蝙蝠葛研究現(xiàn)狀

張志環(huán)，惠大勇，李志新，劉立波，許忠海

（伊春林業(yè)科學院，黑龍江 伊春 153000）

蝙蝠葛（Menispermum dauricumDC.）為防己科蝙蝠葛屬落葉纏繞藤本，是良好的垂直綠化材料、野生花卉資源，也是除棚架栽種外，亦可作為墻垣、假山的覆蓋材料，還可依樹種植［1］。同時蝙蝠葛還具有很高的藥用價值，用其來美化庭院、陽臺、廊柱、山坡可以與藥材生產(chǎn)相結(jié)合，以產(chǎn)生一定的經(jīng)濟效益。

蝙蝠葛作為藥用植物其主要藥用部位是蝙蝠根的干燥根莖（又被稱作北豆根），始載于《中國藥植志》［2］。《中國藥典》1977年版始見蝙蝠葛，《中國藥典》2000年版載蝙蝠葛具有清熱解毒、祛風止痛之功效，用于治療咽喉腫痛、腸炎痢疾、風濕痹痛［3］。主產(chǎn)于黑龍江、吉林、遼寧省等地，屬地道北藥。

1 國外研究現(xiàn)狀綜述

國外對蝙蝠葛的研究始于20世紀90年代，主要側(cè)重在它的化學成分、生物堿測定方法、藥理作用等方面。實驗證明蝙蝠葛明是蝙蝠葛中的一級氯化生物堿，通過N－甲基化及N－脫甲基化方式，可以實現(xiàn)阿克吐明與阿克吐米定、蝙蝠葛明與蝙蝠葛米定之間的相互 轉(zhuǎn) 化［4］。 英 國 的 Houghton 等 以 Methanol－20MmKH2PO4（50∶50）等度洗脫，檢測波長254nm來比較研究生物堿類成分在根據(jù)、莖根皮中的組成及含量差別。以上為等度洗脫，但對于成分比較復雜的藥材用梯度洗脫分離效果較好［5］。澳大利亞的Stuppner等用 RP－HPLC，以甲胺－甲醇－磷酸鹽（MeCN－MeOH－phosphate）緩沖梯度洗脫，并研究了分析系統(tǒng)中的流動相的pH值、柱溫等的變化對測定效果的影響［6］。Waldmeier PC等（1995）研究表明PAMD及其提純物DS對腦缺血樣損傷有防護作用，其作用可能與維持細胞鈣穩(wěn)態(tài)有關(guān)，其中對N型和P型鈣通道有較好的選擇性作用［7］。Lingenhohl K等（1997）實驗表明 DS不能阻止小鼠電休克誘發(fā)的抽搐，也不能減小因大腦中動脈閉塞急性缺血引起的神經(jīng)損傷，認為在治療急性腦缺血時P型鈣通道不一定是有效的藥物靶體［8］。Pan QC等（1996）研究表明，Tet具有鈣拮抗作用和膜調(diào)節(jié)作用，可以干擾P－gp的藥物外排機制，在體內(nèi)外可逆轉(zhuǎn) P－gp 介導的 MDR［9］。Hu SM 等（1993）體外試驗Dau、DS及蝙蝠葛糖苷（Dauricoside）對二磷酸腺苷、腎上腺素和膠原誘導的血小板聚集有明顯的濃度依賴性抑制作用，心血管病患者每天口服蝙蝠葛糖苷900mg，血小板聚集抑制率達20%～30%［10］。北豆根的抗腫瘤作用罕有報道，僅有北豆根的有效成分之一蝙蝠葛堿的逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥等相關(guān)報道［11－12］。

