射干抗病毒注射液黃酮類(lèi)成分的含量測(cè)定

史志剛

射干抗病毒注射液黃酮類(lèi)成分的含量測(cè)定

史志剛

射干抗病毒注射液為八味中藥組成的復(fù)方制劑,僅對(duì)綠原酸、次野鳶尾黃素等個(gè)別指標(biāo)性成分進(jìn)行含量測(cè)定,不足以保證其有效性。本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)建立了對(duì)射干抗病毒注射液中四種活性成分鳶尾苷、野鳶尾苷、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的含量同時(shí)進(jìn)行測(cè)定的方法,實(shí)現(xiàn)了該制劑的多指標(biāo)含量控制。

1 資料與方法

1.1 儀器與試藥 儀器Agilent 1100型液相色譜儀(配有DAD檢測(cè)器、四元梯度泵、在線(xiàn)脫氣裝置、自動(dòng)進(jìn)樣器), ChemStation工作站(Agilent科技有限公司)。

藥品與試劑乙腈(色譜純,山東禹王實(shí)業(yè)有限公司禹城化工廠(chǎng)),冰乙酸(色譜純,天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心),無(wú)水乙醇(分析純,康科德科技有限公司),水為去離子水。鳶尾苷(TED)、野鳶尾苷(IRD)、野鳶尾黃素(IRG)、次野鳶尾黃素(IRF)(自制,純度≥99.3%),S1-S10為10批自制SGKBDI供試品溶液,M1-M 9市售SGKBDI供試品溶液,由西安高科陜西金方藥業(yè)有限公司(批號(hào):07030201、070312、 07030501、070314、070313、07030601)、陜西金麒麟藥業(yè)有限公司(批號(hào):07052202、07052201、07052102)提供。

1.2 溶液的制備 對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱(chēng)取鳶尾苷、野鳶尾苷、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的對(duì)照品適量(自制,純度≥99.3%)置同一個(gè)25m l量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成含鳶尾苷 836μg/ml、野鳶尾苷 221μg/ ml、野鳶尾黃素19μg/ml和次野鳶尾黃素 152μg/ml的混合對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取儲(chǔ)備液 5ml,置 10ml量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為對(duì)照品溶液。

自制SGKBDI供試品溶液的制備取自制SGKBDI 1m l,置 10ml量瓶中,加蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,用 0.45μm濾膜濾過(guò)后作自制SGKBDI供試品溶液。

市售SGKBDI供試品溶液取同批市售SGKBDI 5支混勻,用0.45μm濾膜濾過(guò)后作市售SGKBDI供試品溶液。

1.3 色譜條件 CenturySIL C18 BDS(250mm×4.6mm,5 μm)色譜柱,流動(dòng)相系統(tǒng)見(jiàn)下表流速1.0ml/min,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)265nm,柱溫(30.00±0.15)℃,進(jìn)樣量20μL。

表1 梯度洗脫程序

2 結(jié)果

取10批自制SGKBDI和9批市售SGKBDI樣品,按“1.2”項(xiàng)下處理制備供試品溶液,各進(jìn)樣分析三次,測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 含量測(cè)定結(jié)果

直觀(guān)比較發(fā)現(xiàn),10批自制SGKBDI供試品溶液除S3、S5外,其余 8批樣品中 4種成分的含量變化趨勢(shì)相似,3批陜西金麒麟SGKBDI(M7、M 8、M 9)與這8批樣品的變化趨勢(shì)也較類(lèi)似。6批金方SGKBDI中4種成分的含量變化趨勢(shì)相似,但與其他樣品有很大差別。以上結(jié)果說(shuō)明兩個(gè)廠(chǎng)家生產(chǎn)SGKBDI所有射干藥材來(lái)源基本固定,陜西金麒麟所用射干藥材用自制8批合格SGKBDI所用射干藥材的這四種黃酮類(lèi)成分分布比例相似,而金方藥業(yè)與它們的相似度較差。

自制SGKBDI供試品溶液濃度為處方注射液濃度的4%,所以自制SGKBDI中實(shí)際鳶尾苷、野鳶尾苷、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的含量應(yīng)為其供試品溶液濃度的 25倍。所以自制SGKBDI中4種黃酮類(lèi)成分的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于市售SGKBDI。

3 討論

3.1 多指標(biāo)定量成分的選擇 射干抗病毒注射液由八味藥材組方,射干為其君藥,即針對(duì)主病或主證,起主要作用的藥物,而黃酮類(lèi)化合物又為其主要活性物質(zhì),所以本文選擇射干中的鳶尾苷、野鳶尾苷、野鳶尾黃素及次野鳶尾黃素這四種重要的黃酮類(lèi)物質(zhì),作為指標(biāo)性成分進(jìn)行同時(shí)含量測(cè)定,可以較科學(xué)、可靠、簡(jiǎn)便的控制射干抗病毒注射液的質(zhì)量。

3.2 流動(dòng)相的選擇 射干抗病毒注射液藥味較多,成分復(fù)雜,要選擇一種流動(dòng)相系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行四種組分同時(shí)定量難度很大,本文參照射干藥材中的異黃酮類(lèi)成分含量測(cè)定的流動(dòng)相條件,對(duì)流動(dòng)相系統(tǒng)及梯度程序進(jìn)行優(yōu)化,分別考察了水(含0.05%磷酸)-乙腈、水(含1%醋酸)-乙腈(含1%醋酸)、水(含 1%醋酸)-乙腈等系統(tǒng),經(jīng)過(guò)多次梯度程序優(yōu)化,最終確定了本文的流動(dòng)相條件。

本文利用HPLC法對(duì)射干抗病毒注射液中的四種黃酮類(lèi)成分進(jìn)行了同時(shí)定量分析,分別測(cè)定了 10批自制制劑及 9批兩個(gè)廠(chǎng)家市售制劑,結(jié)果表明自制射干抗病毒注射液中這四種成分的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于市售射干抗病毒注射液。本方法快速簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確可靠,可以用于射干抗病毒注射液的質(zhì)量控制。

134001鞍山市食品藥品檢驗(yàn)所