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    中藥天麻鑒定研究新進(jìn)展

    2011-02-21 08:39:34強(qiáng)
    關(guān)鍵詞:中藥

    苗 強(qiáng)

    齊魯石化醫(yī)院集團(tuán)中心醫(yī)院,山東淄博 255400

    中藥天麻(rhizoma gastrodiae)為蘭科(orchidaceae)植物天麻(gastrodia elata BL)的干燥塊莖,《中國(guó)藥典》各版列為收載品種,性平,味甘,歸肝經(jīng),有息風(fēng)止痙、平抑肝陽(yáng)、祛風(fēng)通絡(luò)之功,為治眩暈、頭痛之要藥[1],廣泛用于治療頭痛、周期性偏頭痛、眩暈、破傷風(fēng)、癲癇、神經(jīng)痛、偏癱,以及其他神經(jīng)性疼痛和神經(jīng)疾病,為臨床常用貴重藥之一。

    天麻,原名赤劍,最早載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為上品。歷代本草記載與現(xiàn)代所用天麻相符[2]。近年來(lái)由于天麻野生藥源緊缺,栽培天麻逐漸上市。于是藥材市場(chǎng)上出現(xiàn)偽品、野生天麻、栽培天麻,為了更好地區(qū)分這些藥材,筆者對(duì)天麻的鑒定研究進(jìn)行綜述。

    1 理化鑒定

    1.1 光譜鑒定

    劉剛等[3]用傅里葉變換紅外光譜儀對(duì)天麻進(jìn)行了測(cè)定,并建立了天麻的紅外光譜圖譜;余艷等[4]用紅外光譜對(duì)天麻及其偽品進(jìn)行了鑒別,發(fā)現(xiàn)能很好地區(qū)分天麻及其偽品。高夏紅等[5]用X衍射法測(cè)定天麻的X射線指紋圖譜,并利用圖譜及其相似度分析法鑒別野生和栽培天麻非常有效。Budzikiewicz等[6]利用紫外光譜對(duì)天麻及其偽品進(jìn)行了鑒別,發(fā)現(xiàn)在190~500 nm范圍內(nèi)能很好地區(qū)分天麻及其偽品。袁衛(wèi)梅等[7]采用FI-NMR波譜儀分別測(cè)定了8個(gè)不同來(lái)源天麻特征總提取物(CGE)的1H-NMR指紋圖,從天麻特征總提取物中分得對(duì)羥基苯甲醇和天麻苷,經(jīng)光譜解析及與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比較,鑒定了其結(jié)構(gòu),從而實(shí)現(xiàn)了天麻的1H-NMR指紋圖的解析[7-9]。

    秦海林等[10]在NMR波譜儀上測(cè)定天麻的1H-NMR指紋圖,建立核磁共振氫譜法鑒別植物中藥的理論和方法,作為鑒別植物中藥的參照及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)圖譜。

    梁惠玲等[11]利用EI-MS法對(duì)天麻及其偽品進(jìn)行鑒別,發(fā)現(xiàn)真品的主要成分對(duì)羥基苯甲醇的衍生物的甲醇提取物指紋特征性強(qiáng),存在(m/z124)基峰及其進(jìn)一步的裂解碎片峰(m/z107和m/z95)。此法為天麻真?zhèn)舞b別提供了可靠依據(jù)。

    1.2 色譜鑒定

    石上梅等[12]對(duì)天麻藥材HPLC指紋圖譜進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)天麻的指紋圖譜用于鑒定天麻藥材很靈活有效。袁敏等[13]采用裂解高分辨氣相色譜法對(duì)天麻及其偽品進(jìn)行了分析和比較,發(fā)現(xiàn)每種中藥材在特定條件下均有不同的裂解色譜圖,可用于鑒別。

    2 生物鑒定

    2.1 蛋白質(zhì)電泳鑒定

    張曉勤等[14]采用雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)對(duì)天麻不同部位進(jìn)行了比較蛋白質(zhì)組分析與鑒定,對(duì)新生球莖中表達(dá)量明顯增加的5個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)用基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF.MS)進(jìn)行肽質(zhì)量指紋譜的分析,并進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定與功能預(yù)測(cè);王德先等[15]利用毛細(xì)管電泳法鑒別天麻及其4種常見(jiàn)偽品,電泳分離條件為24 mmol/L硼酸鹽(pH=9.4),運(yùn)行電壓為16 kVF,結(jié)果很容易鑒別,方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快速,可以作為中藥天麻的質(zhì)量控制方法。

    2.2 DNA鑒定

    李長(zhǎng)福[16]、關(guān)萍[17]、王曉玲[18]分別對(duì)天麻 DNA進(jìn)行了提取,為天麻生物學(xué)鑒定奠定基礎(chǔ);王德信等[19]建立了天麻PCR反應(yīng)體系,為天麻在DNA方面的鑒定作出了貢獻(xiàn)。陳祖云等[20]利用簡(jiǎn)單序列重復(fù)(SSR)分子標(biāo)記可有效地區(qū)分純合子及雜合子,從而使其能夠在分子水平鑒定野生和栽培天麻。陶鈞等[21]應(yīng)用改進(jìn)的RAPD方法測(cè)定了名貴中藥材天麻基因組DNA指紋圖譜用于天麻的真?zhèn)舞b別。

