白芍與柴胡不同比例配伍白芍總苷及苯甲酸水煎出量的比較

朱永智，陳鴻英，張桂賢，趙秀梅，胡人杰

（天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所制劑中心，天津 300020）

白芍與柴胡不同比例配伍白芍總苷及苯甲酸水煎出量的比較

朱永智，陳鴻英，張桂賢，趙秀梅，胡人杰

（天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所制劑中心，天津 300020）

[目的]考察白芍與柴胡不同比例配伍共煎芍藥總苷及苯甲酸的煎出量，以探討傳統(tǒng)藥對白芍配伍柴胡對有效成分及有害成分煎出的影響。[方法]單味白芍、白芍與柴胡配伍（1∶2，1∶1，2∶1），水煎提取，分別直接分離和水解后再分離測定游離苯甲酸及芍藥總苷，采用高效液相色譜法（HPLC）測定。[結(jié)果]白芍配伍柴胡，游離苯甲酸煎出量均比白芍單煎明顯降低，芍藥總苷煎出量與白芍單煎比變化不大。[結(jié)論]白芍配伍柴胡合煎與白芍單煎相比，可顯著降低有害成分苯甲酸的煎出量。

白芍；柴胡；配伍；芍藥總苷；苯甲酸；高效液相色譜法。

白芍為毛茛科植物芍藥（Paeonia lactifLora PaL1.），常和柴胡配伍，無論是古方還是現(xiàn)代新方都是一對常用的配伍?？疾焖帉ε湮閷瘜W(xué)成分的影響，可以為闡釋和完善復(fù)方配伍理論提供參考。白芍總苷是由一類結(jié)構(gòu)相近的單萜苷類化合物組成的混合物，因此與單測芍藥苷[1]相比，進行白芍總苷的測定更重要[2]。該類化合物的共同特征是分子內(nèi)均含有一個苯甲酸酯鍵結(jié)構(gòu)，堿水解產(chǎn)生苯甲酸?？捎晒剑喊咨挚傑蘸?苯甲酸含量×480.27/122.12，計算出白芍總苷的含量。筆者首次采用堿水解法測定白芍-柴胡藥對的白芍總苷的含量。苯甲酸是白芍中的有害成分，探討配伍對苯甲酸的影響意義也很大[3]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津LC-10ATvp高效液相色譜儀，SPD-10Avp紫外檢測器。

1.2 試藥 柴胡、白芍藥材購自天津達仁堂藥店，經(jīng)天津中醫(yī)藥大學(xué)馬琳教授鑒定為北柴胡BupLeurum chinense DC.、白芍 Paeonia lactifLora PaL1.；苯甲酸對照品（批號：100419－200301）由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 白芍及白芍與柴胡不同比例配伍白芍總苷的含量測定

2.1.1 對照品溶液配置 精密稱取苯甲酸對照品于量瓶中，加流動相超聲5 min，制成1 mL含10.03 μg的溶液，進樣 20 μL。

2.1.2 樣品溶液配置精密稱取白芍、柴胡各9 g于燒瓶中，精密加入10倍量水，浸泡1 h，回流提取1 h（共2次），合并提取液并濃縮，加水定容至100 mL（A液）。精密吸取2 mL置蒸發(fā)皿中蒸干，殘渣加1%氫氧化鈉（NaOH）溶液10mL溶解，精密量取0.5 mL，置10 mL量瓶中，加流動相8 mL，搖勻，再加1 moL/L的鹽酸溶液凋節(jié)pH值約為4，用流動相定容至刻度，搖勻，即得，進樣 20 μL。

2.1.3 白芍溶液的配制 稱取白芍9 g于燒瓶中，其余操作同2.1.2項。

2.1.4 陰性對照品溶液的制備 稱取柴胡9 g，置圓底燒瓶中，其余操作同2.1.2項。

2.1.5 色譜條件 色譜柱：Shim-pack VP-ODS（250×4.6 mm，5 μm）；流動相為乙腈∶0.1%磷酸－水溶液（25∶75）[2]；流速為 1.0 mL/min，檢測波長為230 nm；室溫。

2.1.6 專屬性實驗 精密吸取對照品、陰性對照、樣品和白芍溶液各20 μL，按色譜條件進樣，結(jié)果樣品、白芍色譜中，苯甲酸峰與其他相關(guān)峰能達到基線分離，陰性對照色譜中，無苯甲酸峰，具有專屬性。

