解毒祛瘀法對(duì)乳腺癌小鼠瘦素及其受體干預(yù)機(jī)制研究*

陳 軍，賈英杰，張?zhí)N超，李小江，成海燕，孫一予

（天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，天津 300193）

乳腺癌是婦女中最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，近幾十年來(lái)，乳腺癌的發(fā)病率在世界范圍內(nèi)一直呈上升趨勢(shì)，在中國(guó)其發(fā)病率已居女性惡性腫瘤的首位，發(fā)病率已從2001年的17/10萬(wàn)增加到2006年的52/10萬(wàn)，每年有超過(guò)15萬(wàn)的婦女發(fā)病，而且發(fā)病年齡呈年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著廣大女性的身心健康，但目前對(duì)其發(fā)病機(jī)制尚未明確。

近年來(lái)的研究表明，瘦素與惡性腫瘤尤其是乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。瘦素是于1994年首次發(fā)現(xiàn)的脂源性激素，與其受體結(jié)合后產(chǎn)生多種效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，在正常乳腺上皮細(xì)胞中，沒(méi)有或很少有瘦素的表達(dá)，但在乳腺癌細(xì)胞中則存在著瘦素及其受體過(guò)度表達(dá)，是前者的150%，且兩者呈正相關(guān)。瘦素可促進(jìn)多種腫瘤細(xì)胞增殖，抗凋亡、增強(qiáng)侵襲力以達(dá)到促癌作用。

本實(shí)驗(yàn)分別從體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀察中藥解毒祛瘀法對(duì)乳腺癌的治療效果及作用機(jī)制。體外實(shí)驗(yàn)采用噻唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)，解毒祛瘀法可有效地降低MCF-7乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖活性，用Hoechst33258法檢測(cè)，解毒祛瘀法可促進(jìn)細(xì)胞的凋亡；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附法和蛋白印跡法測(cè)定，解毒祛瘀法可有效縮小乳腺癌MA891荷瘤小鼠的瘤體、降低血清中瘦素水平含量及JAK2-STAT3的水平含量。提示中藥解毒祛瘀法可有效地抑制JAK2-STAT3的信號(hào)傳導(dǎo)通路，降低血清中瘦素水平，從而降低細(xì)胞活性和促進(jìn)凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)。

研究結(jié)果表明：中藥解毒祛瘀法可有效地抑制JAK2-STAT3的信號(hào)傳導(dǎo)通路，降低血清中瘦素水平，從而降低細(xì)胞活性和促進(jìn)凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)。體外實(shí)驗(yàn)采用MTT法檢測(cè)，解毒祛瘀法可有效地降低MCF-7乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖活性，用Hoechst33258法檢測(cè)，解毒祛瘀法可促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。體外實(shí)驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附法和蛋白印跡法測(cè)定，解毒祛瘀法可有效縮小乳腺癌MA891荷瘤小鼠的瘤體、降低血清中瘦素水平及JAK2-STAT3的水平。

解毒祛瘀法是本課題組根據(jù)多年腫瘤臨床經(jīng)驗(yàn)并結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論概括出腫瘤發(fā)病病機(jī)：正氣內(nèi)存，邪留毒聚，毒瘀并存，久病入絡(luò)，并且這一病機(jī)貫穿腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、直至死亡整個(gè)過(guò)程，而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的手術(shù)、放化療又會(huì)加深此病機(jī)發(fā)展，從而提出“解毒祛瘀、扶正抗癌”腫瘤中醫(yī)治則。在此基礎(chǔ)上依據(jù)中藥功效及現(xiàn)代藥理研究擬定化堅(jiān)丸，化堅(jiān)丸的研制成功，打破了目前乳腺癌治療多限于單純的療效觀察，且療效標(biāo)準(zhǔn)很不統(tǒng)一，多數(shù)處于低水平的重復(fù)，缺乏前瞻性的全面嚴(yán)格的臨床科研設(shè)計(jì)的局面，引進(jìn)現(xiàn)代新技術(shù)、新方法，來(lái)研究解毒祛瘀法對(duì)乳腺癌小鼠干預(yù)機(jī)制，探討化堅(jiān)丸的科學(xué)性及作用靶點(diǎn)，從而為中醫(yī)藥治療乳腺癌提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。這對(duì)揭示中藥對(duì)乳腺癌的減毒增效作用機(jī)制，促進(jìn)中藥的現(xiàn)代化有深遠(yuǎn)意義，具有廣闊的應(yīng)用前景。