作物抗旱機理及其相關(guān)基因的研究進展

李 娜 (湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,湖南長沙41 01 28)

李 莉 (國家雜交水稻研究中心,湖南長沙41 01 25)

陳光輝 (湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,湖南長沙41 01 28)

在世界范圍內(nèi),干旱問題已經(jīng)是一個普遍的問題。目前,世界陸地面積有1/3處于干旱或半干旱狀態(tài)。作物正常生長發(fā)育和高產(chǎn)都必須有充足的水分提供保障,因此干旱是影響植物生長最重要的非生物脅迫因素之一。作物耐旱性大多是受多基因控制的,因此,利用常規(guī)育種的方法改良作物抗旱性會受到限制。目前,國內(nèi)外的研究主要集中在利用抗旱相關(guān)基因,提高作物的抗旱能力。尤其是在國外,已經(jīng)有多種抗旱轉(zhuǎn)基因植株問世,并且已經(jīng)成功地進行了抗旱轉(zhuǎn)基因水稻品種的培育。為此,筆者對作物抗旱相關(guān)基因的研究進展進行綜述,重點介紹水稻抗旱相關(guān)基因的研究進展,旨在總結(jié)作物抗旱的機制,以便于更好地培育抗旱品種、開展作物抗旱工作。

1 作物抗旱相關(guān)基因研究

作物抗旱相關(guān)基因據(jù)其功能可歸納為以下幾類:一類是功能蛋白基因,在植物抗旱過程中起直接保護作用;另一類是參與干旱脅迫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的信號因子;還有一類是負責(zé)調(diào)控基因表達的轉(zhuǎn)錄因子。

1.1 功能基因

近幾年研究發(fā)現(xiàn),作物中存在一些具有抗旱功能的基因,在抗旱脅迫代謝過程中發(fā)揮作用。

(1)滲透調(diào)節(jié)基因 干旱脅迫會對作物產(chǎn)生傷害作用,為了應(yīng)對這種傷害,作物細胞內(nèi)代謝物質(zhì)不斷積累,通過調(diào)節(jié)胞內(nèi)外滲透壓平衡,減少細胞內(nèi)水分流失,盡可能降低干旱對作物的傷害。參與滲透調(diào)節(jié)機制的有多種物質(zhì),糖類是其中重要的一種,而在眾多糖類中,半乳糖是重中之重。過量表達半乳糖合成基因,會引起棉籽糖和半乳糖2種物質(zhì)的含量上升,有助于提高作物的耐旱性[1]。某些糖類,如海藻糖、果聚糖等也分別以不同的方式在作物干旱期間發(fā)揮作用。除了糖類這種調(diào)節(jié)物質(zhì)外,還有脯氨酸等氨基酸及其衍生物幫助作物度過干旱期。

(2)抗氧化保護劑 作物生長發(fā)育需要充足的水分供應(yīng),干旱條件下作物正常生長發(fā)育會受到影響,而且這種影響是很多因素構(gòu)成的,比如氧化損傷。任何一種問題的出現(xiàn)都會導(dǎo)致與之相對應(yīng)的機制產(chǎn)生,因此,作物體內(nèi)產(chǎn)生了許多酶類和抗氧化的物質(zhì)來抵御這種損傷。酶類物質(zhì)的主要任務(wù)是除去活性氧,抵御活性氧對作物造成的傷害。比如,超氧化物歧化酶 (SOD)就在作物耐旱過程中發(fā)揮積極作用,干旱脅迫發(fā)生時,超氧化物歧化酶活性會大大降低[2]。研究發(fā)現(xiàn),把SOD1轉(zhuǎn)入水稻中,水稻耐旱性明顯提高[3]。

(3)分子伴侶 干旱條件下,作物體內(nèi)會產(chǎn)生多種蛋白其中包括LEA蛋白來抵抗逆境,LEA蛋白可以發(fā)揮類似于分子伴侶的功能從而使得植物細胞免受破壞,尤其是在保持細胞膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的方面有顯著作用[4]。

1.2 轉(zhuǎn)錄因子

研究抗旱轉(zhuǎn)錄因子是抗旱轉(zhuǎn)基因植物研究中重要的一個領(lǐng)域,目前,研究發(fā)現(xiàn)的與抗旱相關(guān)的重要的轉(zhuǎn)錄因子有MYC/MYB、DREB、WRKY、bZIP和NAC等[5]。