2.1.7 含量測定 按表1比例精密稱取樣品，置圓底燒瓶中，以下操作同2.1.2。結(jié)果見表1。

2.1.8 水解條件的選擇 1）NaOH水解濃度考察：結(jié)果NaOH濃度為1%，5%，10%時樣品溶液中白芍總苷含量分別為 29.597 8、29.211 1、28.997 8 mg/g?？梢姡捎?%NaOH進行水解即可。2）NaOH水解時間考察：結(jié)果水解時間為 0、30、60、120、180 min時樣品溶液中白芍總苷含量分別為30.426 7，29.564 4、29.791 1、29.080 4、30.308 7 mg/g?？梢婋S著水解時間的延長，白芍總苷的含量并無顯著增加，因此選擇1%NaOH直接溶解進行實驗。

2.2 白芍及白芍與柴胡不同比例配伍游離苯甲酸的含量測定

2.2.1 對照品溶液的配制 按2.1.1項制成每mL含 10.10 μg的溶液，進樣 20 μL。

2.2.2 樣品溶液的配制 精密吸取2.1.2項下A液4 mL，加水定容至10 mL，過濾，取續(xù)濾液過0.45 μm的微孔薄膜，作為樣品溶液，進樣20 μL。

2.2.3 白芍溶液、陰性對照溶液的配制及專屬性實驗結(jié)果同2.1項。

2.2.4 色譜條件 除流動相為乙腈∶0.1%磷酸-水溶液（27∶73）[2]；流速為 0.8mL/min 外，其余同 2.1.5 項。

2.2.5 含量測定 按表2比例稱取樣品，置圓底燒瓶中，其余操作同2.1.2。結(jié)果見表2。

表1 芍藥總苷含量的測定結(jié)果（n=3）Tab.1 The decocted quantity of the total glycosides

表2 游離苯甲酸的測定結(jié)果（n=3）Tab.2 The isolated quantity of benzoic acid

3 討論

由于白芍、柴胡水煎液中尚有少量游離苯甲酸，經(jīng)測定，（游離苯甲酸/總苯甲酸）×100%<1%，故在測定白芍總苷時忽略不計。有文獻報道白芍配伍柴胡可以提高白芍苷的煎出量，作者認(rèn)為探討該藥對配伍對白芍總苷煎出率的影響更有意義[1]。實驗結(jié)果表明白芍配伍柴胡對白芍總苷煎出量影響不大；但白芍與柴胡合煎后，有害成分苯甲酸的煎出量明顯下降；這對闡明這一經(jīng)典藥對配伍的科學(xué)性有積極意義。

[1] 蘇孝共,朱光輝,王增壽.白芍與柴胡不同比例配伍芍藥苷水煎出量的比較[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志,2005,22（3）:256-257.

[2] 劉敏彥，高秀強，王 永，等.高效液相色譜法測定白芍藥材中白芍總苷含量[J].中國藥業(yè)，2008,17（5）：22-23.

[3] 容 蓉，袁久榮.四物湯及其配伍組方中苯甲酸煎出量的HPLC法測定[J].中草藥，2001,32（2）：114-115.

Comparison of water decocted quantity of total glycosides of Radix Paeoniae ALba and benzoic acid with different
compatibility of Radix Paeoniae ALba and Radix Bupleuri

ZHU Yong-zhi,CHEN Hong-ying,ZHANG Gui-xian,et al.
（Tianjin MedicaL and PharamaceuticaL Science Institute，Tianjin 300020,China）

[Objective]To observe the decocted quantity of the total glycosides of Radix Paeoniae ALba and benzoic acid when co-decocting with different compatibility of Radix Paeoniae Alba and Radix Bupleuri and to explore the influence the traditional compatibility of Radix Paeoniae Alba and Radix Bupleuri on the decocted quantity of the effective and harmful constituent.[Methods]Single Radix Paeoniae Alba,Radix Paeoniae Alba concomitant with Radix Bupleuri(1∶1，1∶2，2∶1)were boiled with water.Direct isolation or isolation after being hydrolyzed were performed to determining the isolated benzoic acid and the total glycoside of the Radix Paeoniae Alba respectively with HPLC.[Results]The isolated quantity of benzoic acid was more decreased when co-decocting Radix Peaoniae Alba with Radix Bupleuri than single Radix Paeoniae Alba was decocted,however the extracted quantity of the total glycoside was not different.[Conclusion]The extracted quantity of benzoic acid,a harmful constituent,can be lowered significantly when Radix Paeoniae Alba was co-decocted with Radix Bupleuri than single Radix Paeoniae Alba was decocted.

Radix Paeoniae Alba；Radix Bupleuri；compatibiLity；total glycosides of Paeony； benzoic acid;HPLC

R285.5

A

1672-1519(2011)01-0078-02

朱永智（1961-），男，副研究員，從事中草藥化學(xué)科研工作。

2010-11-12）

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