淺談體外診斷試劑質(zhì)量體系中企業(yè)參考品的管理

毛省俠 郭準(zhǔn) 陜西省食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械處 （西安 7006） 國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品認(rèn)證管理中心 （北京 0006）

0.引言

我國體外診斷試劑產(chǎn)業(yè)經(jīng)過20多年的發(fā)展，從無到有，從弱到強，已具備產(chǎn)業(yè)規(guī)模發(fā)展條件，近年來呈現(xiàn)出高速增長趨勢。本文旨在針對體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量管理體系檢查中存在的普遍問題和現(xiàn)狀，提出目前企業(yè)參考品質(zhì)量體系管理的控制要點，為企業(yè)和監(jiān)管部門提供參考。

1.體外診斷系統(tǒng)中的參考品

在我國，體外診斷醫(yī)療器械是指試劑、試劑產(chǎn)品、校準(zhǔn)品、控制品、試驗工具、儀器、器具、設(shè)備或系統(tǒng)的醫(yī)療器械，它們可單獨或組合使用，對從人體提取的樣本（包括捐獻的血液或組織）在體外進行檢查，以提供下列信息為唯一或主要目的：① 生理或病理狀態(tài)；②先天畸形狀況；③ 確定安全性和對可能接受人的相關(guān)性；④ 監(jiān)測治療效果。

體外診斷系統(tǒng)可以理解為某一檢查項目涉及到的所有體外診斷醫(yī)療器械的組合，這個組合按照方法學(xué)、檢查對象、預(yù)期目的和所使用的檢測技術(shù)的不同而包含不同的組成部分，缺少其中任何一個組成元素都不能實現(xiàn)預(yù)期測量目的。通常，檢測系統(tǒng)包括完成一個項目檢測所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、質(zhì)量控制、操作人員等組合。檢測系統(tǒng)中儀器、試劑、參考測量系統(tǒng)（校準(zhǔn)品和質(zhì)控品）等密不可分，形成了一個全封閉系統(tǒng)，只有在此系統(tǒng)內(nèi)檢測結(jié)果才有效。

為獲得有用且可靠的測量結(jié)果，必須有參考測量系統(tǒng)做支持。生物樣品中量的測量需要參考測量系統(tǒng)，以使檢測結(jié)果具有可比性并可溯源至最高計量學(xué)水平的測量標(biāo)準(zhǔn)。參考測量系統(tǒng)通常包括：①生物樣品中被分析物的定義及其測量結(jié)果的臨床用途；②用于測量人類樣品中選定量的參考測量程序；③適合選定量的參考物質(zhì)。

體外診斷試劑中參考物質(zhì)用于校準(zhǔn)測量系統(tǒng)，評價測量程序或為材料賦值，是實現(xiàn)體外診斷試劑臨床檢測及監(jiān)督檢驗結(jié)果準(zhǔn)確一致的主要工具，也是保證量值有效傳遞的計量實物標(biāo)準(zhǔn)。

在實際應(yīng)用中，由于種類多、范圍廣、臨床使用重要性強，且使用目的差別大，多數(shù)產(chǎn)品存在沒有相對應(yīng)的參考方法和標(biāo)準(zhǔn)品難以獲得的問題。因此，在沒有國家標(biāo)準(zhǔn)品/質(zhì)控品的情況下，允許體外診斷試劑企業(yè)根據(jù)產(chǎn)品特點及臨床使用目的進行研究設(shè)計、制備、管理企業(yè)參考品，用于產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

2.國內(nèi)體外診斷試劑生產(chǎn)的現(xiàn)狀

我國體外診斷試劑行業(yè)競爭完全市場化。國外企業(yè)依靠產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、技術(shù)含量高以及高效、精確的配套儀器，在體外診斷試劑行業(yè)中的市場份額達到50%以上，在國內(nèi)三級醫(yī)院的高端市場占據(jù)壟斷地位，價格普遍比國產(chǎn)同類產(chǎn)品高1～5倍。國產(chǎn)產(chǎn)品具有價格低、售后服務(wù)好的優(yōu)勢，用戶集中在二級醫(yī)院和基層醫(yī)院等中低端市場。我國共有體外診斷試劑企業(yè)400余家，數(shù)量多、規(guī)模小、整體質(zhì)量和技術(shù)水平較低、競爭實力弱。隨著國內(nèi)企業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)技術(shù)水平不斷提高，部分企業(yè)的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達到國際先進水平，國產(chǎn)產(chǎn)品的市場份額正在不斷擴大，市場逐步向龍頭企業(yè)集中，行業(yè)集中度不斷提高，但割據(jù)競爭的格局沒有改變。