2 國內(nèi)研究現(xiàn)狀綜述

2.1 在園林綠化應用中的研究

劉延江（2006）將蝙蝠葛列入在園林觀賞花卉中，主要作為蔓生花卉的品種之一，應用于園林垂直綠化［13］，夏江寶（2008）在我國藤本植物的研究進展中主要闡述了蝙蝠葛在北方水土保持生態(tài)修復中的應用價值較大，并根據(jù)坡面的不同特性對其藤本植物配置原則和配置種類進行了分析研究。堅持適應性、生態(tài)性、節(jié)水性和經(jīng)濟性的原則，選擇藤本植物作為先鋒植物綠化煤矸石山也具有多種優(yōu)勢?？梢娞俦局参飳τ诨哪卫?、石場、礦區(qū)、公路邊坡的水土保持及水土保持生態(tài)修復具有獨特的作用［14］。胡振華（2007）在攀援植物在北方水土保持生態(tài)修復中的應用中提到：蝙蝠葛繁殖栽培容易，竹理粗放；長勢旺，蔓莖長，葉大，光亮形奇；也能產(chǎn)生不定根攀附陡壁；在中等坡度（30°～60°）且表面粗糙或有裂縫的山體斷面可選用具不定根類植物，如蝙蝠葛［15］。在胡海輝（2007）、“北京園林植物造景特色”、“北京地區(qū)居住區(qū)綠化常用園林植物種類”以及“垂直綠化植物及其在園林中的應用”中也都提到了蝙蝠葛的綠化應用，如用于棚架和廊架；綠柱；柵欄和竹籬；墻面；綠亭；屋面；山石和假山；裸露山體；立交橋；盆栽觀賞；保持水土；屋頂綠化；護欄、圍欄綠化；邊坡綠化等等［16－19］。

2.2 培育技術(shù)的研究

萬才淦（1991）對蝙蝠葛種子發(fā)芽特性作了初步研究，認為層積108天在沙中的發(fā)芽率為42.7%，酸處理加冷層積100天，以沙為發(fā)芽床出芽率為77%，冬播比春播好，發(fā)芽率高，為83%～100%（3月14日播的發(fā)芽率只有70%），出苗期早11～16天，特別指出不能晚春播，種子干藏到5月4日播，出苗率只有12%～20%［20］。刁詩冬（1999）、張欽富（1996）對蝙蝠葛的生長習性、整地、施肥、繁殖技術(shù)、田間管理及收獲等作了研究，認為蝙蝠葛根莖繁殖出苗率在95%以上［21－22］。張志環(huán)（2006）報道了北豆根的生物學特性，認為人工種植北豆根與野生北豆根在生物學特性上無差異，不用進行栽培馴化；北豆根地上部主蔓生長在7月末以前生長迅速，進入8月以后生長平緩，1～3年生主蔓平均高生長分別為35.6cm、69.4cm和90.2cm；北豆根地下根狀莖平均分布深度為13cm［23］。張志環(huán)（2007）報道北豆根種子經(jīng)砂藏處理發(fā)芽率達86.75%［24］。劉興權(quán)（2008）對蝙蝠葛的無性繁殖和有性繁殖作了簡要敘述，認為蝙蝠葛人工栽培前景廣闊［25－26］。何立華（2009）對蝙蝠葛的生物學特性、繁殖、田間管理、病蟲害防治和采收加工作了簡要敘述［27］。張志環(huán)（2010）報道蝙蝠葛栽培3年即可采收；種子直播建園定植密度30株／m2時產(chǎn)量最高，3年畝產(chǎn)蝙蝠葛根0.803kg／m2，比2年生產(chǎn)量高31.61%；蝙蝠葛為纏繞植物，3年生有架根產(chǎn)量比無架時產(chǎn)量高29.35%，比2年生有架根產(chǎn)量高31.15%；耕作方式以隔壟間作效果最好，3年生根產(chǎn)量達0.948kg／m2，比畦作根產(chǎn)量高18.05%，單壟栽培方式由于易受凍害不宜采用［29］。

