瘦素在卵巢腫瘤組織中的表達及意義

顧 揚,尹香花,陳 剛

(1.江蘇省蘇北人民醫(yī)院,婦產(chǎn)科,江蘇揚州,225001;2.揚州大學醫(yī)學院病理教研室,江蘇揚州,225001)

卵巢腫瘤是婦科常見病,卵巢惡性腫瘤是婦女生殖道三大惡性腫瘤中5年生存率最低者。瘦素不僅是機體調(diào)節(jié)能量的重要物質(zhì),而且可以抑制腫瘤細胞凋亡,促進其增殖,增加其對基底膜的侵襲能力及促進血管生成[1-2]。與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。有關(guān)瘦素在卵巢腫瘤組織中表達鮮有報道。為初步了解瘦素與卵巢腫瘤的關(guān)系,本研究應(yīng)用免疫組織化學技術(shù)觀察常規(guī)石蠟包埋的82例卵巢腫瘤組織標本中瘦素表達的情況,現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2003年1月～2008年12月,在本院住院手術(shù)治療的卵巢腫瘤患者的存檔組織中,抽取卵巢惡性腫瘤組織45例(漿液性囊腺癌23例、黏液性囊腺癌16例、惡性畸胎瘤6例),卵巢交界性腫瘤組織13例(交界性漿液性囊腺瘤7例、交界性黏液性囊腺瘤6例),隨意抽取卵巢良性腫瘤組織24例(漿液性囊腺瘤8例、黏液性囊性瘤8例、皮樣囊腫8例),以及卵巢正常組織標本18例。卵巢惡性腫瘤患者的平均年齡(44.7±6.5)歲,卵巢交界性腫瘤患者的平均(42.8±7.8)歲,卵巢良性腫瘤患者平均(37.4±9.2)歲。根據(jù)2000年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)有關(guān)卵巢惡性腫瘤的臨床分期病理分級標準,45例惡性卵巢腫瘤組織中,Ⅰ期4例、Ⅱ期 7例、Ⅲ期25例、Ⅳ9例;高分化(G1)10例、中分化(G2)19例、低分化(G3)16例。所有患者均行手術(shù)治療,術(shù)前均無化療及放療史。

1.2 免疫組織化學方法

取上述石蠟包埋的卵巢腫瘤組織及正常卵巢組織,切片4 μ m,采用鏈霉菌-產(chǎn)生物-過氧化物(SP)法進行免疫組化染色,具體方法參見試劑盒說明,試劑盒購于北京中核生物技術(shù)有限公司,一抗工作液稀釋度均為1∶100。PBS代替一抗作為陽性對照。

1.3 結(jié)果判斷標準

采用雙盲法閱片,均有2位病理科醫(yī)師獨立觀察每張切片后一起作出判斷,有爭議的結(jié)果有3位病理科醫(yī)師共同討論決定。細胞質(zhì)著染棕黃色顆粒者為陽性細胞,每切片于高倍鏡下取4個不同視野觀察,計算陽性表達細胞在全部細胞總數(shù)的百分率,取其平均值為陽性表達率。按以下方法行半定量分類:<5%的細胞著染為陰性,≥5%的細胞著染為陽性。

2 結(jié) 果

2.1 瘦素在4種卵巢組織中的表達

瘦素在卵巢組織、良性卵巢腫瘤組織、卵巢交界性腫瘤和卵巢惡性腫瘤組織中的表達見表1。它們的陽性表達率有顯著差異性,且呈上升趨勢(P<0.01)。

表1 瘦素在正常卵巢組織、卵巢良性、交界性和惡性腫瘤組織中的表達

2.2 卵巢癌組織中瘦素表達與臨床病理因素的關(guān)系

將45例卵巢癌進行臨床統(tǒng)計分析,根據(jù)年齡、臨床分期、組織分化程度、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移和病理類型分組進行陽性表達率的統(tǒng)計見表2。

表2 卵巢癌組織中瘦素表達與臨床病理因素的關(guān)系

經(jīng)統(tǒng)計學處理,卵巢癌中年齡>45歲和≤45歲的瘦素陽性表達無明顯差別,晚期(Ⅲ～Ⅳ)顯著高于早期(Ⅰ～Ⅱ)(P<0.05),組織學G2G3顯著高于G1(P<0.01),淋巴轉(zhuǎn)移顯著高于無轉(zhuǎn)移(P<0.05),而病理類型中無明顯差異(P>0.05)。