目前我國體外診斷試劑和生物醫(yī)學(xué)試劑主要依賴進口，即使是國產(chǎn)試劑，其主要原料、參考品也嚴(yán)重依賴進口。除了試劑，在檢測儀器方面，國外企業(yè)更是占據(jù)主導(dǎo)位置。其以精密度較高的自動化分析儀器配套專用試劑的銷售模式，基本是原裝儀器配原裝試劑，儀器、試劑和校準(zhǔn)品跟檢測系統(tǒng)密不可分，形成了一個全封閉系統(tǒng)。這種“封閉系統(tǒng)”，由于具有操作簡便、準(zhǔn)確度高并能較好解決溯源性和準(zhǔn)確性的特點，占據(jù)了高端的檢驗產(chǎn)品市場，收費相對較高。

近幾年，國內(nèi)體外診斷試劑企業(yè)快速發(fā)展，逐步打破國外產(chǎn)品壟斷的局面。但國內(nèi)企業(yè)由于研發(fā)能力有限，多數(shù)只能生產(chǎn)試劑，或采取進口試劑大規(guī)模分裝的生產(chǎn)模式，提供一些中檔試劑產(chǎn)品和部分檢測儀器。因此，國內(nèi)生產(chǎn)的試劑普遍適用于開放系統(tǒng)。由不同廠家提供的儀器、試劑、校準(zhǔn)品或質(zhì)控品組成的開放式檢測系統(tǒng)，如果沒有經(jīng)過溯源、室間質(zhì)量評價或是通過參考方法的校準(zhǔn)，其檢測結(jié)果不具有時間和空間上的可比性。

國內(nèi)試劑企業(yè)的這種發(fā)展減少了對進口產(chǎn)品的依賴，進一步降低了檢查費用，適合國情。但要保證實驗室檢驗的質(zhì)量，就需要建立儀器標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)，設(shè)定可行的標(biāo)準(zhǔn)化程序，開展室間質(zhì)量評價?，F(xiàn)在美國FDA及歐盟有關(guān)機構(gòu)對檢測儀器審批時批準(zhǔn)的不是儀器，而是儀器標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)，只有具備標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)的大量資料才能批準(zhǔn)進入市場。

因此，在目前的發(fā)展階段，需要建立適合國情的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，通過建立自己的參考物質(zhì)、參考方法進行校準(zhǔn)，從而形成一套既開放又科學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)體系。目前，我國尚未出臺體外診斷試劑產(chǎn)品技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，難以標(biāo)準(zhǔn)化的主要原因是大多數(shù)品種尚未建立可靠的參考方法。另外，標(biāo)準(zhǔn)值的建立和定值困難，也是造成體外診斷試劑難以標(biāo)準(zhǔn)化的原因。以前的老方法與新的自動化方法無可比性，即使使用同樣的抗體和標(biāo)準(zhǔn)物，用手工方法和用全自動方法分析時，也會得到不同的結(jié)果。在生物體液中可有異源性的抗原物質(zhì)，標(biāo)本中常含有蛋白質(zhì)前體、剪接的變化、碎片及被分析物的復(fù)合物形式存在，多數(shù)激素和腫瘤標(biāo)志物還有內(nèi)在的異質(zhì)物，使得標(biāo)準(zhǔn)品和被分析物很難有一致基質(zhì)，造成標(biāo)準(zhǔn)品難以獲得。因此亟待政府有關(guān)技術(shù)部門、企業(yè)和實驗室共同努力。

2007年國家食品藥品監(jiān)督管理局出臺體外診斷試劑監(jiān)管的一系列法規(guī)，并發(fā)布具有操作性的指南文件，國內(nèi)試劑管理開始走上正軌。在監(jiān)管中，我們發(fā)現(xiàn)企業(yè)普遍存在的問題是對參考品管理的困惑，尚需進一步研究探討完善。

(1)在質(zhì)量管理體系考核中發(fā)現(xiàn)，很多企業(yè)對企業(yè)參考品管理思路不清晰，有的企業(yè)甚至回避回答有關(guān)參考品的問題。企業(yè)參考品的設(shè)計資料不完整。很多企業(yè)忽視或誤解醫(yī)療器械質(zhì)量體系對產(chǎn)品設(shè)計控制的要求，主要表現(xiàn)在以下幾個方面：有的企業(yè)認(rèn)為單純進口國外產(chǎn)品進行分裝，根本不存在產(chǎn)品的設(shè)計控制，或?qū)σM產(chǎn)品的設(shè)計思路不求甚解，甚至沒有相關(guān)的參數(shù)和技術(shù)資料；還有些企業(yè)僅有醫(yī)療器械通用的設(shè)計控制程序文件，根本未體現(xiàn)自己產(chǎn)品在設(shè)計過程中的記錄或驗證及試驗資料。