(1)DREB轉(zhuǎn)錄因子 DREB轉(zhuǎn)錄因子是AP2/EREBP類基因大家庭中的一員。DRE順式作用元件屬于抗旱基因啟動子區(qū)域,與DREB結(jié)合后參與干旱脅迫等反應(yīng)。DRE順式作用元件在許多與抗旱相關(guān)的基因的調(diào)控區(qū)域被發(fā)現(xiàn),如擬南芥的rd17、rd10及rd29A等[6]。目前,克隆DREB轉(zhuǎn)錄因子基因的研究發(fā)展迅速。DREB轉(zhuǎn)錄因子已經(jīng)從許多作物,如玉米[7]、水稻[8]等中被克隆出來。

DREB轉(zhuǎn)錄因子在抵御干旱脅迫反應(yīng)過程中必不可少。干旱條件下誘導(dǎo)高羊茅DREB1A產(chǎn)生,從而增強作物抗旱性[9]。GhDBP2基因存在于棉花子葉中,也受干旱誘導(dǎo)[10]。swDREB1存在于馬鈴薯中,同樣可以被干旱誘導(dǎo)[11]。TINY在生物脅迫和非生物脅迫過程當(dāng)中扮演重要角色,是一種DREB類似轉(zhuǎn)錄因子[12]。近來研究表明,DREB2A屬于磷蛋白類,可以被干旱激活并發(fā)揮相關(guān)作用[13]。

(2)MYB/MYC類轉(zhuǎn)錄因子 轉(zhuǎn)錄因子種類多種多樣,MYB/MYC類轉(zhuǎn)錄因子是眾多轉(zhuǎn)錄因子中數(shù)量最大的一類因子[14]。MYB/MYC在作物的多種生理生化過程都發(fā)揮作用,但只有少數(shù)的因子會參與逆境反應(yīng)。AtMYB60和AtMYB44被發(fā)現(xiàn)于擬南芥中,干旱脅迫期間,它們調(diào)控抗旱基因的表達,通過減小氣孔開放從而減少水分散失[14,15]。OsMYB3R22來源于水稻,將其導(dǎo)入擬南芥后進行觀察,發(fā)現(xiàn)擬南芥的耐旱狀況得到明顯改善[16]。

(3)bZIP類轉(zhuǎn)錄因子 干旱脅迫條件下,內(nèi)源脫落酸可以被誘導(dǎo)合成,然后,bZIP類轉(zhuǎn)錄因子也被激活,并與ABRE(ABA responsive element)結(jié)合。來源于擬南芥的ABF3或ABF4/AREB2,過量表達后能夠誘導(dǎo)ABA的過敏感,從而增強轉(zhuǎn)基因作物的抗旱能力[17]。

(4)WRKY類轉(zhuǎn)錄因子 WRKY基因在干旱條件下調(diào)控機制還不明確,還有待深入研究。

(5)NAC類轉(zhuǎn)錄因子 NAC轉(zhuǎn)錄因子,是一類具有多種生物功能的特異轉(zhuǎn)錄因子[18]。ANAC055、ANAC019和ANAC072(RD26)過量表達可以提高作物的抗旱性[19];從擬南芥中還分離得到一種NAC基因ATAF1,該因子在干旱脅迫時期發(fā)揮負向調(diào)控作用[20]。

1.3 信號因子

利用信號因子能夠提高作物抵御和適應(yīng)各種逆境的能力,其中包括增強作物的耐旱性。例如,在煙草轉(zhuǎn)基因植株中,NPK1發(fā)揮作用提高煙草的抗旱性[21]。擬南芥中,AHK1在 ANAC、AREB1和DREB2A等基因的上游起正向調(diào)控作用,提高抗旱等能力;CRE1、AHK2和AHK3對干旱脅迫具有負向調(diào)控作用[22]。

除直接提高抗旱能力外,控制抗旱反應(yīng)信號輸出是應(yīng)用信號因子的又一個顯著優(yōu)勢。擬南芥中的SRK2C(SnRK2.8)在干旱脅迫作用下被檢測到超量表達,但在正常情況時,檢測不到表達[23]。由此推斷,信號因子在控制干旱脅迫反應(yīng)過程中發(fā)揮著分子開關(guān)的作用。目前,有幾種信號因子已經(jīng)在干旱脅迫反應(yīng)中被發(fā)現(xiàn),如AtGSK1、OsCDPK、NPK1等[21]。但由于抗旱脅迫反應(yīng)這個信號傳導(dǎo)途徑相對比較復(fù)雜,該途徑中又存在交叉[24],還有很多問題需要進一步詳細研究證實。如OsSIPK在水稻耐旱機制中發(fā)揮作用就是就通過調(diào)節(jié)mRNA表達水平來實現(xiàn)的[25]。

