中晚期肺癌的放化療與血清VEGF表達的關系

黃 燕，梁洪享，季昆明，宋琍琍，沈 柳，丁穎麗，丁 罡

上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院崇明分院腫瘤科，上海 202150

血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是腫瘤的發(fā)生和轉移所需要的血管生成因子之一，它是目前已知的作用最強的促血管生成因子。它通過刺激內(nèi)皮細胞的增殖和遷移，并增加血管通透性，為腫瘤的生長提供氧氣及其他營養(yǎng)物質(zhì)，從而引起腫瘤的生長、轉移。惡性腫瘤的分期、腫瘤負荷的大小、對治療的反應及預后均與VEGF的含量有密切的關系。本課題通過檢測晚期肺癌患者放化療前后血清VEGF含量的變化，觀察VEGF含量的變化與晚期肺癌放化療患者的預后及病情進展等的關系，為治療預后評價、隨訪復查及制定治療方案的選擇等提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2007年6 月～2008年11月我院收治的中晚期非小細胞肺癌（Ⅲ～Ⅳ期）患者51例（實驗組）；均經(jīng)病理和細胞學確診，KPS≥70分，生存期大于半年，無遠處轉移，無惡液質(zhì)及其他重要器官功能損害。符合入選標準的患者中，男43例，女 8 例；年齡 37～75 歲，平均（61.73±7.56）歲，中位年齡 63歲；腺癌24例，鱗癌27例。同期選取10例健康者作為對照組，其中，男 6 例，女 4 例；平均年齡（58.73±10.77）歲，中位年齡62歲。

1.2 標本收集

患者清晨空腹抽血4.0 ml置于肝素抗凝管，并離心（1 000 r/min）15 min，小心吸取上清液，凍存于-80℃超低溫冰箱中保存，待收集到一個試劑盒的數(shù)量（96個）后再集中后測定，若標本發(fā)生溶血則重新采集。

1.3 方法與試劑

采用雙抗夾心ELISA法檢測。人VEGF酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測試劑盒由深圳萊伯克生物科技有限公司生產(chǎn)，由上海美季生物科技有限公司提供，檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 療效評價標準

主要以患者治療前后CT為依據(jù)，采用RECIST實體瘤近期療效標準評價，分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、穩(wěn)定（SD）和進展（PD），以（CR+PR）計算有效率。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（±s）表示，采用 t檢驗，以 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清VEGF的比較

實驗組治療前的血清VEGF水平明顯比對照組血清VEGF水平升高。見表1。

表1 兩組血清VEGF的比較（±s）

表1 兩組血清VEGF的比較（±s）

注：與對照組比較，t=3.62，P=0.000 6

實驗組對照組組別 例數(shù)51 10血清VEGF濃度（ng/L）101.28±67.16*23.74±11.12

2.2 實驗組血清濃度與療效的關系

51例中晚期肺癌患者中，其中，29例接受1個療程以上化療和放射治療，10例接受至少1個療程化療，5例接受單純肺部局部放療，7例接受對癥支持治療。治療后療效評價CR 7例，PR 26例，SD 14例，PD 4例。 治療有效率（CR+PR）為64.7%。治療有效患者血清濃度（70.00±33.88）ng/L顯著低于治療前濃度（90.30±61.12）ng/L，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.006 5），腫瘤進展的患者血清濃度（101.60±52.79） ng/L 與治療前濃度（121.41±74.63）ng/L相仿，差異無統(tǒng)計學意義（P=0.240 7）。見表2。

表2 實驗組治療前后血清濃度比較（±s）

表2 實驗組治療前后血清濃度比較（±s）

治療前后 緩解（CR+PR）例數(shù) 血清VEGF濃度（ng/L）進展（SD+PD）例數(shù) 血清VEGF濃度（ng/L）治療前治療后t值P值33 33 90.30±61.12 70.00±33.88 2.92 0.006 5 18 18 121.41±74.63 101.60±52.79 1.22 0.240 7

2.3 實驗組血清VEGF濃度與各臨床病理參數(shù)之間的關系

51例中晚期肺癌患者放化療前血清濃度與患者不同性別、不同年齡、不同病理類型均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。見表3。

2.4 放化療效果與治療前、后血清VEGF的關系

治療前，放化療有效組患者血清VEGF水平較無效組低，但差異無統(tǒng)計學意義（P=0.114 7）；經(jīng)治療，放化療有效組患者血清VEGF水平較無效組低，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.012 2）。 見表4。

表3 實驗組血清濃度與臨床病理參數(shù)之間的關系（±s）

表3 實驗組血清濃度與臨床病理參數(shù)之間的關系（±s）

臨床參數(shù) 例數(shù) 血清VEGF濃度（ng/L）t值P值性別男女43 8 105.820±70.664 76.838±38.056 1.120.266 5年齡（歲）≥60≤59病理鱗癌腺癌35 16 107.800±73.330 87.010±50.310 1.030.309 8 27 24 96.639±63.965 106.500±71.600-0.520.605 9