(2)在我國，可用的參考物質(zhì)（標(biāo)準(zhǔn)品）數(shù)量有限，即使有國際約定參考物質(zhì)，但由于價格昂貴，企業(yè)也很少采用。進口試劑分裝企業(yè)雖有隨附的少量質(zhì)控品，但不能滿足企業(yè)檢測需要。企業(yè)需取得質(zhì)控血清等人體樣本進行自行配制，由于目前這些物料的來源缺少明確法規(guī)依據(jù)，使得企業(yè)未將質(zhì)控血清等作為物料管理，只和提供方醫(yī)療機構(gòu)簽署技術(shù)合作協(xié)議，并且對原材料的定值、生物安全性規(guī)定不明確。

(3)溯源性問題。在體外診斷試劑研制核查中發(fā)現(xiàn)，境內(nèi)試劑生產(chǎn)商僅少數(shù)能遵照ISO17511的要求，多數(shù)沒有完整的溯源，驗證準(zhǔn)確度只能通過與市售產(chǎn)品的比對進行；有的企業(yè)參考品研制的溯源鏈只是按照規(guī)定畫畫圖，并未進行實質(zhì)性的設(shè)計；也有企業(yè)沒有參考品的研發(fā)資料。

(4)部分企業(yè)質(zhì)控品管理職責(zé)不明確，研發(fā)部和質(zhì)檢部未分清各自職責(zé)。未形成體系化的管理規(guī)程，保管、配制、檢驗、使用、復(fù)驗記錄不規(guī)范。

(5)重組抗原配制假病毒顆粒的使用需要進一步研究其可行性。

3.企業(yè)參考品的質(zhì)量體系管理探討

3.1 企業(yè)參考品的種類

標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品三者同為參考物質(zhì)，但三者并非用一個概念，他們有各自不同的應(yīng)用場合。

標(biāo)準(zhǔn)樣品reference material(RM)根據(jù)GB/T15000.2-94 標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則中的定義，是具有足夠均勻的一種或多種化學(xué)的、物理的、生物學(xué)的、工程技術(shù)的或感官的等性能特征，經(jīng)過技術(shù)鑒定，并附有說明有關(guān)性能數(shù)據(jù)證書的一批樣品。有證標(biāo)準(zhǔn)樣品certified reference material (CRM )是具有一種或多種性能特征，經(jīng)過技術(shù)鑒定附有說明上述性能特征的證書，并經(jīng)國家標(biāo)準(zhǔn)化管理機構(gòu)批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)樣品。在我國，法定鑒定機構(gòu)是中國藥品生物制品檢測所。

校準(zhǔn)物（品）按照《體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》中定義，其值在一個校準(zhǔn)函數(shù)中用作獨立變量的參考物質(zhì)。應(yīng)具有定值和已知的測量不確定度，其目的應(yīng)是校準(zhǔn)某一測量系統(tǒng)，從而建立此系統(tǒng)測量結(jié)果的計量學(xué)溯源性。

質(zhì)控物（品）用于體外診斷的質(zhì)量控制物質(zhì)，是一種旨在用于醫(yī)學(xué)用途的檢測系統(tǒng)中使用的物質(zhì)、材料、物品或設(shè)備，其目的是評價或驗證測量精密度、測量準(zhǔn)確度、由于試劑或分析儀器的變化檢測系統(tǒng)可能產(chǎn)生的分析偏差等性能特征。質(zhì)量控制物質(zhì)有不同分類，按有無參考值分為定值質(zhì)控品、非定值質(zhì)控品，定值質(zhì)控品又包括真實性/正確性質(zhì)控物質(zhì)和室內(nèi)質(zhì)控品，非定值質(zhì)控品就是精密度質(zhì)控品，用于能力驗證、實驗室內(nèi)質(zhì)量控制。

