大減少實(shí)驗(yàn)次數(shù),減少不必要的試劑和人工消耗,提高M(jìn)IPs親和性、選擇性和得率等.

    2.2.1 組合分子印跡技術(shù)[29]

    在MIPs制備過程中采用控制液體量程序化技術(shù),可以在較短的時(shí)間內(nèi)優(yōu)化單體的種類和比例制備具有高選擇性的多種模板MIPs,提高制備和篩選高選擇性MIPs的速度,可為制備大量高選擇性的MIPs提供一個(gè)最佳配方,提高印跡效率和原材料利用率,如史瑞雪等[30]將組合化學(xué)和原位聚合技術(shù)聯(lián)用,一周內(nèi)可對(duì)25個(gè)MIPs進(jìn)行制備和篩選.

    2.2.2 分子模擬設(shè)計(jì)和優(yōu)化

    對(duì)模板分子應(yīng)用分子模擬軟件篩選功能單體、設(shè)計(jì)MIPs,與實(shí)驗(yàn)合成的MIPs的特性有良好的正相關(guān)性.Gaussian軟件可在氣相和液相條件下,預(yù)測(cè)分子的能量、結(jié)構(gòu)、熱化學(xué)性質(zhì)、成鍵和化學(xué)反應(yīng)的能量等[31].李元宗等[32-33]利用Gaussian 94對(duì)模板和單體間的結(jié)合能進(jìn)行計(jì)算,選擇功能單體和溶劑,預(yù)測(cè)對(duì)目標(biāo)分子的親和性和選擇性.在煙酰胺、異煙酰胺和茶堿的MIPs制備中,通過 HPLC表征顯示出了較高的結(jié)合能和容量因子;通過色差計(jì)算,證明該方法可以用于單體的選擇.武利慶等[31,34]應(yīng)用 Gaussian 03軟件對(duì)預(yù)組裝體系通過熱力學(xué)原理計(jì)算機(jī)模擬,考察功能單體、交聯(lián)劑和助溶劑的濃度對(duì)模板-功能單體復(fù)合物濃度的影響,理論上計(jì)算了聚合物的最佳反應(yīng)條件.指出計(jì)算模擬解決模板、功能單體、交聯(lián)劑和溶劑的復(fù)雜預(yù)組裝體系熱力學(xué)平衡是可行的,可在更加接近真實(shí)合成條件下優(yōu)化各種組分的用量,預(yù)測(cè)MIPs的親和性和選擇性.此外,在拆分色氨酸甲酯過程中,為證實(shí)其印跡機(jī)理,Yoshida等[35]利用 Hyper Chem軟件對(duì)色氨酸甲酯-苯基磷酸十二烷基酯配合物進(jìn)行了分子力學(xué)(MM)和分子動(dòng)力學(xué)(MD)計(jì)算,得到了油-水界面上模板-單體結(jié)合形態(tài)的模型,與紅外光譜和1H NMR實(shí)測(cè)結(jié)果相吻合.

    2.2.3 其他設(shè)計(jì)技術(shù)

    Sherrington等[36]提出的聚合物準(zhǔn)相圖,可以通過調(diào)整聚合體系中致孔劑及交聯(lián)劑的含量與比例來制備不同形態(tài)的聚合物.Farrington等[37]在合成水相萃取咖啡因的MIPs過程中,利用分子模型關(guān)聯(lián)核磁共振滴定實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)模板與功能單體的摩爾比,選擇溶劑及其用量,得到了模板與功能單體在預(yù)聚物中的熱力學(xué)穩(wěn)定信息.Chianella等[38]還利用自行開發(fā)的一種基于LEAPFROGTM算法的分子模型,選擇可以與模板分子abacavir(一種 HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑)實(shí)現(xiàn)高度親和的三種功能單體,在充分考慮水環(huán)境的影響因素條件下,得到的MIPs結(jié)合量最高可達(dá)157 mg/g,適合于工業(yè)應(yīng)用.

    分子印跡過程中各單體、交聯(lián)劑、致孔劑的種類和濃度嚴(yán)重影響MIPs結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合能力、表面形態(tài)、選擇性和出現(xiàn)相分離的時(shí)間[22].輔助設(shè)計(jì)MIPs,是利用程序化方法或從理論上對(duì)MIPs進(jìn)行設(shè)計(jì),科學(xué)地分析各原材料的種類和比例,充分考慮各物質(zhì)之間的作用位點(diǎn),更加理性地設(shè)計(jì)聚合物.利用最少的原料快速地合成高選擇性、高親和性的MIPs,研究其識(shí)別機(jī)理.對(duì)提高原料利用率,實(shí)現(xiàn)原子經(jīng)濟(jì)性、保護(hù)生態(tài)環(huán)境等均有很好的指導(dǎo)作用.是發(fā)展GMIT的重要理論.

