支氣管肺泡灌洗液的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查

弓長麗,刁斌斌

（吉林省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,吉林長春 130021）

我院2年前開展了支氣管肺泡灌洗液的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查[1,2],為間質(zhì)性肺病及肺部創(chuàng)傷、感染的診斷提供了有效依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 臨床資料 本院2008年1月-2009年6月,43例門診及住院患者,年齡21-73歲;男19例,女24例;其中特發(fā)性肺纖維化7例,過敏性肺泡炎6例,自身免疫病伴肺間質(zhì)纖維化20例,支氣管哮喘3例,開胸手術(shù)后肺損傷5例,嗜酸粒細(xì)胞增多綜合征2例。

1.2 方法

1.2.1 BALF的采集 常規(guī)纖支鏡氣道檢查后在活檢刷檢前做BAL。對彌漫性間質(zhì)性肺疾病通常選擇右肺中葉（B4或B5）、左肺舌葉,局限性肺病變則在相應(yīng)支氣管肺段進(jìn)行BAL。首先對擬在要灌洗肺段經(jīng)活檢孔注入2%利多卡因局部噴霧麻醉,將纖支鏡嵌入右肺中葉,按20mL/次的灌注量,分3次注入37℃生理鹽水,回收BALF,用雙層無菌紗布過濾,記量。收集到的BALF立即放于周圍被冰水包圍（-4℃）的容器中,以避免細(xì)胞破壞,在30 min內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室,通常在2-3 h內(nèi)處理。

1.2.2 計(jì)數(shù) 冰袋包裹的BALF,溫度計(jì)4℃左右,在普通離心機(jī)離心10 min;取少量BALF置于Neubauer計(jì)數(shù)臺上進(jìn)行總細(xì)胞計(jì)數(shù)。以每毫升回收液的細(xì)胞數(shù)和灌洗液回收細(xì)胞的絕對數(shù)表示。BALF的細(xì)胞學(xué)檢查:用冰袋包裹溫度計(jì)檢測,達(dá)到4℃左右,在普通離心機(jī)離心10min,棄上清,制成細(xì)胞懸液。用瑞氏-姬姆薩染色液（BASO）鋪滿玻片上有膜的部分,染色1min后加入緩沖液,混勻2-3 min。水洗后自然干燥,封片。油鏡下,計(jì)數(shù) 200個細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSSl1.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

43例患者BALF的細(xì)胞學(xué)檢查中,7例特發(fā)性肺纖維化及20例自身免疫病伴肺間質(zhì)纖維化患者以巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞增高為主（P＜0.05）;6例過敏性肺泡炎以巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞增高為主（P＜0.05）;3例支氣管哮喘患者幾類細(xì)胞百分比均增高,其中以嗜酸性粒細(xì)胞增高為主（P＜0.05）;5例開胸手術(shù)后肺損傷以巨噬細(xì)胞增高為主（P＜0.05）;2例嗜酸粒細(xì)胞增多綜合征以嗜酸性粒細(xì)胞增高為主（P＜0.01）。細(xì)胞分類百分比及細(xì)胞形態(tài)見表1及圖1-3。

表1 43例患者BALF的細(xì)胞學(xué)分類檢查（%）

3 討論

間質(zhì)性肺病是一組臨床特征相似免疫病理過程各異的眾多肺疾病組成的疾病譜,病因不明者占65%,其發(fā)病機(jī)理至今尚未完全清楚[3]。間質(zhì)性肺病的早期表現(xiàn)為肺泡炎,晚期為彌漫性肺纖維化。此病的早期診斷、早期治療是決定預(yù)后與轉(zhuǎn)歸的關(guān)鍵[4]。而通過BAL來收集檢測直接獲取患者肺內(nèi)炎癥免疫效應(yīng)細(xì)胞,探討肺局部炎癥免疫過程是一個有效的檢測方法[5],對間質(zhì)性肺病的發(fā)病機(jī)制,免疫病理過程以及診斷、鑒別診斷和判定病變的活動性和預(yù)后估計(jì)都具有重要的臨床價(jià)值。

細(xì)胞分類及計(jì)數(shù)是最基礎(chǔ)的檢查,可以為臨床提供最可靠的原始資料。我們從研究中發(fā)現(xiàn),特發(fā)性及繼發(fā)性肺纖維化患者以巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞增高為主;過敏性肺泡炎以巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞增高為主;支氣管哮喘患者幾類細(xì)胞百分比均增高,其中以嗜酸性粒細(xì)胞增高為主;開胸手術(shù)后肺損傷以巨噬細(xì)胞增高為主;嗜酸粒細(xì)胞增多綜合征以嗜酸性粒細(xì)胞增高為主。根據(jù)以上特點(diǎn)可以為疾病的診斷、鑒別診斷及判斷預(yù)后提供依據(jù)。

有研究者將支氣管肺泡灌洗液（BALF）檢查稱之為“液性肺活檢”,表明它具有較重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。近年來,無論從BALF檢測范圍和檢測項(xiàng)目上都有了長足的發(fā)展。從BALF中細(xì)胞學(xué)、單克隆抗體標(biāo)記T淋巴細(xì)胞細(xì)胞亞群、可溶性蛋白、酶類到細(xì)胞因子,生物活性介質(zhì)方面等檢測,提供了大量研究結(jié)果,這對某些肺疾病的發(fā)展機(jī)制、診斷、鑒別診斷和病變活動性、療效及預(yù)后判定等已顯示出重要的臨床價(jià)值[6,7]。由于標(biāo)本量較少,我們的研究結(jié)果可能會出現(xiàn)偏差,我們將在進(jìn)一步的研究中擴(kuò)大例數(shù)并進(jìn)行細(xì)胞因子以及腫瘤標(biāo)志物等的檢測,更好的為臨床提供有效的診斷依據(jù)。

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