膽囊結(jié)石患者膽道幽門螺桿菌的檢測(cè)探析

徐慶 顧國(guó)平 張立紅

(江蘇省無錫市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇無錫 214001)

膽囊結(jié)石患者膽道幽門螺桿菌的檢測(cè)探析

徐慶 顧國(guó)平 張立紅

(江蘇省無錫市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇無錫 214001)

目的 探討膽道幽門螺桿菌是否形成膽囊結(jié)石的重要因素。方法 在我院選取2008年6月至2010年8月的膽結(jié)石患者50例作為實(shí)驗(yàn)組,另外選取非膽結(jié)石患者35例作為對(duì)照組,并采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)以及免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的結(jié)石、膽囊黏膜中的幽門螺桿菌以及結(jié)石進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組中膽汁與結(jié)石幽門螺桿菌的陽性率明顯高于膽囊黏膜的陽性率,具有明顯差異。結(jié)論 單純的幽門螺桿菌并不能促成膽囊結(jié)石的形成,但是不能排除它是形成膽囊結(jié)石的因素之一。

膽囊膽石 膽道 幽門螺桿菌

膽結(jié)石在我國(guó)是一個(gè)高發(fā)率的疾病,而且也會(huì)導(dǎo)致其他的疾病。它是引起重癥膽道感染最終產(chǎn)生膽道腫瘤的首要原因。因此預(yù)防以及治療膽道結(jié)石就具有很重要的迫切性。我們需要加深對(duì)膽結(jié)石形成機(jī)制的探索,從而能夠更好的對(duì)膽結(jié)石進(jìn)行研究。本研究就這方面進(jìn)行了研究,取得了較好的效果,報(bào)道如下。

1 臨床資料

在我院選取2008年6月至2010年8月的膽結(jié)石患者50例作為實(shí)驗(yàn)組,男性26例,女性24例,年齡27～81歲,平均年齡51歲。所有被試都因患有慢性膽囊炎或膽囊結(jié)石進(jìn)行了腹腔鏡膽囊切除手術(shù)。另外選取非膽結(jié)石患者35例作為對(duì)照組,男性12例,女性13例。年齡26～82歲,平均年齡50歲。所有被試因非膽結(jié)石病進(jìn)行過膽囊切除術(shù)。實(shí)驗(yàn)組患者在手術(shù)前3d沒有服用抗生素。膽囊組織采用中性的福爾馬林固定。其膽汁和結(jié)石標(biāo)本也在無菌條件下利用無菌注射器進(jìn)行采集,置于冰箱內(nèi)保存。

2 方法

2.1 實(shí)驗(yàn)材料

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)以及免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的結(jié)石、膽囊黏膜中的幽門螺桿菌以及結(jié)石進(jìn)行檢測(cè)。

2.2 膽汁、結(jié)石檢測(cè)

2.2.1 膽汁、結(jié)石檢測(cè)步驟 刮取被試結(jié)石表面與中心成分大約6kg,碾碎并且加入5mL的生理鹽水,抽取其中的2mL放入PV管中。膽汁的標(biāo)本在常溫下融化,再抽取其中的1mL放進(jìn)PV管,加入1mL的生理鹽水。將其在混合器進(jìn)行搖勻混合,再采取以下步驟: (1)把PV管放入4℃的離心機(jī)中,12000轉(zhuǎn),10min離心,4℃保存,等待檢測(cè);(2)拿出酶標(biāo)版,按照順序依次加入100uL陽性、100uL陰性對(duì)照液以及100uL待測(cè)樣品,并對(duì)標(biāo)本進(jìn)行編號(hào);(3)在對(duì)照液與樣品液中都假如50uL的酶標(biāo)溶液,進(jìn)行徹底搖勻混合;(4)在恒溫箱中孵育1h;(5)進(jìn)行6洗滌,每次洗滌之間間隔15s;(6)每孔加入A、B液各50uL;(7)在恒溫下孵育15min;(8)每孔加進(jìn)50uL終止液,終止其反應(yīng)。

