標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定有機(jī)制劑中鐵含量

王麗蕓，劉淑萍

（1.河北理工大學(xué) 醫(yī)院，河北 唐山063009；2.河北理工大學(xué) 化工與生物技術(shù)學(xué)院，河北 唐山063009）

鐵葉綠酸鈉為葉綠素衍生物的一種，是良好的食用色素和鐵強(qiáng)化劑，目前國內(nèi)外藥理研究表明，對(duì)各種原因引起的白細(xì)胞減少癥及缺鐵性貧血有治療作用[1]，做為補(bǔ)鐵劑其中鐵離子含量的控制顯得尤為重要。原子吸收光譜法[2,3]、等離子發(fā)射光譜法[4]、高效液相色譜法[5]等都可以測(cè)定復(fù)合制劑中鐵離子含量，這些方法快速、準(zhǔn)確、靈敏度好，對(duì)儀器設(shè)備要求相對(duì)較高。分光光度法應(yīng)用較普遍，但由于有機(jī)成分存在，必須對(duì)樣品進(jìn)行硝化或灰化處理[6～8]，操作費(fèi)時(shí)且有環(huán)境污染。本文研究建立了一種簡單易行的化學(xué)分析法，即采用標(biāo)準(zhǔn)加入分光光度法測(cè)定鐵葉綠酸鈉中鐵的含量，并研究了鹽酸用量及反應(yīng)時(shí)間等因素對(duì)鐵離子解離完全程度的影響。適用于生產(chǎn)的現(xiàn)場(chǎng)質(zhì)量控制和含量的間接測(cè)定。

1 儀器與試藥

分光光度計(jì)（日立220型）；鐵標(biāo)準(zhǔn)液[8]：含鐵0.01μg·m l-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液。樣品1：自制鐵葉綠酸鈉；樣品2：鐵葉綠酸鈉（海寧鳳鳴葉綠素有限公司，總鐵≥2%）；濃鹽酸；0.1%的1，10-鄰菲羅啉溶液；醋酸-醋酸鈉緩沖溶液（pH=4.0）；10%鹽酸羥胺。試劑均為分析純，所用水均為蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品試液的制備

樣品試液：精密稱取鐵葉綠酸鈉0.2g，加水溶解，稀釋定容于100m l容量瓶中。移取10m l置100m l容量瓶中（預(yù)先加入適量NaHCO3），加入1:1(v/v)HCl適量，加水至刻度，搖勻，保持溶液pH為1，靜置20m in。備用。

2.2 含量測(cè)定

將上述樣品試液干過濾，移取濾液5m l分別加入編號(hào)為1、2、3、4的50m l容量瓶中，依次分別加入鐵標(biāo)液0.0、2.0、4.0、6.0m l，加入鹽酸羥胺溶液5.0m l，滴加適量稀NaOH液調(diào)pH約為4，加入醋酸-醋酸鈉緩沖液5.0m l，0.1%的1,10-鄰菲羅啉溶液3.0m l，用水稀釋至刻度，搖勻。10分鐘后，以蒸餾水為參比，在λmax=510nm處測(cè)定吸光度。作圖得外延交點(diǎn)值，計(jì)算鐵葉綠酸鈉中鐵含量。

2.2.1 鹽酸加入量對(duì)含量測(cè)定結(jié)果的影響

在樣品溶液制備中，改變鹽酸的用量，靜置相同時(shí)間，得到一系列樣品溶液，按“含量測(cè)定”項(xiàng)下方法試驗(yàn)，結(jié)果見表1。

表1 1∶1(v/v)HCl加入量對(duì)含量測(cè)定的影響

由表1看出，酸用量小時(shí)，因反應(yīng)不完全導(dǎo)致鐵離子含量偏低，當(dāng)鹽酸用量為3.5m l時(shí)，鐵離子含量達(dá)0.46μg·m l-1。隨酸用量加大，含量并不增加，且過多的鹽酸對(duì)后續(xù)試驗(yàn)中pH的調(diào)節(jié)有影響，因此，本實(shí)驗(yàn)選擇鹽酸用量為3.5m l，溶液pH為1。

2.2.2 反應(yīng)時(shí)間對(duì)鐵離子含量的影響

在樣品溶液制備中，改變靜置反應(yīng)時(shí)間，得到一系列樣品溶液，按“含量測(cè)定”項(xiàng)下方法，分別測(cè)定吸光度，結(jié)果見表2。靜置反應(yīng)時(shí)間小于15min時(shí)，亞鐵離子未完全從卟啉環(huán)中游離出來，導(dǎo)致含量偏低。故反應(yīng)時(shí)間以15min至20m in為宜。

表2 靜置反應(yīng)時(shí)間對(duì)鐵離子含量的影響

2.3 樣品測(cè)定結(jié)果與回收率

按“含量測(cè)定”項(xiàng)下方法，測(cè)定樣品1，測(cè)得吸光度值見表3。

表3 樣品1待測(cè)液的吸光度

以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)得吸光度為縱坐標(biāo)作圖，曲線外延交于橫軸上的截距即為樣品待測(cè)溶液中亞鐵離子的濃度。試驗(yàn)結(jié)果得出，樣品1溶液中鐵離子濃度為 46.12μg.m l-1。同法測(cè)定三次，平均回收率為97.84%。

2.4 與其它方法比較和精密度

分別取樣品1和樣品2適量，按“含量測(cè)定”項(xiàng)下的方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表4。并與文獻(xiàn)[8]法比較，測(cè)定結(jié)果基本一致。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD值）≤0.75%(n=5)，方法可靠、準(zhǔn)確。

表4 不同方法比較（n=5）

3 討 論

3.1 由于鐵葉綠酸鹽制備是將葉綠素皂化、酸化脫鎂、鐵代成為鐵葉綠酸，過濾，洗滌，堿溶解成鹽。因此，在酸性條件下鐵葉綠酸鈉釋放出亞鐵離子，并生成脫鎂葉綠酸，脫鎂葉綠酸不溶于水，經(jīng)過濾除去。又因加入足夠的酸，所以溶液中鐵離子不會(huì)因稀釋而水解。并且，標(biāo)準(zhǔn)加入法最大限度地排除了測(cè)定溶液中綠色素的干擾。

3.2 樣品預(yù)處理中，加入NaHCO3目的是防止游離出的Fe2+被氧化。因?yàn)?，足量的NaHCO3遇鹽酸時(shí)能保證產(chǎn)生足夠的CO2，以排出容器中的氧氣。同時(shí)NaHCO3的加入并不引入干擾離子，對(duì)測(cè)定結(jié)果無影響。

3.3 此方法與文獻(xiàn)[8]比較得出：①分析速度提高兩倍；②在大量綠色素存在下不干擾測(cè)定體系；③測(cè)定結(jié)果一致。樣品處理簡單、方便快捷、結(jié)果準(zhǔn)確。易推廣使用，對(duì)葉綠素鐵衍生物鹽及其制劑含量的間接評(píng)價(jià)具有一定的可行性，適用于中間產(chǎn)品的質(zhì)量控制，并為葉綠素鐵衍生物鹽及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

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