參考品由于種類多、范圍廣、臨床使用重要性強、使用目的差別大等原因，多數(shù)產(chǎn)品存在著沒有相對應(yīng)的參考方法和標(biāo)準(zhǔn)品難以獲得的問題。因此，在沒有國家標(biāo)準(zhǔn)品/質(zhì)控品的情況下，企業(yè)可以根據(jù)產(chǎn)品特點及臨床使用目的進行設(shè)計、制備、管理企業(yè)質(zhì)控品。對于有國家參考品的產(chǎn)品，研發(fā)單位可以購買國家參考品作為半成品和成品檢定的樣本，參考國家標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定的項目及指標(biāo)，并根據(jù)研究工作的結(jié)論設(shè)定該產(chǎn)品的半成品和成品檢定項目及指標(biāo)，也可以用經(jīng)國家參考品標(biāo)定過的企業(yè)參考品作為半成品和成品檢定的樣本。

企業(yè)參考品主要有校準(zhǔn)品、陰、陽性對照品和質(zhì)控品。對于企業(yè)參考品，應(yīng)首先保證其溯源性，對無溯源性的參考品的建立，應(yīng)選擇具有溯源性的參考方法來確定其參考值，其次關(guān)注其成分、標(biāo)定（或校準(zhǔn)）過程和標(biāo)定結(jié)果，才能使標(biāo)準(zhǔn)化達到一定的水平。

3.2 企業(yè)參考品的溯源性要求應(yīng)在設(shè)計階段建立

按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細則（試行）》要求，使用一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)能夠?qū)α恐颠M行溯源。

一級參考測量程序是具有最高計量學(xué)特性的參考測量程序，它應(yīng)是基于特異、無需同量校準(zhǔn)而能溯源至SI單位、具有較低不確定度的測量原理。目前認(rèn)為可用于一級參考測量程序的測量原理僅限于同位素稀釋/質(zhì)譜（ID/MS）、庫侖法、重量法、滴定法和依數(shù)性（如凝固點降低）測量等。一級參考物質(zhì)是指用權(quán)威方法或用兩種以上不同原理的標(biāo)準(zhǔn)方法以及其他可靠準(zhǔn)確方法定值，不確定度具有最高水平，均勻性、穩(wěn)定性良好，它在溯源鏈中起著承上啟下的作用，許多二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是通過一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溯源至國家基準(zhǔn)的。一級參考物質(zhì)一般是高度純化的被測物質(zhì)。

二級參考測量程序是經(jīng)充分論證、其不確定度能滿足特定要求，能用于低一級測量程序評價和參考物質(zhì)鑒定的測量程序，二級參考測量程序用一級參考物質(zhì)校準(zhǔn)。二級參考物質(zhì)是用與一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行比較測量的方法或一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值，其不穩(wěn)定度和均勻性未達到一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水平，能滿足一般測量的需要。

一級和二級參考測量程序的建立和維持、一級和二級參考物質(zhì)的制備一般由國際和國家計量機構(gòu)及經(jīng)認(rèn)證的參考實驗室完成。一級和二級參考物質(zhì)一般是經(jīng)計量權(quán)威機構(gòu)和行政機構(gòu)認(rèn)證的有證參考物質(zhì)（CRM）。

企業(yè)外購國家標(biāo)準(zhǔn)品、參考品或商品化的校準(zhǔn)品，應(yīng)明確主要組成成分及生物學(xué)來源、標(biāo)準(zhǔn)品的定值及其溯源性，質(zhì)控品應(yīng)當(dāng)注明是定值還是非定值及質(zhì)控值的范圍（如有）。

企業(yè)制備參考品，在設(shè)計階段就應(yīng)建立溯源性要求。

目前國際上臨床檢驗項目大概有400～600個，ISO 17511規(guī)定了5種溯源的形式。

（1）測量結(jié)果可以溯源至SI的量，達到這一水平的約有25～30類具有很明確的組分的量，例如一些電解質(zhì)（如鉀、鈉、鈣、鎂、氯離子等）、代謝物（如膽固醇、甘油三酯、葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素等）、類固醇激素和一些甲狀腺激素。

（2）測量結(jié)果不能溯源至SI的量有四種情況：①現(xiàn)有一個國際約定的參考測量程序（不能稱為一級參考測量程序）和具有由此程序所賦的值的一個或多個國際校準(zhǔn)物質(zhì)，這一情況適用于具有如血紅蛋白Alc組分的量。②現(xiàn)有一個國際約定的參考測量程序，但沒有國際約定校準(zhǔn)物質(zhì)。這種情況大約有30類的具有凝血因子組分的量。③現(xiàn)有一個有國際約定賦值程序的國際約定校準(zhǔn)物質(zhì)（用作校準(zhǔn)品），但該賦值程序不是國際約定參考測量程序。這一類大約有300類的量。④對于既無參考測量程序又無用作校準(zhǔn)的參考物質(zhì)，制造商可以建立為其產(chǎn)品校準(zhǔn)品賦值的內(nèi)部測量程序和校準(zhǔn)品。這一類大約有300類的量。