2 水稻抗旱機制及相關(guān)基因

水稻是一種重要的糧食作物,作為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中用水量較大的一種作物,灌溉問題是限制水稻生產(chǎn)的主要因素。在全球水資源日益匱乏的狀況面前,我國也不得不面對干旱這一自然災(zāi)害。這一災(zāi)害嚴重影響著水稻的正常生長,制約著水稻生產(chǎn)的持續(xù)發(fā)展,隨之而來的危機就是糧食安全問題。在此背景下,提高水稻的抗旱能力就顯得尤為重要,因此發(fā)掘水稻抗旱基因成為改善水稻抗旱能力研究的熱點。目前,鑒定、克隆、轉(zhuǎn)化與抗旱性相關(guān)的目的基因,并加以利用已經(jīng)成為培育抗旱品種的一條重要途徑?，F(xiàn)已經(jīng)有許多抗旱相關(guān)的基因相繼被克隆。

2.1 水稻抗旱生理生化機制

作物的抗旱性是內(nèi)部遺傳因子和外界環(huán)境因素彼此相互作用的結(jié)果。作物在不同程度干旱條件影響下,形成產(chǎn)量的能力即為作物抗旱性[26]。羅利軍[27]、Turner[28]等認為作物抗旱性指的是作物在水分缺乏的情況下,依然能夠生產(chǎn)出較高產(chǎn)量的能力。水稻抗旱性可分為抗旱性、避旱性和復(fù)原性抗旱性3種。

金忠男[29]在抽穗期研究不同品種的水稻,發(fā)現(xiàn)旱稻和普通的水稻品種在此時期出現(xiàn)干旱情況的概率有所不同,8月份是干旱多發(fā)期,而旱稻可以避開這個時期,把抽穗期調(diào)節(jié)至7月份,這種自我調(diào)節(jié)機制明顯降低了干旱引發(fā)的損失[30]。高吉寅等[31]取水稻幼苗葉片,使其離體24h后測定含水量;他們還對秧苗進行干旱處理,后又復(fù)水測定秧苗的存活率,并提出復(fù)原性抗旱性作為一種行之有效的方法,應(yīng)該廣泛應(yīng)用于水稻抗旱育種過程中。

在干旱逆境條件下,水稻自身抗旱生理生化機制發(fā)揮作用主要表現(xiàn)為細胞內(nèi)以下幾種物質(zhì)的調(diào)節(jié):①蛋白酶的調(diào)節(jié):水稻細胞內(nèi)多余蛋白被蛋白酶分解,形成大量氨基酸,從而為在抗旱脅迫反應(yīng)中發(fā)揮作用的相關(guān)酶類合成做好充分準備;②糖類物質(zhì)的積累:水稻細胞中糖類物質(zhì)含量增加,能夠使細胞膜更加穩(wěn)定;③滲透調(diào)節(jié):水稻受到干旱脅迫時,許多代謝物質(zhì)會在體內(nèi)大量積累,如氨基酸、糖類等,有助于調(diào)節(jié)細胞內(nèi)外滲透壓平衡,減少水分流失;④有毒物質(zhì)的降解:一旦發(fā)生干旱,水稻體內(nèi)會積累許多有毒物質(zhì),例如活性氧。為了保護細胞,保護酶系統(tǒng)將自動清除這些有害物質(zhì);⑤細胞結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié):細胞壁發(fā)生木質(zhì)化,除此之外還進行自我降解與修復(fù)[32]。

2.2 水稻抗旱相關(guān)基因

迄今為止,水稻抗旱相關(guān)的基因克隆的很少。Takahashi等[33]克隆得到一個wsi18cDNA水稻抗旱基因。Nirmal等[34]從水稻中分離出基因組基因pwsi18,經(jīng)鑒定與抗旱相關(guān)。逐漸深入的理論研究和育種實踐表明,作物都有整體抗逆性[19],即同一生理機制能夠在不同的逆境條件下發(fā)揮作用[35]。據(jù)報道,在干旱等脅迫條件下,已經(jīng)克隆出了調(diào)控基因表達的DREB轉(zhuǎn)錄因子,分別命名為 DREB2A-B和DREB1A-C[36]。該研究從分子水平證實了作物具有整體抗逆性。許多研究者發(fā)現(xiàn)ABA與作物抗旱有著密不可分關(guān)系,認為ABA與其次生產(chǎn)物在提早作物成熟方面發(fā)揮負向調(diào)節(jié)作用,因而加強非ABA依賴型抗旱機制的研究、克隆非ABA依賴型抗旱基因[37]研究,是一個有必要繼續(xù)深入研究的問題。

