安胃丸對小鼠胃腸功能的影響及其作用機制

任守忠,李 鑫,郭建生,何書華,師振宇

(1.海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院,海南海口 571101;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥現(xiàn)代化重點實驗室,湖南長沙 410208)

安胃丸用于治療以上腹部脹痛、噯氣、反酸、納差等為主要臨床表現(xiàn)的慢性胃炎已取得了良好療效。本研究觀察了安胃丸對胃腸運動功能的影響及其作用機制,為其臨床使用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動 物

昆明種小鼠,SPF級,體質(zhì)量(22±2)g,雌雄兼用,由上海斯萊克景達實驗動物長沙分公司提供。實驗動物許可證號:HNASLKJ20100379。

1.2 藥品與試劑

安胃丸,每克含 6.09 g生藥,由湖南省中醫(yī)藥研究院提供;鹽酸胃復(fù)安注射液,天津藥業(yè)集團新鄭股份有限公司產(chǎn)品,批號 1003082;硫酸阿托品注射液,天津藥業(yè)集團新鄭股份有限公司產(chǎn)品,批號091209;甲基硫酸新斯的明注射液,中國上海信誼制藥廠產(chǎn)品,批號 090702。半固體糊由糖 4 g、奶粉8 g、淀粉 4 g、羧甲基纖維素 5 g、水 125 m L配成150mL約150 g半固體糊狀物,放入冰箱冷藏 12 h以上,用前 2 h取出恢復(fù)至室溫,加入 3 g活性炭。

1.3 儀 器

電子天平,上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。

1.4 方 法[1-3]

1.4.1 安胃丸對正常小鼠胃排空及小腸推進運動的影響

取 60只小鼠,雌雄各半,按體質(zhì)量隨機分為正常對照組、胃復(fù)安組、安胃丸低劑量組(4.42 g/kg)、安胃丸中劑量組(8.84 g/kg)、安胃丸高劑量組(17.68 g/kg)5組,每組12只。正常對照組灌胃等容積蒸餾水,0.2mL/10 g,每日1次,連續(xù)5 d。末次給藥前禁食、不禁水約18 h,末次給藥后1 h灌胃半固體糊,0.8 mL/只。20 min后脫頸椎處死小鼠,剖腹后結(jié)扎賁門和幽門,取出胃,用濾紙拭干后稱全質(zhì)量,然后沿胃大彎剪開胃體,洗去胃內(nèi)容物后拭干,稱胃凈質(zhì)量。同時迅速取出小腸直鋪于玻璃板上,測量小腸全長及黑色半固體糊的推進距離,按下式計算胃內(nèi)殘留率和小腸推進率。

胃內(nèi)殘留率(%)=(胃全質(zhì)量-胃凈質(zhì)量)/所給半固體糊質(zhì)量×100%。

小腸推進率=推進距離/小腸全長×100%

1.4.2 安胃丸對阿托品致小鼠胃排空及小腸推進障礙的影響

將小鼠分為6組,即在 1.4.1分組基礎(chǔ)上增加阿托品組。給藥及禁食方式同 1.4.1,阿托品組灌胃給予等量蒸餾水。第5天給藥 20min后,除正常對照組外,各組小鼠腹腔注射阿托品(0.3μg/g)。20min后給予半固體糊,胃排空率及小腸推進率的測量方式同1.4.1。

1.4.3 安胃丸對新斯的明致小鼠胃排空及小腸推進亢進的影響

將動物隨機分為 6組,即在1.4.1項下分組基礎(chǔ)上增加新斯的明組。給藥及禁食方式同 1.4.1,新斯的明組灌胃給予等量蒸餾水。第 5天給藥45 min后,除正常組外,其余組動物均皮下注射新斯的明(0.1μg/g)。20min后給予半固體糊,胃排空率及小腸推進率的測量方式同1.4.1。

2 結(jié) 果

2.1 安胃丸對正常小鼠胃排空及小腸推進運動的影響

與正常對照組比較,胃復(fù)安組小鼠胃內(nèi)殘留率明顯減少,小腸推進率明顯增加,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01),而安胃丸各劑量組小鼠胃內(nèi)殘留率和小腸推進率差別均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。表明安胃丸對正常小鼠胃排空和小腸推進無影響。見表1。

表1 安胃丸對正常小鼠胃排空及小腸推進的影響 ±s

表1 安胃丸對正常小鼠胃排空及小腸推進的影響 ±s

注:與正常對照組對比,**P＜0.01。

組 別 動物數(shù) 劑量/(g·kg-1) 胃內(nèi)殘留率/% 小腸推進率/%正常對照組 12 — 50.88±8.21 48.3±7.51胃復(fù)安組 12 0.008 28.21±8.59** 63.1±8.01**安胃丸低劑量組 12 4.42 44.56±8.57 50.31±9.76安胃丸中劑量組 12 8.84 48.68±7.87 52.17±6.69安胃丸高劑量組 12 17.68 45.71±9.73 49.10±7.98

