Ki-67在宮頸癌Ⅲ期化療前后的表達(dá)及臨床意義

侯 軍 蔡尚霞 (吉化集團(tuán)公司總醫(yī)院,吉林 吉林 132022)

近年來,核抗原(Ki-67)已被廣泛地應(yīng)用于測定各種腫瘤的增殖活性,是監(jiān)測人類惡性腫瘤轉(zhuǎn)歸的重要指標(biāo)。已有報(bào)道應(yīng)用其抗體定量分析腫瘤的生長分?jǐn)?shù)、腫瘤的分級、增生程度及預(yù)測腫瘤的預(yù)后〔1〕。Ⅲ期宮頸癌是臨床常見的宮頸癌分期,化療為其主要的治療手段。本研究通過檢測Ⅲ期宮頸癌化療前后 Ki-67的表達(dá),旨在探討其在評價(jià)化療效果中的意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集我院 2008年 1月至 2011年 1月Ⅲ期宮頸癌接受化療術(shù)的存檔蠟塊 60例,均附有詳細(xì)的病歷資料。年齡 53～75〔平均(61.2±7.6)〕歲,病程 8～24個(gè)月。宮頸癌的診斷和臨床分期均符合 2000年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)標(biāo)準(zhǔn)〔據(jù)病例資料證實(shí)癌腫擴(kuò)散盆壁和(或)累及陰道下 1/3且出現(xiàn)腎功能異?！场?〕。所有患者均接受化療方案,以順鉑 +長春新堿 +平陽霉素(PVB)方案為主。

1.2 檢測方法 主要試劑Ki-267抗體,S-P免疫組化試劑盒及二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒均購自福州泰普。所有標(biāo)本均經(jīng) 10%甲醛固定,石蠟包埋,切片厚 0.4μm,常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色,光鏡下行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察,以確定病理診斷及分組。免疫組化染色采用 S-P法,按說明書操作。陽性對照片為已知宮頸癌陽性片,磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗為陰性對照片。

1.3 結(jié)果判定 光鏡下細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒確定為Ki-67陽性細(xì)胞。根據(jù)以下公式計(jì)算得到Ki-67陽性細(xì)胞指數(shù)及變化值。陽性細(xì)胞指數(shù)(%)=總的陽性細(xì)胞數(shù)/總的腫瘤細(xì)胞數(shù) ×100%。變化值(%)=(化療前陽性細(xì)胞指數(shù)-化療后陽性細(xì)胞指數(shù))×100%。臨床療效評估:完全緩解(CR):可見的腫瘤病灶完全消失,維持 4 w以上;部分緩解(PR):基線病灶長徑總和縮小≥30%,維持 4w以上;穩(wěn)定 (SD):基線病灶長徑總和縮小但未達(dá) PR或有增加但未達(dá)進(jìn)展(PD);PD:基線病灶長徑總和增加≥20%或出現(xiàn)新病灶。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,計(jì)量資料結(jié)果以±s表示,同組間比較用配對 t檢驗(yàn),兩組間比較用成組 t檢驗(yàn),各組間比較用單因素方差分析,兩變量間相關(guān)性用 Pearson直線相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

臨床 CR組化療后較化療前 Ki-67陽性細(xì)胞指數(shù)明顯下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),臨床PR組化療后較化療前 Ki-67陽性細(xì)胞指數(shù)明顯下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),臨床SD+PD組化療后較化療前Ki-67陽性細(xì)胞指數(shù)無明顯差異(P＞0.05)。見表 1。

表1 不同臨床療效治療前后 Ki-67陽性指數(shù)(±s)

表1 不同臨床療效治療前后 Ki-67陽性指數(shù)(±s)

組別 n Ki-67陽性細(xì)胞指數(shù) P值臨床 CR組化療前 20 62.82±8.32化療后 20 15.56±5.22 ＜0.05臨床 PR組化療前 20 54.98±15.41化療后 20 26.15±11.41 ＜0.05臨床 SD+PD組化療前 20 40.72±16.38化療后 20 40.18±12.13 ＜0.05

3 討 論

Ki-67抗原是應(yīng)用霍杰金病 L428細(xì)胞株的核成分接種小鼠而制備出的單克隆抗體,它的表達(dá)與哺乳動物細(xì)胞中細(xì)胞周期進(jìn)展密切相關(guān),是一種貫穿表達(dá)于增殖期細(xì)胞中的核抗原〔3〕。它是由分子量為 345 kD和 395 kD的兩條多肽鏈組成的核蛋白,其基因定位于第 10號染色體上,是一種由 1 095個(gè)堿基對編碼的 DNA結(jié)合蛋白,近核仁區(qū),是目前較為肯定的核增殖標(biāo)志蛋白,在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖方面起重要作用〔4〕。Ki-67在宮頸癌的表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及惡性程度有關(guān)。研究證實(shí),大多數(shù)的化療藥物都是通過抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來清除腫瘤細(xì)胞的。腫瘤細(xì)胞受到化療藥物打擊后,其生長增殖受抑,凋亡增加,而且對化療越敏感的腫瘤細(xì)胞,增殖狀態(tài)受到抑制越明顯〔5〕。本研究中在不同臨床療效組化療前后 Ki-67表達(dá)變化情況亦不相同,臨床CR組和臨床PR組Ki-67的陽性細(xì)胞指數(shù)明顯下降,而臨床SD+PD組下降的趨勢不明顯。這可能是因?yàn)檎＝M織器官內(nèi)細(xì)胞在諸多因子的調(diào)控下,增殖、凋亡間處于動態(tài)平衡。惡性腫瘤的發(fā)生在很大程度上取決于細(xì)胞增殖與凋亡的平衡和轉(zhuǎn)化,當(dāng)腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡調(diào)控失常,即增殖大于細(xì)胞凋亡時(shí),腫瘤就可能發(fā)展;反之,腫瘤就會縮小甚至消亡。增殖活性強(qiáng)、Ki-67表達(dá)較高的腫瘤比表達(dá)低者組織學(xué)反應(yīng)更顯著,因此化療前 Ki-67陽性指數(shù)較高,而化療后數(shù)值顯著降低,可協(xié)助判定宮頸癌患者對新輔助化療的反應(yīng)。因而 Ki-67充分反映了腫瘤細(xì)胞增殖的狀態(tài),下降越明顯,則化療的療效也就越為肯定,可能成為評價(jià)化療療效的一個(gè)重要的參考指標(biāo)。

1 劉麗華,趙富璽,郭俊成,等.宮頸脫落細(xì)胞中cyclin E和 Ki-67的表達(dá)及意義〔J〕.中華腫瘤防治雜志,2006;13(9):666-8.

2 樂 杰 .婦產(chǎn)科學(xué)〔M〕.第 5版 .北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:314.

3 宋水勤,張國楠.宮頸癌新輔助化療現(xiàn)狀〔J〕.實(shí)用醫(yī)院臨床雜志,2005;2(2):22-5.

4 張亞靜,拉萊?蘇祖克.p16、Ki-67在子宮頸上皮內(nèi)瘤變及子宮頸鱗癌中的表達(dá)及意義〔J〕.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2007;30(4):372-4.

5 Bean SM,Eltoum l,Horton DK,et al.Immunohistochemical expression of p 16 and Ki-67 correlates with degree of analintraepithelialneo plasia〔J〕.Am JSurg Pathol,2007;31(4):555-61.