鳶尾葉的化學(xué)成分

馬雨涵，林彬彬，劉 慧，秦民堅

（中國藥科大學(xué)中藥資源學(xué)研究室教育部現(xiàn)代中藥研究重點實驗室，江蘇 南京 211198）

鳶尾（Iris tectorum Maxim.）主產(chǎn)四川、重慶、貴州、云南和廣西等地，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》；其根莖作為“川射干”藥用，具有清熱解毒、消痰利咽的功效，被收載入2005年版和2010年版《中國藥典》。有關(guān)鳶尾藥用部位（根莖）化學(xué)成分的相關(guān)研究較多，其中異黃酮類成分為其主要有效成分［1-2］，具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤和雌激素樣作用等［3-4］。據(jù)記載：鳶尾全草有治療皮膚瘙癢的作用，鳶尾葉泡酒可以治療風(fēng)濕［5］。但目前對鳶尾葉化學(xué)成分的研究較少。鳶尾葉生物量較大、資源豐富，為充分利用這一植物資源、開發(fā)鳶尾新的藥用部位，作者對鳶尾葉的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)分析。

1 材料和方法

1.1 材料

供試鳶尾葉采自中國藥科大學(xué)藥用植物園。原植物由中國藥科大學(xué)秦民堅教授鑒定，憑證標(biāo)本保存于中國藥科大學(xué)中藥資源學(xué)研究室，標(biāo)本號ITM20090705。

主要儀器包括X-4型顯微熔點測定儀（溫度未校正，上海精密科學(xué)儀器有限公司）、Bruker ACF-500核磁共振儀（德國Bruker公司）及Agilent1100 MSD Trap電噴霧質(zhì)譜儀（美國Agilent公司）。實驗用 Sephadex LH-20（50μm）購自瑞典Amersham Biosciences公司，薄層和柱層析硅膠均為青島海洋化工廠產(chǎn)品。質(zhì)譜所用試劑為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2 方法

取干燥鳶尾葉14kg，粉碎后用體積分?jǐn)?shù)95％乙醇滲漉8 d后回收溶劑，浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇反復(fù)萃取，得到乙酸乙酯部位浸膏570 g，上硅膠柱，用三氯甲烷-甲醇系統(tǒng)洗脫〔V（三氯甲烷）∶V（甲醇）=100∶0～0∶100〕，得9個流份，即F1～F9。經(jīng)硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱等反復(fù)分離純化，從F1流份得到化合物Ⅰ（70 mg）和化合物ⅩⅢ（30 mg）；從F2流份得到化合物Ⅱ（約20 g）和化合物Ⅲ（20 mg）；從F3流份得到化合物Ⅳ（180 mg）、化合物Ⅴ（19 mg）和化合物Ⅶ（233 mg）；從F4流份得到化合物Ⅵ（28 mg）；從F6流份得到化合物Ⅷ（71 mg）；從F7流份得到化合物ⅩⅣ（60 mg）和化合物Ⅻ（0.9 g）；從F8流份得到化合物Ⅸ（120 mg）、化合物Ⅹ（10 mg）和化合物Ⅺ（49 mg）。采用MS和NMR等技術(shù)鑒定化合物Ⅰ～ⅩⅣ的結(jié)構(gòu)。

2 結(jié) 果

化合物Ⅰ：淡黃色針晶（三氯甲烷）；mp：45℃ ～146℃；ESI-MS m/z：297［M-H］-。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ：13.13（1H，s，5-OH），7.87（1H，s，H-2），6.50（2H，s，H-6，8），7.45（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.99（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），4.04（3H，s，OCH3-4′），3.85（3H，s，OCH3-7）。將上述數(shù)據(jù)與文獻［6］進行比對，鑒定此化合物為5-羥基-4′，7-二甲氧基異黃酮（5-hydroxy-4′，7-dimethoxyis of lavone）。

化合物Ⅱ：白色或淡黃色針晶（甲醇）；mp：215℃ ～216℃；ESI-MS m/z：299［M-H］-。1H-NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：13.25（1H，s，5-OH），9.20（1H，s，7-OH），8.50（1H，s，4′-OH），8.19（1H，s，H-2），7.41（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.90（2H，dd，J=8.5 Hz，H-3′，5′），6.50（1H，s，H-8），3.88（3H，s，OCH3-6）。將上述數(shù)據(jù)與文獻［7］進行比對，鑒定此化合物為鳶尾苷元（tectorigenin）。

化合物Ⅲ：黃色針晶（甲醇）。1H-NMR（500 MHz，CDCl3） δ：6.61（1H，s，H-3），6.56（1H，s，H-6），7.32（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.93（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），7.48（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6′），4.05（3H，s，OCH3-3′），4.01（3H，s，OCH3-8）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：183.0（C-4），164.2（C-2），155.0（C-7），153.2（C-5），152.2（C-4′），149.3（C-3′），130.4（C-8），123.5（C-1′），120.8（C-6′），115.1（C-5′），108.4（C-2′），105.8（C-10），104.0（C-3），93.4（C-6），60.9（OCH3-8），56.2（OCH3-3′）。將上述數(shù)據(jù)與文獻［8］進行比對，鑒定此化合物為5，7，4′-三羥基-3′，8-二甲氧基黃酮（5，7，4′-trihydroxy-3′，8-dimethoxyflavone）。