目前在進行體外診斷定量檢測時，國內(nèi)依據(jù)的通用溯源性文件是GB/T21415-2008(idt ISO17511)《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》、YY/T0638 (ISO 18153:2003, IDT)《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)中酶催化濃度賦值的計量學(xué)溯源性》。

企業(yè)應(yīng)至少進行一批校準(zhǔn)品靶值的賦值程序及測量不確定度資料，并應(yīng)提供校準(zhǔn)品互換性驗證時對其賦值進行統(tǒng)計學(xué)處理、修訂的研究資料。

定值質(zhì)控品和非定值質(zhì)控品無溯源性要求，但定值質(zhì)控品應(yīng)有賦值準(zhǔn)確度要求。企業(yè)應(yīng)至少進行一批定值質(zhì)控品靶值的賦值程序及測量不確定度資料，并應(yīng)提供定值質(zhì)控品通過多個實驗室測量后進行統(tǒng)計學(xué)處理、修訂的研究資料。

3.3 企業(yè)對參考品的管理職責(zé)

企業(yè)應(yīng)當(dāng)按照《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細則（試行）》的要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，根據(jù)參考品的品種、用途、來源和后續(xù)的處理流程，明確對參考品在采購、制備、標(biāo)定過程、質(zhì)控、貯存、使用等各環(huán)節(jié)的管理流程，配備符合要求的專業(yè)技術(shù)人員，明確職責(zé)和權(quán)限，重要環(huán)節(jié)應(yīng)指定專人負責(zé)。

企業(yè)應(yīng)制定校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的管理文件及相關(guān)記錄，如《校準(zhǔn)品、質(zhì)控品管理規(guī)程及記錄》、《菌種、細胞株、試驗動物、血清等物料的保管、使用、儲存等管理制度和記錄》，加以實施并保持有效運行。

3.4 企業(yè)參考品原材料和物料的質(zhì)量控制

制備企業(yè)參考品的主要原材料如果從其他單位購買，需提供購買合同、供貨方提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量檢定報告，以及對該原材料的質(zhì)量檢定試驗資料。如果物料從不確定的供應(yīng)商處自由采購，應(yīng)該提供支持性的驗證數(shù)據(jù)或認(rèn)證支持性資料。

企業(yè)應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)品、參考品主要原材料的選擇、來源、制備過程、質(zhì)量分析和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究資料，對每一種生物材料的效能、特異性、活性和驗收標(biāo)準(zhǔn)、使用的方法和標(biāo)準(zhǔn)、過程步驟、線性、批間和批內(nèi)差異、可接受的檢驗限度等進行描述。

制備企業(yè)參考品的物料按作用可分為生物原料、生物輔料、化學(xué)原材料、其他物料等，值得注意的是，加工中所用的氣體（如空氣、二氧化碳等）和工藝用水被看做是原材料。

①主要生物原料包括各種活性抗原、抗體、細胞等與生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量最密切相關(guān)的生物原料，應(yīng)當(dāng)按照工藝要求對這類生物原材料進行質(zhì)量檢驗，以保證其達到規(guī)定的質(zhì)量要求。

質(zhì)控血清等有特殊要求的物料的采購和進貨檢驗，必須符合國家血液制品管理的規(guī)定。在質(zhì)量管理體系檢查中發(fā)現(xiàn)，體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)取得質(zhì)控血清或其他來源于人體的組織樣本，是通過提供醫(yī)療機構(gòu)簽訂“技術(shù)合作協(xié)議”證明其來源，有的雙方在協(xié)議中明確了提供物料的滅活要求，多數(shù)醫(yī)療機構(gòu)不提供定值范圍，需要企業(yè)自己確定。