    3 其他

    3.1 性狀鑒別

    呈長(zhǎng)橢圓形,扁縮而略彎曲,長(zhǎng) 4~12 cm,寬 2~6 cm,厚1~3 cm。一端有紅棕色干枯牙苞,習(xí)稱“鸚哥嘴”,有的為開(kāi)花后殘留的莖基;另一端有自母麻脫落后的圓臍形瘢痕,習(xí)稱“肚臍眼”。外皮剝落后部分殘存,表面黃白色或淡黃棕色,可見(jiàn)數(shù)圈點(diǎn)狀的退化須根痕組成的橫紋、麻點(diǎn)皺紋和輪節(jié)。質(zhì)堅(jiān)實(shí),半透明,不易折斷,斷面較平坦,角質(zhì)樣,有光澤,嚼之發(fā)脆有黏性。概括為“天麻長(zhǎng)圓扁稍彎+點(diǎn)狀環(huán)紋十余圈+頭頂莖基鸚哥嘴+底部瘢痕似臍圓”。鄧恒青等[22]通過(guò)對(duì)天麻環(huán)節(jié)紋的觀察,記錄天麻野生品、家種品1代、家種品3代環(huán)節(jié)的數(shù)目、節(jié)距(節(jié)間長(zhǎng)度)以及節(jié)上點(diǎn)數(shù)(節(jié)上潛伏芽的數(shù)目),應(yīng)用Excel軟件對(duì)記錄的數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析。為天麻藥材品質(zhì)、規(guī)格、等級(jí)鑒別提供了新的依據(jù)和研究方法[22]。

    3.2 顯微鑒別

    橫切面最外層有淺棕色的后生表皮組織,下皮面2~3列由栓化細(xì)胞組成,細(xì)胞呈切向排列。皮層為十?dāng)?shù)列多角形細(xì)胞,有的含草酸鈣針晶束。不具內(nèi)皮層。中柱大,散在韌皮部維管束,周韌型或外韌型。每束導(dǎo)管兩至數(shù)個(gè)環(huán)紋或螺紋非木化。薄壁細(xì)胞含多糖類塊狀物,遇碘液顯暗棕色,有的薄壁細(xì)胞含草酸鈣針晶柬。髓部細(xì)胞類圓形。鸚哥嘴、環(huán)節(jié)紋、肚臍痕是天麻藥材性狀鑒別的三大要點(diǎn)。鄧恒青等[23]針對(duì)這三個(gè)要點(diǎn)的顯微鑒別特征做了補(bǔ)充性研究,為天麻的顯微鑒定提供了新的參考依據(jù)。

    栽培天麻、野生天麻、偽品在理化鑒定和生物鑒定方面的研究使天麻的鑒定較為容易,隨著新技術(shù)的不斷出現(xiàn),天麻的鑒定技術(shù)也將會(huì)有新的發(fā)展。

    [1]高學(xué)敏.中藥學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2002:478-479.

    [2]石俊英.中藥鑒定學(xué)[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2006:222-223.

    [3]劉剛,董勤,俞帆,等.天麻的傅里葉變換紅外光譜鑒別研究[J].光譜與光譜分析,2004,24(3):308-310.

    [4]余艷,劉剛,董勤.天麻及其偽品的紅外光譜鑒別[J].云南師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2004,24(3):60-62.

    [5]高夏紅,郭靈虹,李暉.X衍射指紋圖譜及其相似度分析用于鑒別野生和栽培天麻[J].化學(xué)研究與應(yīng)用,2005,17(1):58-60.

    [6]Budzikiewicz H,Djerassi C,Williams DH,et al.Mass Spectrometry of Organic Compounds[M].San Francisco:Hoiden-Day Inc,1967:121.

    [7]袁衛(wèi)梅,秦海林.天麻、肉桂和牡丹皮的1H-NMR指紋圖解析[J].河南中醫(yī)藥學(xué)刊,2000,15(4):9-11.

    [8]方濤,朱開(kāi)賢.用紫外光譜鑒別天麻真?zhèn)蝃J].山西中醫(yī),1991,7(1):28-29.

    [9]秦海林,趙天增,都恒青,等.核磁共振波法鑒定天麻及其偽品[J].中藥材,1994,17(6):23-24.

    [10]秦海林,趙天增.核磁共振氫譜鑒別植物中藥的研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1999,34(1):58-62.

    [11]梁惠玲,吳玉,易元芬,等.EI-MS法鑒定中藥天麻的真?zhèn)蝃J].中草藥,1996,27(6):367-369.

    [12]石上梅,孫婕,杜慶鵬,等.天麻藥材HPLC指紋圖譜的研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,2005,140(10):739-741.

    [13]袁敏,張鉻光,曾志.裂解色譜法測(cè)定中藥指紋科譜[J].華南師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2003,(1):66-70.

    [14]張曉勤,胡金勇,曾英,等.天麻蛋白質(zhì)的雙向電泳和肽質(zhì)量指紋譜分析與鑒定[J].云南植物研究,2004,26(1):89-95.

    [15]王德先,楊更亮,劉海光,等.天麻及其偽品的毛細(xì)管電泳鑒別及天麻素的測(cè)定[J].中草藥,2001,32(4):351-352.

    [16]李長(zhǎng)福,葛正龍,黃燮南,等.天麻DNA的快速提取方法[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,27(3):226-227.

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    [21]陶鈞,傅鐵祥,羅志勇,等.天麻特異DNA序列的克隆及其在天麻鑒定中的應(yīng)用[J].生物工程學(xué)報(bào),2006,22(4):587-591.

    [22]鄧恒青,周漢華,童紅,等.天麻環(huán)節(jié)紋的觀察比較及數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析[J].中國(guó)民間民族醫(yī)藥,2009,18(11):22-23.

    [23]鄧恒青,周漢華,代蕾.天麻顯微鑒定拾遺[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥,2009,18(13):9.

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