2.2 安胃丸對阿托品致小鼠胃排空及小腸推進運動的影響

與正常對照組比較,阿托品組小鼠胃內(nèi)殘留率明顯增加,小腸推進率明顯降低,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與阿托品組比較,安胃丸各劑量組小鼠胃內(nèi)殘留率均有明顯減少,小腸推進率則明顯提高,其中,低劑量組差別更明顯(P＜0.01)。表明安胃丸對阿托品所致小鼠胃排空延緩和小腸推進抑制具有拮抗作用。見表 2。

表2 安胃丸對阿托品致小鼠胃排空及小腸運動的影響 ±s

表2 安胃丸對阿托品致小鼠胃排空及小腸運動的影響 ±s

注:與正常對照組對比,**P＜0.01;與阿托品組對比,#P＜0.05,##P＜0.01。

組 別 動物數(shù) 劑量/(g·kg-1) 胃內(nèi)殘留率/% 小腸推進率/%正常對照組 12 — 51.67±10.43 47.78±6.83阿托品組 12 0.000 3 77.01±9.90** 28.0±8.1 42**安胃丸低+阿托品組 12 4.42 65.87±7.29## 43.18±8.75##安胃丸中+阿托品組 12 8.84 67.88±9.87# 37.35±10.21#安胃丸高+阿托品組 12 17.68 68.62±10.94# 36.08±5.47#

2.3 安胃丸對新斯的明致小鼠胃排空及小腸推進運動的影響

與正常對照組比較,新斯的明組小鼠胃內(nèi)殘留率顯著減少,小腸推進率明顯加快,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與新斯的明組比較,安胃丸高和中劑量能明顯減少小鼠胃內(nèi)殘留率,其中,高劑量組作用更明顯;3個劑量組的小腸推進率均明顯降低,高劑量組降低更明顯(P＜0.01)。表明安胃丸可明顯抑制新斯的明所致小鼠胃腸運功亢進。見表 3。

表3 安胃丸對新斯的明致小鼠胃排空及小腸推進運動的影響 ±s

表3 安胃丸對新斯的明致小鼠胃排空及小腸推進運動的影響 ±s

注:與正常對照組對比,**P＜0.01;與新斯的明組對比,#P＜0.05,##P＜0.01。

組 別 動物數(shù) 劑量/(g·kg-1) 胃內(nèi)殘留率/% 小腸推進率/%正常對照組 12 — 51.67±10.43 45.39±9.76新斯的明組 12 0.000 3 30.48±10.02** 77.98±5.17**安胃丸低+新斯的明組 12 4.42 35.49±7.52 71.16±7.93#安胃丸中+新斯的明組 12 8.84 39.00±9.75# 69.10±11.37#安胃丸高+新斯的明組 12 17.68 41.25±7.53## 60.37±9.97##

3 討 論

本實驗采用營養(yǎng)性半固體糊加炭末方法來測定動物的胃排空和小腸推進功能。半固體糊結(jié)構(gòu)接近日常食物,較其他類食物更能反映藥物對胃腸運動功能的影響,而且簡便、節(jié)省動物,是篩選調(diào)節(jié)胃腸平滑肌運動藥物的常用方法。

筆者從不同的角度觀察了安胃丸對胃腸功能的調(diào)理作用并初步分析了其作用機制。實驗結(jié)果顯示,安胃丸對正常小鼠的胃排空和小腸推進無明顯影響,但可明顯拮抗新斯的明所致的小鼠胃排空和小腸運動亢進,說明該藥能夠解除平滑肌的痙攣,可使處于病理狀態(tài)的胃腸平滑肌恢復(fù)正常;新斯的明為膽堿酯酶抑制劑,表現(xiàn)為M樣和 N樣作用,興奮胃腸道平滑肌,使胃排空加快,腸推進增強,而安胃丸能夠拮抗新斯的明引起的小鼠胃排空、小腸推進亢進,提示安胃丸可能具有 M受體阻斷作用。同時該藥又對阿托品所致的小鼠胃排空和小腸運動障礙有明顯抑制作用,可以使松弛狀態(tài)的胃腸平滑肌張力增加、收縮力增強,胃腸蠕動加快,以至于恢復(fù)正常功能狀態(tài)。此提示安胃丸拮抗阿托品而提高胃腸平滑肌運動可能是通過對其他受體如DA或5-TH受體影響來實現(xiàn),確切機制有待進一步研究。

綜上所述,安胃丸對胃腸平滑肌具有雙向調(diào)節(jié)作用,其雙向作用可能與動物的病理狀態(tài)、藥物不同成分等有關(guān),這也是中藥的優(yōu)點和特點之一,為其臨床用于胃腸運動障礙性疾病提供了實驗依據(jù)。

[1]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2006:438-442.

[2]邢建峰,封衛(wèi)毅,侯家玉.小鼠胃排空及小腸推進實驗方法的探討[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2003,26(4):50-52.

[3]徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982:847-849.