2.3 化學成分的研究

2.3.1 生物堿類成分。蝙蝠葛的根莖中含有多種生物堿［29］，含量較多的為酚性生物堿，其中雙芐基四氫異喹啉類：蝙蝠葛堿（Dauricine）（其含量占總堿的50%左右，具有很強的藥理活性）、蝙蝠葛諾林堿（Daurinoline）、蝙蝠葛可林堿（Dauricoline）、蝙蝠葛新諾林堿（Dauricinoline）、蝙蝠葛蘇林堿（Daurisoline）。阿克吐明（Actumine）、阿克吐米定（Acutumidine）和阿克吐明寧（Acutuminine）以及近來新發(fā)現(xiàn)的蝙蝠葛明（Dauricumine）和蝙蝠葛米定（Dauricumidine）等是具有新骨架的含氯生物堿。此外，蝙蝠葛還含有青藤堿（Sinomenine）、二青藤堿（Disinomenine）等。

2.3.2 其它類化學成分。郭志峰（2008）在對北豆根與山豆根揮發(fā)性成分對比分析中發(fā)現(xiàn)，北豆根中共含有31種揮發(fā)性成分，既含碳氫和碳氫氧化合物，也含有氮化合物及雜環(huán)化合物，其中含量最多的是脂肪酸，且以十三碳烯酸最多［30］。此外北豆根中還含有北豆根多糖、醌類［31］、強心苷類、內(nèi)酯、皂苷、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)及樹脂等化學成分［32］。

2.4 生物堿提取方法研究

2.4.1 乙醇滲漉法。該法以工業(yè)乙醇為提取溶媒，適于工業(yè)化生產(chǎn)，但提取率低。

2.4.2 乳狀液膜法。莫鳳奎（1996）將干燥北豆根飲片以稀HCl浸泡24h，浸液用NaOH調(diào)至一定pH，與Span－80與煤油或環(huán)己烷制成的乳液混合，勻速攪拌，靜置分層后取出乳相，破乳，取出水層，濃縮，干燥［33］。

2.4.3 酸水提取法。將干燥北豆根用酸水提取，濾液減壓濃縮，干燥。本方法簡便易行，生物堿含量高，適于工業(yè)化生產(chǎn)。

2.4.4 酶浸提取法。張福維（2006）采用纖維素酶浸提法提取北豆根生物總堿，HPLC測定山豆根堿的含量。北豆根生物總堿的提取產(chǎn)率為1.96%，提取山豆根堿含量為98.09mg／g［34］。

2.5 生物堿測定的研究

2.5.1 比色法。石淑琴等（1991）用比色法測定北豆根總堿制劑中生物堿含量。該法以溴甲酚綠甲醇溶液為顯色劑，方法簡便、快捷、準確［35］。

2.5.2 薄層－膠束熒光法。龐志功等（1995）用薄層色譜體系，對北豆根中生物堿類物質(zhì)粉防己堿和青藤堿進行分離，并用膠束熒光法進行定量，測出秦巴山區(qū)產(chǎn)北豆根中粉防己堿和青藤堿的含量分別為9.94mg／g，1.07mg／g，檢出限分別為3.5×10－12g／mL，5.85×10－11g／mL，回收率分別為93.5%，92.7%［36］。

2.5.3 高效液相色譜法。陳淑娟等（1999）用 RPHPLC法測定，色譜條件如下。分析柱：Para－NovaC18柱（4.6mm×150mm 粒徑5μm）。流動相：乙晴－水（20∶80，含0.02mol／L磷酸，0.01mol／L三乙胺）。流速：1ml／min，檢測波長284nm［37］。李輝等（2001）采用 RPHPLC測定北豆根膠囊中蝙蝠葛堿的含量，固定相為Shim－PackVP－ODS反相柱，流動相為乙腈－水－磷酸（16∶81∶0.1），檢測波長208nm。該方法簡便、準確，靈敏度高，重現(xiàn)性好［38］。趙曉霞等（2002）用 HPLC測定北豆根片中蝙蝠葛堿的含量，流動相為甲醇－乙腈－水－二乙胺（30∶10∶10∶0.03），檢測波長284nm。該方法簡便、靈敏、準確［39］。