    2.3 新型印跡材料的發(fā)展

    在探索MIT機(jī)理和技術(shù)的同時(shí),一些新型安全的印跡原料也逐漸豐富,除上面所用的硅膠、殼聚糖、環(huán)糊精外,近年還開發(fā)出了多種水相分子印跡單體和交聯(lián)劑[7],單體如:2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙烷磺酸、甲基丙烯酰胺基芘(MAAP)、2-羥基甲基丙烯酸乙酯、N,N,N-三甲基胺乙基甲基丙烯酸酯和高鐵原卟啉等;交聯(lián)劑:聚乙二醇二丙烯酸酯、亞甲基雙丙烯酰胺和二(甲基丙烯酰)間苯二胺等;這推動(dòng)了水相分子印跡技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展.此外,還發(fā)現(xiàn)新的引發(fā)劑如過硫酸鉀[10,11,39]和N,N,N′,N′-四甲基乙二胺(TMEDA)、亞硫酸氫鈉[40].這些新型安全印跡材料的出現(xiàn)是實(shí)現(xiàn) GMIT的基礎(chǔ),也是綠色化學(xué)發(fā)展的要求.

    3 GMIT是MIT發(fā)展的必然

    推廣綠色化學(xué)的今天,無論是MIT的發(fā)展、應(yīng)用,還是對(duì)生態(tài)環(huán)境的保護(hù),發(fā)展 GMIT,推進(jìn)綠色化學(xué)都是必要的.MIT研究中,制備方法、合成原材料的開發(fā)及其應(yīng)用需要更多科學(xué)的理論和制備技術(shù),擴(kuò)充安全無害原材料,推進(jìn)理論向?qū)嶋H的應(yīng)用,引入聚合物的安全性評(píng)價(jià),GMIT是MIT發(fā)展的必然要求.

    同時(shí),要提高原材料、聚合物利用效率,減少副產(chǎn)物,實(shí)現(xiàn)原子經(jīng)濟(jì)性.要減少有毒有害物質(zhì)的使用和產(chǎn)生,保護(hù)生態(tài)環(huán)境.深入探索天然識(shí)別系統(tǒng)MIT和印跡識(shí)別機(jī)理.利用輔助設(shè)計(jì)技術(shù)從理論上更加科學(xué)地設(shè)計(jì)、合成MIPs.充分利用分子模擬計(jì)算方法研究模板、功能單體、交聯(lián)劑和輔助溶劑的預(yù)組裝體系,更加接近真實(shí)合成條件下設(shè)計(jì)、優(yōu)化印跡聚合物,充分考慮反應(yīng)熱力學(xué)、動(dòng)力學(xué)過程和材料物理性質(zhì)等相關(guān)因素,研究MIPs的親和性、選擇性和識(shí)別機(jī)理.

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    Brief introduction to green molecular imprinting technology

    (1.College of Lif e Science,Guizhou University,Guiyang550025,Guizhou,China;2.Food Science&Engineering Research Center,Guizhou University,Guiyang550025,Guizhou,China)

    ZHANG Xiao-gang1,ZHU Qiu-jin1,2*

    The concept of green molecular imprinting technology(GMIT)is elucidated.The development trend of GMIT is briefed in relation to aqueous phase and other types of novel molecular imprinting technologies,aided design of polymers,and development of novel starting materials.It is pointed out that,along with increased acceptance of green chemistry,attention should be paid to deeply exploring and developing GMIT so as to extend the scope of molecular imprinting technology and promote the development of green chemistry.

    green chemistry;molecular imprinting technology;brief introduction

    O 641.3

    A

    1008-1011(2011)04-0100-05

    2010-12-29.

    貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長(zhǎng)資金項(xiàng)目(黔教科辦(2010)04號(hào));貴州省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(黔科合NY字[2009]3076號(hào)).

    張孝剛(1986-),男,碩士生,研究方向?yàn)槭称窢I(yíng)養(yǎng)與安全.*

    .E-mail:qiujin_z@hotmail.com.

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