表4 有效組與無效組治療前后血清VEGF的關系（±s）

表4 有效組與無效組治療前后血清VEGF的關系（±s）

組別 例數(shù) 血清VEGF濃度（ng/L）t值P值治療前有效組無效組治療后有效組無效組33 18 90.295±61.125 121.410±74.633-1.610.114 7 35 16 70.003±33.885 101.600±52.792-2.600.012 2

3 討論

腫瘤的生長、侵襲、遠處轉移與腫瘤的新生血管生成密切相關，腫瘤組織通過分泌、調(diào)節(jié)、促進與抑制血管形成的細胞因子，誘導了新生血管的形成。其中，血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是目前已知作用最強的腫瘤血管生成誘導因子[1]。VEGF又稱血管通透因子（vascular permeability factor）或促血管因子（vasculotropin），是1989年從牛垂體濾泡星形細胞培養(yǎng)液內(nèi)分離純化出來的一類細胞因子。它的作用一方面能促進內(nèi)皮細胞的增生、遷移，促進血管的形成，是一種對血管生長有強力誘導作用的細胞因子；另一方面，它具有增強血管通透性的作用，為腫瘤細胞的轉移提供適合的基礎[2]。在非小細胞肺癌（non-small-cell lung cancer，NSCLC）的腫瘤組織中VEGF表達陽性率約為64%[3]。目前，以VEGF靶點單克隆抗體貝伐單抗（Bevacizumab）已經(jīng)在臨床上應用于晚期直、結腸癌、非小細胞肺癌、乳腺癌和腎癌等的治療，大量的臨床隨機研究證實貝伐單抗在聯(lián)合化療的治療中取得的緩解率、中位生存期等方面均優(yōu)于單純化療[4-5]。國內(nèi)滕家俊等[6]臨床研究證實抗腫瘤新生血管生成抑制劑重組人血管內(nèi)皮抑制素（恩度）聯(lián)合化療治療晚期非小細胞肺癌的臨床療效較單純的使用一線、二線、三線的化療方案有效率高。劉金等[7]通過沙利度胺抗VEGF治療聯(lián)合化療、同步放療治療小細胞肺癌取得良好的近期效果。目前臨床上普遍認為VEGF是促進腫瘤放療拮抗、放療后復發(fā)與轉移的重要因素，是腫瘤放療的預后指標，抗VEGF治療協(xié)同放射治療能提高療效[8]。江豐收等[9]在非小細胞肺癌患者血清表達水平及其臨床意義的研究中表明，VEGF在NSCLC的發(fā)生、生長和轉移過程中起著極其重要的作用。

本研究即以血清作為標本，并排除了可能影響血清檢測水平的其他病理因素。結果表明，化療前血清VEGF、與血白細胞、血色素、血小板計數(shù)無相關性，基本未受血液成分的影響，故結果可靠。本研究結果與文獻[8]報道相近，表明外周血中血管形成因子（VEGF）的高表達與腫瘤相關。進一步分析發(fā)現(xiàn)，血清VEGF濃度與肺癌患者病情的早晚及腫瘤進展程度有關。本研究51例中晚期肺癌腫瘤患者中，44例接受抗腫瘤治療，其中75%（33例）的患者治療后近期緩解患者，他們治療后的血清VEGF濃度顯著下降，低于治療前血清濃度，結論與其他文獻報道[8]的非小細胞肺癌、食管癌和鼻咽癌等惡性腫瘤治療取得緩解的療效后，血清中VEGF濃度也隨之下降結論一致。隨治療好轉，血清中VEGF表達水平下降考慮與抗腫瘤治療后腫瘤細胞分泌的作用得到抑制、相應的腫瘤負荷有所減輕有關。因此通過化驗腫瘤患者治療前后血清VEGF水平的變化可以動態(tài)監(jiān)測病情及治療的效果。

肺癌患者血清VEGF濃度與患者性別、年齡及病理類型無明顯相關性。本研究51例中晚期肺癌腫瘤患者分別按性別、年齡及病理類型三個臨床病理因素分組比較，不論其是否接受抗腫瘤治療，治療后有無緩解，治療前分別比較，均未發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清VEGF水平與這三個主要的臨床病理因素有相關性（P＞0.05）。此結論與文獻報道的相符[10-11]。

本研究51例患者按放化療效果的不同分治療有效組及無效組，結果有效組和無效組治療前血清VEGF水平無明顯差異，而治療后兩者差異明顯。結果提示治療前血清VEGF水平尚不能預測肺癌放化療治療效果的敏感性，而治療后1周的血清VEGF水平可以預測治療的敏感性及療效。此結論與國內(nèi)部分研究[12]報道的肺癌組織表達VEGF陰性者具有較高的放射敏感性，近期療效較理想有相似之處。但筆者認為從患者治療后血清VEGF水平的檢測結果預測治療敏感性更加方便及臨床易于開展，預測結果比治療前定性檢測更加準確。但由于本研究病例數(shù)太少，導致VEGF測定值變化范圍較大，存在一定的不足，下一步擬積累更多的放化療的肺癌病例及血清標本VEGF的測定并進行動態(tài)觀察，評價放化療聯(lián)合抗血管生成的靶向治療對預后及療效的影響。

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