3 討 論

瘦素是近年來發(fā)現(xiàn)的肥胖基因所表達的蛋白產(chǎn)物,主要調(diào)節(jié)機體脂肪的沉積。但最近研究發(fā)現(xiàn)瘦素在多種惡性腫瘤中廣泛分布,表明瘦素可能是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素,然而有關(guān)瘦素在卵巢癌組織表達的研究,國內(nèi)外鮮見報道。組織中表達與否是了解瘦素是否參與卵巢癌發(fā)病機制的基礎(chǔ)。本研究選擇卵巢癌組織中兩種最常見的細胞學類型(上皮性腫瘤和生殖細胞腫瘤)為代表,采用免疫組化方法研究瘦素在卵巢良、惡性組織腫瘤中的表達情況,結(jié)果顯示瘦素在卵巢良性、交界性、惡性腫瘤組織中陽性表達率逐漸增加,3者間表達差異有統(tǒng)計學意義且呈上升趨勢,而卵巢良性腫瘤組織陽性表達率與正常卵巢組織的表達率差異無顯著性。由此可見,瘦素在卵巢惡性腫瘤組織中的表達顯著增加,提示瘦素的過度表達可能與卵巢惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[3-4]。

實驗發(fā)現(xiàn)瘦素在晚期卵巢惡性腫瘤的表達顯著高于早期,在G3、G2中陽性表達顯著高于G1,在有淋巴轉(zhuǎn)移中陽性表達顯著高于無淋巴轉(zhuǎn)移,提示瘦素確實與卵巢惡性腫瘤細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移、疾病的嚴重程度及預(yù)后密切相關(guān)。本實驗還比較了瘦素在卵巢惡性上皮腫瘤組織與惡性生殖細胞腫瘤的表達和年齡組表達情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)表達陽性率均無顯著差異,提示瘦素的表達與年齡及惡性腫瘤細胞的細胞性類型無關(guān),而這恰好與多種不同組織來源的惡性腫瘤均表達瘦素的現(xiàn)象相一致[5-6]。

總之,本實驗發(fā)現(xiàn)瘦素與卵巢惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,侵襲及疾病的嚴重程度密切相關(guān)。關(guān)于瘦素在卵巢惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展中作用及作用機制仍然未完全明了。推測可能與瘦素可通過BCL-2表達抑制細胞凋亡,促進腫瘤細胞的生長[7],可促血管內(nèi)皮生成因子(VEGF)表達[8-9],間接促進血管生成,有利于腫瘤組織的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。瘦素參與卵巢惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展,這為預(yù)測卵巢癌的進展,指導臨床治療提供重要實驗依據(jù),瘦素可能成為今后判斷卵巢癌預(yù)后有價值的腫瘤標志物之一及有望在卵巢癌綜合治療中作為新的治療靶標。

[1] 張勁松,涂江虹,曾憲升,等.慢性阻塞性肺疾病患者血清瘦素濃度測定及其臨床意義[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2008,12(3):88.

[2] Jaffe T,Schwartz B.Leptin promotes motility and invasiveness in human colon cancer cells by activating multiple signal-transduction pathways[J].Int J Cancer,2008,123(11):2543.

[3] 趙 亮,沈志祥,沈 磊,等.胃腺癌組織瘦素、瘦素受體表達及其臨床意義[J].武漢大學學報(醫(yī)學版),2006,27(5):569.

[4] 徐連根,周 晶,雷 偉,等.瘦素及其受體在肝癌組織中的表達及意義[J].胃腸病學和肝病學雜志,2006,15(5):502.

[5] 白慶陽,谷俊朝,俞麗鴻.瘦素與乳腺癌的相關(guān)性及其致癌機理[J].國際外科學雜志,2008,35(1):37.

[6] Dixon R A,Davidson S M,Wynne A M,et al.The cardioprotective actions of leptin are lost in the Zucker obese(fa/fa)rat[J].J Cardiovasc Pharmacol,2009,53(4):311.

[7] De Wever O,Lapeire L,De Boeck A,et al.Cellular and molecular mechanisms of cancer cell invasion[J].Verh K A-cad Geneeskd Belg,2010,72(5-6):309.

[8] Chang Y W,Bean R R,Jakobi R.T argeting RhoA/Rho kinase and p21-activated kinase signaling to prevent cancer development and progression[J].Recent Pat Anticancer Drug Discov,2009,4(2):110.

[9] 吳玲玲,余妙真,李 琳,等.瘦素和VEGF的陽性細胞在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥中的病理學研究[J].中山大學學報(醫(yī)學科學版),2007,28(6):674.