2.5.4 紫外分光光度法。趙志歆等（2002）采用紫外分光光度法測定北豆根氣霧劑中生物總堿的含量。該方法靈敏度高，專屬性強，斑點顯色明顯，結(jié)果易于觀察判斷［40］。

2.6 蝙蝠葛堿的穩(wěn)定性研究

劉全宇（2011）采用恒溫加速實驗法與高效液相色譜（HPLC）法相結(jié)合，測定蝙蝠葛堿不同溫度下的變化規(guī)律。通過不同溫度下蝙蝠葛堿的K值和Arrhenius公式測定蝙蝠葛堿的室溫動力學參數(shù)。結(jié)果表明蝙蝠葛堿單體在室溫條件下 K25℃＝1.50264×10－4，含量下降10%需要大約1.92年。說明蝙蝠葛堿的穩(wěn)定性較好［41］。

2.7 藥理作用的研究

國內(nèi)關(guān)于蝙蝠葛藥理作用的研究領域比較寬泛，主要側(cè)重于抑菌作用［42－3］、抗炎作用［42－45］、對心腦血管系統(tǒng)的作用（抗心律失常作用［42－48］、抗心肌缺血作用［49］和抗高血壓作用［50－51］）、對腦缺血的保護作用［52－55］、免疫調(diào)節(jié)作用（抗變態(tài)反應作用［56］、免疫增強作用［57－59］）、抗腫瘤作用（體外直接抗腫瘤作用［60－65］、拮抗腫瘤細胞多藥耐藥作用［66－67］）、對血小板的作用［68－69］和其他作用（肌松弛作用［70］、鎮(zhèn)痛作用［71］及對動物學習記憶障礙有改善作用等［72］。

2.8 毒性試驗的研究

對小鼠灌胃給予北豆根水煎劑（LD50＞100g／kg），其毒性遠小于山豆根和土豆根［42］。北豆根總堿灌胃LD50＝ （2.56±0.388）g／kg；腹腔注射 LD50＝ （63.32±4.31）mg／kg［73］。PAMD灌胃LD50＝（1.08±0.14）g／kg；腹腔注射LD50＝ （115±18）mg／kg。非酚性總堿灌胃LD50＝（2.64±0.37）g／kg；腹腔注射 LD50＝（144±29）mg／kg［43］。

2.9 制劑研究

2.9.1 單方制劑

北豆根片：為我國藥典所收載的制劑，它是從北豆根提取出其生物總堿制成的片劑，其功能主治為清熱解毒，消腫利咽。用于火毒內(nèi)結(jié)所致的咽喉腫痛，急性咽炎、扁桃體炎等［74］。

北豆根膠囊：北豆根膠囊是以北豆根總堿為原料，裝囊加工而成。有清熱解毒，止咳，祛痰之功效。用于咽喉腫痛，扁桃體炎等癥［75］。

北豆根氣霧劑：北豆根氣霧劑為北豆根經(jīng)提取分離制成的中藥制劑，具有清咽利喉、消腫止痛之功效。臨床用于治療急慢性咽炎，療效確切，毒副作用?。?6］。

北豆根針劑：北豆根總堿粉針劑中主要含有的以Dau為主的一類酚性生物堿，對腦梗塞、心肌缺血有較好的治療作［77］。

2.9.2 復方制劑

復方北豆根氨酚那敏片：主要含有北豆根提取物、金銀花提取物、野菊花提取物以及乙酸氨基酚組成的復方制劑。該制劑主要用于緩解普通感冒引起的發(fā)熱、四肢酸痛、頭痛、鼻塞、流涕、咽痛等癥狀。