化合物Ⅳ：淡黃色針晶（三氯甲烷）；ESI-MS m/z：331［MH］-。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ：11.2（s，5-OH），4.57（d，J=12.0 Hz，H-2），5.01（d，J=12.0 Hz，H-3），6.12（d，J=2.1 Hz，H-6），6.06（d，J=2.1 Hz，H-8），7.07（d，J=2.1 Hz，H-2′），7.06（dd，J=8.0，2.1 Hz，H-6′），6.99（d，H-5′，J=8.0 Hz），3.95（s，3H），3.82（s，3H）。4.57和5.01的d峰說明該化合物為二氫黃酮類結(jié)構(gòu)。將上述數(shù)據(jù)與文獻［9］進行，鑒定此化合物為5，3，3′-三羥基-7，4′-二甲氧基黃烷酮（5，3，3′-trihydroxy-7，4′-dimethoxyflavanone）。

化合物Ⅴ：黃色粉末（甲醇）；mp：225℃～227℃；ESI-MS m/z：299［M-H］-。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：12.48（1H，s，5-OH），10.14（1H，s，3-OH），9.54（1H，s，4′-OH），6.75（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.36（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），8.10（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.94（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），3.87（3H，s，OCH3-7）。將上述數(shù)據(jù)與文獻［1］進行比對，鑒定此化合物為鼠李檸檬素（rhamnocitrin）。

化合物Ⅵ：白色或淡黃色針晶（甲醇）；FeCl3反應(yīng)陽性，Molish反應(yīng)陰性，碘熏顯棕黃色。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：8.30（1H，s，H-2），13.10（1H，s）、10.75（1H，s）、9.06（1H，s）和8.99（1H，s）為4個活潑氫信號，7.00（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.79（1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6′），6.77（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），6.50（1H，s，H-8），3.75（3H，s，OCH3）。將上述數(shù)據(jù)與文獻［10］進行比對，鑒定此化合物為irilin D。

化合物Ⅶ：黃色粉末（三氯甲烷-甲醇）；mp：290℃ ～291℃；ESI-MS m/z：299［M-H］-。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：13.08（1H，s，5-OH），10.71（1H，brs，7-OH），10.35（1H，brs，4′-OH），6.76（1H，s，H-3），6.59（1H，s，H-8），7.93（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J=7.0 Hz，H-3′，5′），3.75（3H，s，OCH3）。將上述數(shù)據(jù)與文獻［11］進行比對，鑒定此化合物為4′，5，7-trihydroxy-6-methoxyflavone，即粗毛豚草素（hispidulin）。

化合物Ⅷ：淡黃色粉末（丙酮）；mp：199℃ ～200℃。1HNMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：12.35（1H，s，1-COOH），9.71（1H，s，OH），9.32（1H，s，OH），7.52（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），7.46（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6），6.89（1H，d，J=8.5 Hz，H-5）。將上述數(shù)據(jù)與文獻［12］進行比對，鑒定此化合物為原兒茶酸（protocatechuic acid）。

化合物Ⅸ：黃色針晶（甲醇）；mp：178℃～180℃；ESI-MS m/z：607.4［M+H］+。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：13.42（1H，s，5-OH），8.10（2H，d，J=9.0 Hz，H-2′，6′），7.13（2H，d，J=9.0 Hz，H-3′，5′），6.96（1H，s，H-8），6.88（1H，s，H-3），3.87（3H，s，OCH3），3.91（3H，s，OCH3），0.6（3H，s，CH3），5.09（1H，d，J=5.5 Hz）為鼠李糖的端基氫，4.65（1H，d，J=10.0 Hz）為葡萄糖端基氫信號。將上述數(shù)據(jù)與文獻［13］進行比對，鑒定此化合物為恩比寧（embinin）。

化合物Ⅹ：淡黃色粉末（甲醇）；mp：235℃～238℃；ESIMS m/z：461［M+H］+。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：3.87（3H，s）和3.90（3H，s）為7位和4′位甲氧基，8.09（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），7.13（2H，d，J=7.0 Hz，H-3′，5′），6.94（1H，s，H-8），6.86（1H，s，H-3），4.71（1H，d，J=9.5 Hz）為葡萄糖端基氫信號。將上述數(shù)據(jù)與文獻［13］進行比對，鑒定此化合物為embigenin。

化合物Ⅺ：黃色粉末（甲醇）；mp：225℃～288℃；ESI-MS m/z：445［M-H］-。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：13.48（1H，s，5-OH），10.40（1H，s，4′-OH），6.86，6.85（1H，s，8-H），6.84，6.83（s，3-H），7.98（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.93（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），3.90，3.87（3H，s，-OCH3），4.58（1H，d，J=12.0 Hz），4.64（1H，d，J=5.5 Hz，H-1″）為糖上端基氫質(zhì)子，4.18，3.99（1H，dd，J=9.0，5.0 Hz，H-2″），3.17，3.20（1H，m，H-3″），3.09，3.07（1H，m，H-4″），3.14，3.16（1H，m，H-5″），3.39，3.36（1H，m，H-6″）。由于溶液中存在旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，因而峰有裂分。將上述數(shù)據(jù)與文獻［14-15］進行比對，鑒定此化合物當(dāng)藥黃素（swertisin）。