企業(yè)應(yīng)加強對原輔料的生物安全性管理，校準(zhǔn)品、質(zhì)控品生產(chǎn)過程中所用的各種材料，涉及生物安全性時應(yīng)按有關(guān)規(guī)定嚴(yán)格控制。生物源性基質(zhì)（如血清、血漿、羊水等）的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品需進行生物安全性檢測。由企業(yè)或醫(yī)療機構(gòu)測定病原微生物及明確定值范圍，采用國家藥品監(jiān)督管理機構(gòu)認(rèn)可的、不低于國家法定用于血源篩查體外診斷試劑靈敏度的檢測試劑，對校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的HBsAg、HIV抗體、HCV抗體等進行檢測結(jié)果應(yīng)為陰性。企業(yè)應(yīng)當(dāng)對質(zhì)控血清的來源地、定值范圍、滅活狀態(tài)、數(shù)量、保存、使用狀態(tài)等信息有明確記錄，并由專人負責(zé)。

質(zhì)控血清的儲存安全管理，按照易燃、易爆、有毒、有害、具有污染性或傳染性、具有生物活性或來源于生物體的物料管理，應(yīng)當(dāng)參照《國務(wù)院化學(xué)危險品安全管理條例》、《中國生物制品規(guī)程-總則-生物制品生產(chǎn)、檢定用菌中毒種管理規(guī)程》等相關(guān)規(guī)定儲存。這類物料數(shù)量較少，一般存放在危險品庫等專區(qū)的超低溫冰箱中，有明顯的識別標(biāo)識，專人負責(zé)保管和發(fā)放，雙人雙鎖管理。

②生物輔料主要包括牛血清、羊血清、牛血清白蛋白等在生產(chǎn)過程中作為蛋白保護劑用途的一類生物原料，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》上規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求，并且要適合于本企業(yè)的生產(chǎn)。

③化學(xué)原材料參照《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》分析純級別檢定。主要的檢測指標(biāo)包括基本的鹽類檢測、溶液pH值、重金屬檢測、溶解情況檢測、干燥失重的檢測等。也可由供應(yīng)商提供合格報告。

③其他原輔料如鋁箔袋、包裝盒、干燥劑和分裝小瓶等都應(yīng)建立適合本企業(yè)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)?？捎晒?yīng)商提供合格報告。

當(dāng)物料來源發(fā)生變更時，企業(yè)應(yīng)按“供應(yīng)商評估要求”進行重新評估。供應(yīng)商變更和內(nèi)外部工藝變更，必要時要小試，通過試樣確認(rèn)不影響產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量，報告批準(zhǔn)后方可購進。必要時重新進行工藝驗證，關(guān)健原料所產(chǎn)生的所有變更必須進行工藝驗證。

3.5 參考品制備中污染的防護和生物安全性

由于國家參考品缺乏，多數(shù)企業(yè)需制備企業(yè)參考品，用于內(nèi)部質(zhì)控。企業(yè)需要從臨檢中心或醫(yī)療機構(gòu)取得人類或動物樣本，這些具有生物性危險的物料通常可能包括有：①人類與動植物之病原體，如細菌（包括抗藥性細菌）、細菌質(zhì)體、霉菌、病毒（包括致癌病毒、慢性病毒）以及寄生蟲，依危險性可將其分為四級（RG1、RG2、RG3與RG4）。②所有人或動物之血液、血液制品、組織及體液。③所有人或動物來源之組織細胞及其可能含有之病原。④過敏原。⑤毒素（來自動物、植物或霉菌等）。⑥生物技術(shù)產(chǎn)品。⑦病材。⑧被感染之動物及其組織。

因此，當(dāng)企業(yè)制備參考品有上述來源的物料時，在材料準(zhǔn)備和制備的所有區(qū)域應(yīng)有預(yù)防污染和交叉污染的措施。

企業(yè)應(yīng)當(dāng)成立生物安全委員會，對企業(yè)涉及生物安全性的物料進行評估，開展風(fēng)險分析與評價，制定相適應(yīng)的管理規(guī)程，對相關(guān)人員進行生物安全強制培訓(xùn)和訓(xùn)練。

企業(yè)應(yīng)對用于控制污染、交叉污染和空間區(qū)隔(空氣壓力級別、產(chǎn)品和操作的隔離)的規(guī)程和/或設(shè)備的設(shè)計特性進行簡要說明，這對多用途區(qū)域或活性組織的操作區(qū)尤其重要。企業(yè)應(yīng)對開放或封閉系統(tǒng)或供無菌或非無菌操作設(shè)計的通用設(shè)備進行設(shè)計說明，提供平面布置圖能說明生產(chǎn)區(qū)域及房間的相互關(guān)系，周圍環(huán)境的使用狀況。企業(yè)應(yīng)對用于預(yù)防或識別污染和交叉污染的過程控制進行說明。如果有一種以上物質(zhì)（如細胞線、抗原）在獨立區(qū)域或由非專用設(shè)備加工處理，企業(yè)應(yīng)進行說明在此區(qū)域生產(chǎn)的其他產(chǎn)品，并評估用于保證防止交叉污染的測量手段的有效性。清場是一種防止交叉污染的重要手段。