水稻抗旱基因作用方式各不相同,據(jù)此可以把抗旱基因分為功能基因和調(diào)節(jié)基因2類,功能基因的編碼產(chǎn)物在植株抗旱過程中直接起保護作用;調(diào)節(jié)基因的編碼產(chǎn)物則是作為調(diào)節(jié)功能基因在基因表達和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中發(fā)揮作用。

(1)抗旱功能基因 Xu等[38]利用基因槍法,把大麥胚胎發(fā)育晚期豐富蛋白 (Late embryogenesis abundant protein,Lea)基因轉(zhuǎn)入水稻中,發(fā)現(xiàn)Lea蛋白表達量顯著增加,同時,水稻耐旱能力明顯得到提高,說明干旱脅迫逆境中Lea蛋白能夠減輕干旱威脅,保護水稻。脯氨酸合成途徑中涉及到2種關(guān)鍵物質(zhì),酶P5CS和奩OAT表達基因,通過對二者的克隆與轉(zhuǎn)基因研究發(fā)現(xiàn),脯氨酸的含量上升后,水稻的抗旱能力明顯增強。Igarashi等[39]分離得到一個 P5CScDNA(cosP5CS),來源于水稻品種Akibare。研究表明,P5CS基因被各種逆境脅迫所誘導(dǎo),其中自然也包括干旱脅迫。Zhu等[40]把ABA特異型啟動子和P5CS基因一同導(dǎo)入水稻,P5CS轉(zhuǎn)基因植株在逆境脅迫下的表達量與對照相比提高了2.5倍,此外還發(fā)現(xiàn),第二代轉(zhuǎn)基因植株在缺水條件下根和莖的鮮重顯著增加。Jin等[41]研究干旱誘導(dǎo)啟動子P5CS和組成型啟動子 (Act1)在水稻中的表達發(fā)現(xiàn),脯氨酸德含量在對其進行72h干旱處理之后提高了7倍。吳其亮等[42]把擬南芥8OAT基因?qū)胨?在干旱脅迫條件下,與對照相比,轉(zhuǎn)如8OAT基因的水稻株系的脯氨酸含量增加了4～14倍。

(2)抗旱調(diào)節(jié)基因 DREB轉(zhuǎn)錄因子是一種DNA結(jié)合蛋白,在真核生物中,它能與基因啟動子區(qū)域中的順式作用元件發(fā)生特異性結(jié)合。最近幾年來,水稻DREB轉(zhuǎn)錄因子的研究發(fā)展較快,水稻DREB基因被干旱等逆境脅迫所誘導(dǎo),調(diào)控逆境應(yīng)答基因使其表達。Dubouzet等[43]克隆得到OsDREB1A基因,該基因在水稻原生質(zhì)中與DRE發(fā)生特異結(jié)合,進而激活GUS報告基因,使其在轉(zhuǎn)基因水稻中表達,提高了水稻的耐旱等綜合抗逆性。Tian等[44]克隆出3個DREB轉(zhuǎn)錄因子,均來自于水稻,分別是OsDREB4-1、OsDREB4-2和OsDREB1-1,發(fā)現(xiàn)OsDREB4-1基因只有在苗期受干旱脅迫誘導(dǎo)等逆境誘導(dǎo)的條件下才表達,因此,它可能參與干旱逆境應(yīng)答反應(yīng)。

3 展望

經(jīng)過多年研究,水稻抗旱研究已取得了一定成果。通過抗旱基因的克隆和轉(zhuǎn)化已獲得了大量抗旱轉(zhuǎn)基因植株。但是,抗旱性作為一類綜合性狀,其表現(xiàn)受多基因控制,它的生理生化過程往往是基因與基因之間的共同作用和相互調(diào)節(jié)。因而,要更全面更系統(tǒng)地從本質(zhì)上改善水稻的抗旱性,只有不斷深入研究干旱逆境下水稻的生理生化反應(yīng)極其抗旱機理,分離出更多抗旱基因,并多方面、多層次的研究,水稻的抗旱性才能得以真正的提高。

[1]Taji T,Ohsumi C,Iuchi S,et al.Important roles of drought and cold inducible genes for galactinol sy nthase in stress tolerance in Arabidopsis thaliana[J].T he Plant Journal,2002,29:417-426.