化合物Ⅻ：白色粉末（甲醇）；mp：212℃～214℃；ESI-MS m/z：461［M-H］-，299［M-H-Glc］-；FeCl3和Molish反應(yīng)陽性。1H-NMR、Rf值及顯色行為（H2SO4-香草醛：254 nm下暗斑不顯色）與鳶尾苷對照品一致，與鳶尾苷對照品的混合熔點不下降。鑒定此化合物為鳶尾苷（tectoridin）。

化合物ⅩⅢ：無色針晶（乙酸乙酯）；mp：136℃～137℃。1H-NMR、Rf值及顯色行為（H2SO4-香草醛：顯紫色）與豆甾醇對照品一致，與豆甾醇對照品的混合熔點不下降。鑒定此化合物為豆甾醇（stigmasterol）。

化合物ⅩⅣ：白色粉末（甲醇）；mp：307℃～309℃。Rf值及顯色行為（H2SO4-香草醛：顯紫色）和1H-NMR均與β-胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品一致，與β-胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品混合熔點不下降。鑒定此化合物為β-胡蘿卜苷（β-daucosterol）。

從鳶尾葉中共分離出14個化合物，其中黃酮類化合物有11個?；衔铫窈廷鬄槭状螐镍S尾屬（Iris L.）植物中分離獲得，化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅹ和Ⅺ首次從鳶尾中分離獲得。鳶尾葉所含的鳶尾苷和鳶尾苷元等代表性異黃酮類化合物與鳶尾根莖中的主要化學(xué)成分相似，表明鳶尾葉也具有較好的生物活性且含量較高。另外，鳶尾葉中還存在根莖中尚未報道的黃酮碳苷類成分，如當(dāng)藥黃素和恩比寧等。因此，鳶尾葉的藥用功效值得進一步研究，有必要在民間藥用的基礎(chǔ)上尋找其有效成分和新的用途。

［1］賞后勤，秦民堅，吳靳榮.川射干的化學(xué)成分［J］.中國天然藥物，2007，5（4）：312-314.

［2］邱慶潔，張志國，王建華，等.川射干中異黃酮類化學(xué)成分研究［J］.中藥材，2009，32（9）：1392-1394.

［3］Ezaki S.Pharmacological studies of tectoridin and tectorigenin［J］.Nihon Yakurigaku Zasshi，1968，64（2）：186-198.

［4］Yoo H H，Jin Y R，Jin J L，et al.Evaluation of the estrogenic activity of is of lavones from the rhizome of Belamcanda chinensis［J］.Food Science and Biotechnology，2005，14（1）：39-41.

［5］蔡光先.湖南藥物志：第四卷［M］.湖南：湖南科學(xué)技術(shù)出版社，2004：2260.

［6］Talukdar A C，Jain N，De S，et al.An is of lavone from Myristica malabarica［J］.Phytochemistry，2000，53（1）：155-157.

［7］吉文亮，秦民堅，王崢濤.射干的化學(xué)成分研究（Ⅰ）［J］.中國藥科大學(xué)學(xué)報，2001，32（3）：197-199.

［8］Pukalskas A，Venskutonis P R，Dijkgraaf I，et al.Isolation，identification and activity of natural antioxidants from costmary（Chrysanthemum balsamita）cultivated in Lithuania［J］.Food Chemistry，2010，122（3）：804-811.

［9］Seaman F，Rodriguez E，Carman N J，et al.A new flavonoid from Ambrosia dumosa［J］.Phytochemistry，1972，11（8）：2626-2627.

［10］Choudhary MI，Nure-Alam M，Bagi I，et al.Four new flavones and a new is of lavone from Iris bungei［J］.Journal of Natural Products，2001，64（7）：857-860.

［11］Liu Y L，Mabry T J.Flavonoids from Artemisia frigida［J］.Phytochemistry，1981，20（6）：1389-1395.

［12］任 燕，沈 莉，戴勝軍.白英中的黃酮及酰胺類化合物［J］.中國中藥雜志，2009，34（6）：721-723.

［13］Arisawa M，Morita N，Kondo Y，et al.Studies on constituents of Iris genus plants.Ⅵ.The constituents of the rhizoma of Iris florentina L.and the constituents of the petals of Iris japonica Thunb.［J］.Yakugaku Zasshi，1973，93（12）：1655-1659.

［14］Bjor?y?，Rayyan S，F(xiàn)ossen T，et al.C-glycosyl anthocyanidins synthesized from C-glycosylflavones［J］.Phytochemistry，2009，70（2）：278-287.

［15］Cheng G，Bai Y J，Zhao Y Y，et al.Flavonoids from Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa［J］.Tetrahedron，2000，56（45）：8915-8920.