若陰性、陽性對照或其他液體組分涉及生物安全性問題，制備時應(yīng)在相應(yīng)的生物安全實驗室完成。為保證生物安全，在陰性對照的制備過程中增加了經(jīng)60℃加溫1小時的處理過程。

企業(yè)在評價中可參照衛(wèi)生部制定的《人間傳染的病原微生物名錄》的規(guī)定。對尚未列入名錄之病原微生物和實驗活動，由企業(yè)生物安全委員會負責(zé)危害程度評估，確定相應(yīng)的生物安全防護級別。如涉及高致病性病原微生物及其相關(guān)實驗的，應(yīng)經(jīng)國家病原微生物實驗室生物安全專家委員會論證。①目前我國對160種病毒的病毒培養(yǎng)、動物感染實驗、未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作、滅活材料的操作和無感染性材料的操作等實驗活動所需生物安全實驗室級別進行了規(guī)定，并明確了運輸包裝分類（A類和B類）；對6種特殊病毒的危害分類及組織培養(yǎng)、動物感染、感染性材料的檢測等不同實驗活動所需實驗室生物安全級別進行了規(guī)定并明確了包裝運輸要求；對155種病原菌（細菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體分類名）的危害程度分類及大量活菌操作、動物感染實驗、樣本檢測、非感染性材料的實驗等實驗活動所需生物安全實驗室級別和包裝運輸分類進行了規(guī)定。

在操作人血、血液產(chǎn)品、體液及組織時，因可能含有可傳染性病原，所以須在二級實驗室內(nèi)操作，其過程即將所有的血液樣品當(dāng)作潛在性的有傳染性的物質(zhì)一樣操作。特殊的高致病性病原體的采集、制備，應(yīng)當(dāng)按照衛(wèi)生部頒布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》等相關(guān)規(guī)定，具備P3級實驗室等相應(yīng)設(shè)施。

②高風(fēng)險的生物活性物料（病原微生物類、激素類、毒品等）其操作應(yīng)使用單獨的空氣凈化系統(tǒng)，與相鄰區(qū)域保持負壓，排出的空氣不能循環(huán)使用。這些具有污染性和傳染性的物料應(yīng)當(dāng)在受控條件下進行處理，不應(yīng)造成傳染、污染或泄漏等。

③危險度二級及以上的病原體操作應(yīng)當(dāng)配備生物安全柜，空氣應(yīng)當(dāng)進行有效的處理后方可排出。病原體類檢測試劑的陽性血清應(yīng)當(dāng)有防護措施。陰性、陽性血清、質(zhì)?；蜓褐破返奶幚聿僮鲬?yīng)當(dāng)在至少10，000級環(huán)境下進行，與相鄰區(qū)域保持相對負壓，并符合防護規(guī)定。

④校準(zhǔn)品與質(zhì)控品的配制等配液、分裝以及內(nèi)包裝等工藝環(huán)節(jié)，至少應(yīng)在100，000級凈化環(huán)境中進行操作。

3.6 企業(yè)參考品的制備過程控制和過程驗證

企業(yè)應(yīng)建立參考品制備工藝研究及反應(yīng)體系，如樣本類型、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件（如溫度等）、校準(zhǔn)方法（若需要）、質(zhì)控方法等確定的研究資料，臨界值（參考值及參考范圍）的研究確定資料，制定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPs）,重點列出工藝要點及質(zhì)量控制要點。

校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品的制備過程和質(zhì)控項目通常包括：①配制過程控制，可參照國家標(biāo)準(zhǔn)品、WHO標(biāo)準(zhǔn)品或其他級別的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行配制，配制應(yīng)具有量值溯源性。通過分裝前檢驗，對準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線線性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測定值等項目進行質(zhì)控。②分裝過程控制應(yīng)按工藝要求分裝校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品，分裝前確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量，分裝量。③對分裝后的校準(zhǔn)品、陰/陽性對照或質(zhì)控品的半成品進行抽樣檢驗：外觀、分裝量、準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線線性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測定值。對組裝好的成品進行均一性、穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性等方面的檢測。