[2]Roldán A,Díaz-Vivancos P,Hernández J A,et al.Super oxide dismutase and total peroxidase activities in relation to drought recovery performance of mycorrhizal shrub seedlings grown in an amended semiarid soil[J].Plant Phy siology,2008,165:715-722.

[3]Prashanth S R,Sadhasivam V,Parida A.Over expression of cytosolic copperzinc superoxide dismutase from a mangrove plant Avicennia marina in indica rice var Pusa Basmati confers abiotic stress tolerance[J].T ransgenic Research,2008,17:281-291.

[4]Xiao B,Huang Y,T ang N X,et al.Over expression of a LEA gene in rice improves droug ht resistance under the field conditions[J].Theoretical and Applied Genetics,2007,115:35-46.

[5]劉 欣,李 云.轉(zhuǎn)錄因子與植物抗逆性研究進展 [J].中國農(nóng)學(xué)通報,2006,22(4):61-65.

[6]Huang B,Jin L,Liu J.Molecular cloning and functional characterization of a DREB1/CBF like gene from cotton[J].Science in China Series C:Life Sciences,2007,50:7-14.

[7]Dubouzet J G,Sakuma Y,Ito Y,et al.OsDREB genes in rice,Oryza sativa,encode transcription activators that function in drought,high salt responsive gene expression[J].PlantJournal,2003,33:751-763.

[8]Zhao J,Ren W,Zhi D,et al.Arabidopsis DREB1A/CBF3 bestowed transgenic tall fescue increased tolerance to drought stress[J].Plant Cell Report,2007,26:1521-1528.

[9]Huang B,Jin L,Liu J Y.Identification and characterization of the novel gene GhDBP2 encoding a DRE binding protein from cotton[J].Journal of plant physiology,2008,165:214-223.

[10]Kim Y H,Yang K S,Ryu S H,et al.Molecular characterization of a cDNA encoding DREB binding transcription factor from dehydration treated fibrous roots of sweet potato[J].Plant Phy siology and Biochemistry,2007,46:196-204.

[11]Sun S,Yu J P,Chen F,et al.T IN Y,a Dehydration responsive element-binding protein like transcription factor connecting the DRE and ethylene responsive element mediated signaling pathways in Arabidopsis[J].Journal of Biological Chemistry,2008,283:6261-6271.

[12]Agarwal P,Agarwal P K,Nair S,et al.Stress inducible DREB2A transcription factorfrom Pennisetumglaucum is a phosphor protein andits phosphorrylation negatively regulates its DNA binding activity[J].Molecular Genetics and Genomics,2007,277:189-198.

[13]陳 俊,王宗陽.植物MYB類轉(zhuǎn)錄因子研究進展[J].植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報,2002,28(2):81-88.

[14]Cominelli E,Galbiati M,Vavasseur A,et al.A guard cell specific MYB transcription factor regulates stomatal movements and plant drought tolerance[J].Current Biology,2005,15(13):1196-1200.

[15]Choonkyun J ung,J un Sung Seo,Sang Won Han,et al.Overexpression of AtMYB44 enhances stomatal closure to confer abiotic stress tolerance in transgenic Arabidopsis[J].Plant Phy siology,2008,146:623-635.

[16]Dai X,Xu Y,Ma Q,et al.Overexpression of an R1 R2 R3 MYB gene,increases tolerance to freezing,droug ht[J].Plant Phy siology,2007,143:1739-1751.

[17]Fujita Y,Fujita M,Satoh R,et al.A REB1 is a transcription activator of novel ABRE dependent ABA signaling that enhances drought stress tolerance in Arabidopsis[J].Plant Cell,2005,17:3470-3488.

[18]柳展基,邵鳳霞,唐桂英.植物NAC轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)功能及其表達調(diào)控研究進展 [J].西北植物學(xué)報,2007,27(9):1915-1920.

[19]T ran L S,Nakashima K,Sakuma Y,et al.Isolation and functional analy sis of Arabidopsis stress inducible NAC transcription factors that bind to a drought responsive cis element in the early responsive to dehydration stress promoter[J].Plant Cell,2004,16:2481-2498.

[20] Lu P L,Chen N C,An R,et al.A novel drought induciblegene,AT AF1,encodes a NAC family protein that negatively regulatesthe expression of stress responsive genes in Arabidopsis[J].Plant M olecular Biology,2007,63:289-305.