復方蒲岑膠囊：為中藥抗生素，主要由北豆根提取物、蒲公英提取物、黃岑提取物、三顆針提取物組成的復方制劑。具有清熱消炎，用于急、慢性支氣管炎、肺炎、扁桃腺炎等［78］。

復方忍冬藤阿司匹林片：主要由忍冬藤、野菊花、北豆根、阿司匹林等組成的復方制劑。用于普通感冒及流行性感冒引起的發(fā)熱、頭痛、四肢酸痛、流鼻涕、咽痛等癥。

金羚感冒控釋制劑：方中以阿司匹林，撲爾敏等為速釋部分，具有解熱、鎮(zhèn)痛，應對感冒初期癥狀并達到快速起效的目的；北豆根，羚羊角，野菊花為恒釋組分。主要集中在抗炎、抗菌和調(diào)節(jié)免疫等方面，主要針對感冒的全程和恢復期的治療。即能發(fā)揮西藥的快速性又能發(fā)揮中藥的持久性，達到真正意義上的中西醫(yī)結(jié)合，提高藥品的生物利用度［79］。

2.10 臨床應用的研究

2.10.1 治療心血管疾病作用。北豆根中的多種生物堿具有降壓作用和抗心率失常作用［80］，其總堿己制成制劑用于臨床治療心率失常［81］。蝙蝠葛堿的靜脈制劑對午一帕一懷三氏綜合癥有一定療效，臨床用于輕癥高血壓有效，并使腎小球濾過功能好轉(zhuǎn)，能減慢心動過速時的心率。其所含防己堿對急性高血壓療效明顯［82］。

2.10.2 治療慢性氣管炎。蝙蝠葛總堿治療慢性氣管炎患者119例，結(jié)果近控16.8%，顯效39.5%，好轉(zhuǎn)38.7%，總有效率90%，且見痰液細胞中嗜酸性細胞在治療后明顯下降［82］。

2.10.3 抗癌作用。據(jù)報道，用北豆根治療肝癌19例，多數(shù)癥狀有改善，近半數(shù)病例體重有增加，肝臟有不同程度縮小或保持穩(wěn)定；對一肝癌晚期病人用藥后病好轉(zhuǎn)，黃疽及肝功能一度改善，后死于其他病癥［83］。

2.10.4 輔助麻醉劑。蝙蝠葛總堿與東蓑蓉堿及氯丙嗦聯(lián)用，對胃、脾、子宮切除、脾靜脈吻合術(shù)及卵巢囊腫摘除等5種需腹肌松弛手術(shù)共19例35次，其中除一例因中麻過淺、肌松效果不明顯外，其余均取得較滿意效果，一般用藥后3～5min開始生效，平均維持時間在40min左右［82］。

2.10.5 鎮(zhèn)咳怯痰作用。蝙蝠葛中含有的蝙蝠葛堿、防己堿等都具有鎮(zhèn)咳祛痰作用［82］。

2.10.6 治療風濕性及類風濕性關(guān)節(jié)炎。蝙蝠葛中含有的防己堿對關(guān)節(jié)炎有消腫止疼的功效，療效良好。其他生物堿也有相同作用［84］。

3 結(jié)語

隨著藤本植物的生態(tài)功能、經(jīng)濟價值、藥用價值等方面的作用越來越引起人們的重視，其規(guī)模化栽植培育技術(shù)及新品種創(chuàng)新顯得越來越重要。蝙蝠葛作為伊春地區(qū)的鄉(xiāng)土綠化藤本植物和藥用植物，其生態(tài)功能及藥用功能是十分顯著的，而且具有廣闊的開發(fā)前景。為了更好的發(fā)揮蝙蝠葛在伊春地區(qū)的綠化及藥用價值，我們應加大對蝙蝠葛的開發(fā)及保護力度，為蝙蝠葛在伊春地區(qū)的發(fā)展提供技術(shù)支撐。

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