對制備過程和過程中的質(zhì)控，企業(yè)應(yīng)參考批生產(chǎn)記錄和批檢驗記錄的管理要求，編制參考品生產(chǎn)記錄流轉(zhuǎn)單。企業(yè)應(yīng)建立完整可視的生產(chǎn)過程流程圖，并將該工藝流程中每一步驟中所用的設(shè)備和物料、進行操作的房間或區(qū)域及控制參數(shù)、用于步驟之間轉(zhuǎn)移的方法、加工過程中每一步驟的控制和檢測等信息，標(biāo)明在一個完整的生產(chǎn)記錄流轉(zhuǎn)單上。

如果企業(yè)的加工工藝改變，企業(yè)應(yīng)說明加工過程中的相關(guān)改變，對改變可能引起的影響進行重新驗證，確認(rèn)過程控制中關(guān)鍵控制參數(shù)，并要提供驗證數(shù)據(jù)和結(jié)果。

由于生物制品自身固有的特性，由生物制品制備的標(biāo)準(zhǔn)品的活性等指標(biāo)存在穩(wěn)定性問題，而其穩(wěn)定性直接影響對結(jié)果的判斷。企業(yè)應(yīng)對質(zhì)控品進行穩(wěn)定性研究，規(guī)定有效期和開瓶有效期，并對效期初、效期中、效期末和過效期的質(zhì)控品抽檢以確定全效期的穩(wěn)定性；對在有效期前的一個開瓶有效期周期內(nèi)抽驗的，驗證開瓶有效期的穩(wěn)定性。同時校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的貯存條件和運輸應(yīng)適合該校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的要求和有利于特性量值的穩(wěn)定。

3.7 企業(yè)參考品的特征說明與標(biāo)識要求

參考物質(zhì)的正確使用依賴于對它的說明，所以有必要對參考物質(zhì)的說明性文件進行規(guī)定。一個指定的參考物質(zhì)應(yīng)有一個支持性文件，其中應(yīng)包括說明、測量結(jié)果、使用說明、穩(wěn)定性資料和貯存條件。因此，企業(yè)應(yīng)參照GB/T 19703-2005（IDT ISO 15194:2002）<<體外診斷醫(yī)療器械— 生物源性樣品中量的測量— 參考物質(zhì)的說明》要求，在文件中對企業(yè)參考品的特征進行描述。

企業(yè)外購的商品化標(biāo)準(zhǔn)品、參考品，應(yīng)取得完善的標(biāo)簽和說明書。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的最小包裝單元應(yīng)貼有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)簽；即開容器和外部容器上的標(biāo)簽應(yīng)該符合FN 375的規(guī)定。標(biāo)簽上的產(chǎn)品名稱應(yīng)該符合GB/T 19703第4章的要求。

質(zhì)控品生產(chǎn)企業(yè)，在試劑盒說明書上，應(yīng)標(biāo)明在各種儀器上使用此試劑盒的參數(shù)，便于用戶直接使用，既可以降低用戶成本，又解決結(jié)果的溯源性和準(zhǔn)確性。以避免說明書上只有一種參數(shù)，不宜適應(yīng)眾多牌號儀器的情況。

從上述分析可見，體外診斷試劑中參考品是保證檢測系統(tǒng)質(zhì)量控制的重要手段。國家應(yīng)該加強對參考系統(tǒng)的建設(shè)，對國際國內(nèi)參考測量程序、參考物質(zhì)及參考測量實驗室網(wǎng)絡(luò)進行充分調(diào)研，規(guī)劃建立國家參考測量實驗室；企業(yè)應(yīng)重視體外診斷試劑應(yīng)用的系統(tǒng)性問題。希望體外診斷試劑行業(yè)，能夠進一步規(guī)范管理、蓬勃發(fā)展，使質(zhì)量體系運行能夠?qū)Ξa(chǎn)品性能起到更加有效的保障作用，為臨床應(yīng)用提供更加優(yōu)質(zhì)的診斷產(chǎn)品。

[1]GB/T15000.2-94 標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則

[2]《體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》

[3]《體外診斷試劑生產(chǎn)實施細則（試行）》

[4]GB/T21415-2008(idt ISO17511)《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》

[5]《中國生物制品主要原輔材料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》

[6]《國務(wù)院化學(xué)危險品安全管理條例》、

[7]《中國生物制品規(guī)程-總則-生物制品生產(chǎn)、檢定用菌中毒種管理規(guī)程》

[8]《人間傳染的病原微生物名錄》

[9]《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》

[10]GB/T 19703-2005（IDT ISO 15194:2002）<<體外診斷醫(yī)療器械— 生物源性樣品中量的測量— 參考物質(zhì)的說明》