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    不同方法及溶劑對黃連小檗堿的提取效果比較

    2011-02-27 07:00:48席國萍宋國斌
    化學(xué)工程師 2011年7期
    關(guān)鍵詞:小檗重復(fù)性黃連

    席國萍,宋國斌

    (山西大同大學(xué) 醫(yī)學(xué)院,山西 大同 037009)

    黃連為毛莨科植物黃連的干燥根莖,《神農(nóng)本草經(jīng)》列為上品[1]。黃連中的有效成分主要為多種生物堿,如小檗堿、黃連堿、棕櫚堿、藥根堿、表小檗堿、非洲防己堿、小檗亭堿和木蘭花堿等,其中以小檗堿含量最高,約為3%~9%[2]。研究表明,黃連素具有顯著的抗心力衰竭、抗心律失常、降低膽固醇、抑制血管平滑肌增殖、改善胰島素抵抗、抗血小板、抗炎等作用[3]?,F(xiàn)有的小檗堿提取方法主要有:稀硫酸法、石灰乳法、有機溶劑法、液膜法、水提取法等[4]。本文通過比較不同方法及溶劑對黃連小檗堿的提取效果,為黃連資源開發(fā)利用提供參考。

    1 實驗部分

    1.1 藥品與器材

    黃連購于貴陽市花溪區(qū)中西藥結(jié)合第四藥店,經(jīng)鑒定為毛茛科植物黃連;鹽酸小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品中國藥檢所)。

    FA1004電子天平(青島揚中儀器有限公司);UNICOUV-2000型紫外-可見分光光度計(上海肯強儀器有限公司);RE-200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上??婆d儀器有限公司);KS康氏振蕩器(上海圣科儀器設(shè)備有限公司)。

    1.2 黃連的前處理

    將黃連放入50℃烘箱中烘烤變脆,粉碎,放入冰箱保存。

    1.3 黃連總小檗堿提取液及不同方法提取液制備

    1.3.1 黃連總小檗堿提取液的制備 稱取5g黃連,以乙醇為溶劑,提取溫度為60℃,索氏提取器提取至提取液無色,濃縮至干,用60%乙醇溶解定容至50mL,待測。

    1.3.2 不同方法黃連小檗堿提取液的制備

    1.3.2.1 回流提取法 稱取3份黃連,每份5g,在60℃下,分別以5倍體積(W/V)乙醇、丙酮、水溶液,回流提取3次,每次1h;分別合并不同溶劑提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在60℃減壓濃縮至干,用60%乙醇溶解定容至50mL,待測。

    1.3.2.2 振蕩提取法 稱取3份黃連,每份5g,分別以5倍體積(W/V)乙醇、丙酮、水溶液,室溫下振蕩提取3次,每次1h;分別合并不同溶劑提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在60℃減壓濃縮至干,用60%乙醇溶解定容至50mL,待測。

    1.3.2.3 浸提法 稱取3份黃連,每份5g,在60℃下,分別以5倍體積(W/V)乙醇、丙酮、水溶液,提取3次,每次1h;分別合并不同溶劑提取液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在60℃減壓濃縮至干,用60%乙醇溶解定容至50mL,待測。

    1.4 黃連小檗堿測定方法

    1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 以鹽酸小檗堿為標(biāo)準(zhǔn)品,無水乙醇為溶劑,準(zhǔn)確配制濃度為 3、6、9、12、15、18μg·mL-1鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)溶液,于345nm處測定吸光度,由最小二乘法得濃度與吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,并根據(jù)此方程計算黃連小檗堿含量[5]。

    1.4.2 黃連總小檗堿測定 準(zhǔn)確量取1mL黃連總小檗堿提取液,于345nm處測定吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算小檗堿濃度及小檗堿總含量。

    1.4.3 不同方法黃連提取液中小檗堿含量測定 準(zhǔn)確量取1mL提取液,于345nm處測定吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,由對應(yīng)的吸光度計算小檗堿濃度及小檗堿含量。

    1.5 黃連小檗堿提取率的計算

    1.6 提取率重復(fù)性實驗

    根據(jù)1.5結(jié)果,選擇提取效果最好的方法及溶劑進行重復(fù)性實驗,檢測提取效果的穩(wěn)定性。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

    根據(jù)1.4.1結(jié)果,用最小二乘法作線性回歸,得鹽酸小檗堿濃度C(μg·mL-1)與吸光度A的關(guān)系:A=0.05492C-0.03143,R=0.9997

    2.2 黃連總小檗堿含量

    按1.4.2方法,黃連總小檗堿含量經(jīng)測定為102.36mg·-1g,根據(jù)此結(jié)果計算不同提取液中小檗堿的提取率。

    2.3 不同溶劑和方法下黃連小檗堿的提取率

    按1.4.3方法,測定不同提取液中黃連小檗堿的含量,按1.5方法計算小檗堿提取率,結(jié)果見表1。

    表1 不同方法和溶劑對黃連小檗堿的提取率Tab.1 Extraction rates of berberine in rhizoma of Coptis chinensis Franch by different ways and solvents

    由表1可以看出,回流提取和乙醇分別在所考察方法及溶劑中提取效果最好,采用回流提取法,乙醇作為提取溶劑,黃連小檗堿的提取率達81%以上。

    2.4 提取率重復(fù)性實驗

    采用1.3.2.1方法,乙醇作為提取溶劑,做3次平行實驗,計算每次黃連小檗堿的提取率,考察提取效果的穩(wěn)定性,實驗結(jié)果見表2。

    表2 提取率重復(fù)性實驗結(jié)果Tab.2 Repetitivenessexperimentresultsontheextractionrate

    由表2可以看出,回流提取作為提取方法,乙醇為溶劑,提取效果重復(fù)性良好。

    3 結(jié)論

    本文分析比較了不同方法及溶劑對黃連小檗堿的提取效果,實驗結(jié)果表明:采用回流提取法,乙醇作為提取溶液,黃連小檗堿提取率和重復(fù)性良好。

    [1]岑志芳,何作民.滲漉法提取黃連中小檗堿的工藝研究[J].佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版),2009,27(4):79-81.

    [2]王傳芬.黃連中小檗堿的提取工藝[J].華西藥學(xué)雜志,2007,22(4):476-477.

    [3]王志華,陳碧,陳新玉.黃連提取方法的試驗研究[J].實用藥物與臨床,2008,11(3):191-192.

    [4]黃志強,周民杰.黃連中小檗堿的超聲波提取工藝[J].化學(xué)工程師,2006,(8):54-56.

    [5]孫波,張永光.正交法優(yōu)選黃連中鹽酸小檗堿的提取工藝[J].海峽藥學(xué),1999,11(2):100-101.

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