2.2.2 膽汁、結(jié)石檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 30min后在酶標(biāo)儀上讀取數(shù)值。臨界值:陰性值×150%+0.06;樣品值大于臨界值則為陽性,小于臨界值則為陰性。

2.3 膽囊黏膜檢測(cè)

利用PV9000免疫組化對(duì)膽囊黏膜中的幽門螺桿菌進(jìn)行檢測(cè)。

表1 實(shí)驗(yàn)組膽汁、結(jié)石與膽囊黏膜的幽門螺桿菌檢測(cè)結(jié)果

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

SPSS 13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,采用卡方檢驗(yàn),P<0.05則差異顯著。

3 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組結(jié)石、膽汁以及膽囊黏膜的幽門螺桿菌檢測(cè)結(jié)果。在實(shí)驗(yàn)組中,50例膽囊黏膜中有11例幽門螺桿菌檢測(cè)呈陽性,36例膽汁標(biāo)本中有22例成陽性,42例結(jié)石標(biāo)本中有30例成陽性。膽汁與結(jié)石的幽門螺桿菌的陽性率明顯高于膽囊黏膜組的,差異顯著,(表1)。

在對(duì)照組中,35例膽囊黏膜中有10例幽門螺桿菌檢測(cè)呈陽性, 26例膽汁標(biāo)本中有15例呈陽性,膽汁的幽門螺桿菌的陽性率明顯高于膽囊黏膜組的,差異顯著。

4 討論

幽門螺桿菌呈S形或者是螺旋狀,其中主要的毒性因子具有粘附素、粘液酶、尿素酶等等。幽門螺桿菌的感染成遍及式分布。不同國(guó)家,不同地區(qū)它的感染力都存在著明顯的差異。隨著年齡的增長(zhǎng),感染還會(huì)出現(xiàn)明顯的家族聚集性。從研究中可以發(fā)現(xiàn)對(duì)照組也就是非膽結(jié)石患者于膽結(jié)石患者的膽囊黏膜與膽汁的陽性率之間并沒有顯著差異。但是也不能因此而妄下結(jié)論認(rèn)為幽門螺桿菌對(duì)于膽結(jié)石的形成沒有相關(guān)性。它可能會(huì)有以下可能性:(1)幽門螺桿菌成為致病菌可能需要一定的條件,也就是說可能需要一定的條件才會(huì)導(dǎo)致膽結(jié)石的形成;(2)可能與油門螺桿菌的毒性有關(guān),雖然有感染可是并不一定會(huì)引起發(fā)病;(3)幽門螺桿菌可能是形成膽結(jié)石的因素之一,通過與其他因素的共同作用最最終才會(huì)導(dǎo)致膽結(jié)石的形成。

不管怎樣,目前對(duì)于膽道系統(tǒng)螺桿菌的檢測(cè)還處于初級(jí)階段,檢測(cè)結(jié)果還有很大的差異,對(duì)于螺桿菌與膽結(jié)石形成之間的相關(guān)性還沒有完全確定。所以,隨著關(guān)于這方面研究的不斷深入,螺桿菌與膽結(jié)石的形成、惡化之間的關(guān)系會(huì)日益明朗化。

[1]董秀山.膽囊結(jié)石患者膽道幽門螺桿菌的檢測(cè)及意義[D].山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院,2007.

[2]韓天權(quán).關(guān)于膽固醇結(jié)石成因機(jī)制及預(yù)防的研究動(dòng)態(tài)[J].外科理論與實(shí)踐,2010,6(3).

[3]陳東分.幽門螺桿菌對(duì)體外原代培養(yǎng)的人膽囊上皮細(xì)胞損傷作用[J].世界華人消化雜志,2004,12(8).

[4]朱雷明,蔡瑞.膽固醇結(jié)石病人與非膽結(jié)石癥人群膽道細(xì)菌感染狀況與免疫球蛋白相關(guān)性的對(duì)照研究[J].中華肝膽外科雜志,2003,9(7).

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2011-08-13