[21] Shou H,Bordallo P,Wang K.Expression of the nicotiana protein kinase(NPK1)enhanced drought tolerance in transgenic maize[J].Journal of Experimental Botany,2004,55:1013-1019.

[22]Davies J P,Yildiz F H,Grossman A R.Sac3,an Snf12like serine/threonine kinase that positively and negatively regulates the responses of Chlamy domonas to sulfur limitation[J].Plant Cell,1999,11:1179-1190.

[23] Tran L S,Urao T,Qin F,et al.Functional analy sis of AHK1/AT HK1 and cytokinin receptor histidine kinases in response to abscisic acid,drought,and salt stress in Arabidopsis[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA,2007,104:20623-20628.

[24]Nakagami H,Pitzschke A,Hirt H.Emerging MAP kinase pathways in plant stress signaling[J].T rends in Plant Science,2005,10:339-346.

[25] Lee M O,Cho K,Kim S H,et al.Novel rice OsS IPK is a multiple stress responsive MAPK family member showing rhythmic expression at mRNA level[J].Planta,2008,227:981-990.

[26]胡標林,李名迪,萬 勇,等.我國水稻抗旱鑒定方法與指標研究進展 [J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報,2005,17(2):56-60.

[27]羅利軍,張啟發(fā).栽培稻抗旱性研究的現(xiàn)狀與策略[J].中國水稻科學(xué),2001,15(3):209-214.

[28]Turner N C(張永平譯).作物抗性生理學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1985:191-207.

[29]金忠男.水稻的抗旱性機理與鑒定[J].雜交水稻,1991,(4):45-48.

[30]DeDatta,Malabuyac J,Agragon E,et al.A field screening technique for evaluating rice germplasm for drought to tolerance during the vegetative stage[J].Field Crops Res,1988,(19):123-134.

[31]高吉寅.水稻等品種苗期抗旱生理指標的探討 [J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),1984,(4):41-45.

[32]唐先兵,趙恢武,林忠平.植物耐旱基因工程研究進展[J].首都師范大學(xué)學(xué)報,2002,23(3):47-51.

[33]Nirmal J,Hiroaki K,Yoshichika K.Isolation and characterization of water stress-specific genomicgene,pwsi18,from rice[J].Plant and Cell Physiol,1998,39:64-72.

[34]王樹才,陳智偉,陳吉龍,等.玉米類脫水素基因克隆初報 [J].云南大學(xué)學(xué)報 2003,21:108.

[35]張正斌.植物對環(huán)境脅迫的整體抗逆性的若干問題探討[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報,2000,(3):112-116.

[36]張正斌,山 侖.作物抗逆性共同機理研究進展[J].作物雜志,1997,(4):10-12.

[37]劉強,趙南明,YAMAGUCHKS,等.DREB轉(zhuǎn)錄因子在提高植物抗逆性中的作用[J].科學(xué)通報,2006,45(1):11-16.

[38] Lilley J M,Ludlow M M,Mccouch S R,et al.Locating Q TL for osmotic adjustment and dehydration tolerance in rice[J].Journal of Experimental Botany,1996,47:1427-1436.

[39]Xu D P,Duan X L,Wang B Y,et al.Expression of alate embryo genesis abundant protein and germination XII.Purification and properties of principle storage protein[J].Plant Phy siology,1981,68:180-186.

[40]Ing ram J,Chandler J W,Gallager L,et al.Analysis of eDNA clones Encoding sucrose-phosphate synthase in relation to sugar interconversions associated with dehydration in the resurrection plant Crater stigma plantagineum Hoechst[J].Plant Physiology,1997,115:113-121.

[41] Ray W,Jin S,Jayaprakash T.How to obtain optimal gene ex pression in transgenic plants[R].北京:第七次基因?qū)W術(shù)會議,1999.4.

[42]吳其亮,范戰(zhàn)民,郭 蕾,等.經(jīng)5OA T基因獲得抗鹽抗旱水稻 [J].科學(xué)通訊,2003,48(19):2050-2056.

[43]Dubouzet J G,SakumaY,et al.OsDREB genesinrice Ory za satica L.encode Wanscription activators that function in drought,highsalt and cold-responsive gene expression[J].Plant Journal,2003,33:751-763.

[44] Tian X H,Li X P,Zhou H L,et al.OsDREB4 genes in rice encode containing protein that bind specifically to the dehydration responsive element[J].Acta Botanica Sinica,2005,47:467-476.