不同炮制方法對(duì)艾葉止血作用的影響

曾 婷 ，賀衛(wèi)和 ，蔣孟良 ，蔣曉煌 ，鐘 丹 ，張偉娜

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)2009級(jí)研究生班，湖南 長(zhǎng)沙 410208）

不同炮制方法對(duì)艾葉止血作用的影響

曾 婷1，賀衛(wèi)和1，蔣孟良1，蔣曉煌1，鐘 丹2，張偉娜2

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)2009級(jí)研究生班，湖南 長(zhǎng)沙 410208）

目的 用不同炮制方法研究艾葉止血作用，以?xún)?yōu)化其炮制工藝。方法 以小鼠出血時(shí)間與凝血時(shí)間為指標(biāo)，比較艾葉生品、炒炭、砂燙、烘法、醋制所得炮制品的止血作用差異。結(jié)果 艾葉不同炮制方法對(duì)縮短小鼠凝血時(shí)間的作用強(qiáng)弱排序是：砂燙艾葉炭>生艾葉>烘艾葉>炒艾葉炭>醋艾葉炭；與空白組比較，生艾葉、烘艾葉、砂燙艾葉、炒艾葉均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與生艾葉比較，烘艾葉、砂燙艾葉、炒艾葉均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。其中砂燙艾葉炭凝血時(shí)間最短。結(jié)論 生艾葉、烘艾葉、砂燙艾葉、炒艾葉止血作用顯著，艾葉最佳炮制方法是砂燙艾葉炭，其凝血時(shí)間最短。

艾葉；炮制工藝；藥理實(shí)驗(yàn)；出血時(shí)間；凝血時(shí)間；小鼠

艾葉為菊科植物艾Artemisia argyi Levl et Vant.的干燥葉[1]?！侗静菝绍酢罚喊~,煎服宜新鮮，氣則上達(dá)；灸火宜陳久，氣乃下行，揉碎入四物湯，安胎漏腹痛[2]446。艾葉散寒止痛，溫經(jīng)止血。生品擅于理氣血，散風(fēng)寒濕邪，性燥，多外用。炒炭后，辛散之性大減，對(duì)胃的刺激性緩和，溫經(jīng)止血的作用增強(qiáng)[3]。為研究艾葉的止血作用及最佳制炭方法，以小鼠出血時(shí)間與凝血時(shí)間為指標(biāo)，對(duì)艾葉生品、烘炭品、砂燙炭品、炒炭品、醋炭品5種炮制方法的止血作用進(jìn)行比較研究，優(yōu)化其最佳炮制方法。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 飲片與輔料 艾葉：來(lái)源于菊科植物艾Artemisia argyi Levl.et Vant.的干燥葉。夏季花未開(kāi)時(shí)采摘，除去雜質(zhì)，曬干。購(gòu)自藥圣堂（湖南）飲片有限公司，經(jīng)湖南省藥品檢驗(yàn)所方石林主任藥師鑒定，批號(hào)：20100502；陳醋：山西省榆次市懷仁仁衛(wèi)醋廠，批號(hào)：20081208；宮血寧膠囊：云南白藥集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)：20100301，國(guó)藥準(zhǔn)字：Z20020087；油砂：過(guò)篩1號(hào)目以下，16目以上。

1.1.2 動(dòng)物 SPF級(jí)健康NIH小白鼠，90只，體質(zhì)量18～22 g，♀，均購(gòu)自湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心， 合格證號(hào)：003051， 許可證號(hào)：SCX1＜(湘)2009-0004。

1.1.3 儀器 DHG型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱：河南省鞏義市英峪儀器廠；TP1004型電子天平：奧豪斯國(guó)際貿(mào)易(上海)有限公司；循環(huán)水式多用真空泵：SHB-Ⅲ型，鄭州長(zhǎng)城工貿(mào)有限公司；迅達(dá)旋流燃?xì)庠睿篍-2型，湖南迅達(dá)集團(tuán)有限公司；恒溫水浴鍋:DK-S22型，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；KDM型調(diào)溫電熱套：1000 ML、2000 ML，山東甄城華魯電熱儀器有限公司；標(biāo)準(zhǔn)篩：1號(hào)目、60目，浙江上虞縣制篩廠；不銹鋼機(jī)械秒表：鉆石牌，803型，上海星鉆秒表有限公司。

1.2 方法

1.2.1 艾葉的炮制 （1）生艾葉：取原藥材，除去雜質(zhì)及梗，篩去灰屑[4]206；（2）炒艾葉炭：取凈艾葉100 g，加適量清水拌勻，悶潤(rùn)濕透，置鍋內(nèi)，用中火加熱，炒至外表焦黑色，噴淋清水少許，滅盡火星，炒至微干，立即取出，攤開(kāi)涼透[2]442；（3）烘制艾葉炭：取凈艾葉100 g，置預(yù)熱的搪瓷盤(pán)中，200℃烘10 min，成品外表焦褐色為佳，取出，攤涼[5]22。（4）醋艾葉炭：取凈艾葉100 g，置炒制容器內(nèi)，用中火加熱，炒至表面焦黑色，噴入定量米醋，滅盡火星，炒微干，取出，及時(shí)攤晾，涼透。每100 kg艾葉，用米醋15 kg[2]442。（5）砂燙艾葉炭：取制過(guò)的油砂置鍋內(nèi)，用武火加熱至靈活狀態(tài)，容易翻動(dòng)時(shí)，投入凈艾葉100 g，不斷用砂掩埋，翻動(dòng)，炒至藥物外表焦褐色，取出，篩去砂，放涼。油砂用量10～20倍[6]10。

1.2.2 藥液的制備 （1）艾葉：將上述炮制好的各炮制品46.8 g，分別加水浸泡1 h后，煎煮2次，第1次加1 000 mL水煮沸30 min，第2次加800 mL水煮沸20 min，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至200 mL，每1 mL藥液相當(dāng)于原飲片0.234 g；（2）宮血寧：取宮血寧膠囊70粒，除去膠囊帽，傾出內(nèi)容物，稱(chēng)取6 g加蒸餾水至300 mL溶解，混勻即可，藥液濃度為0.02 g/mL。

1.2.3 出血時(shí)間的測(cè)定 取健康合格的NIH小鼠100只，隨機(jī)分為7組，分別灌胃空白組生理鹽水、5種艾葉炮制品配制的藥液、陽(yáng)性對(duì)照組宮血寧藥液。艾葉各炮制品配制的藥液按成人臨床4倍劑量給藥，換算成小鼠劑量為4.68 g/kg，藥物濃度為23.4%（g/100 mL）；宮血寧按成人臨床4倍劑量給藥，換算成小鼠劑量為0.4 g/kg，藥物濃度為2%（g/100 mL）。每日上午灌胃1次（0.2 mL/10 g），連續(xù)3 d，于末次灌胃1 h后，剪去小鼠尾部末端5～1 cm，每隔30 s用濾紙輕輕吸去血滴，但不能擠壓尾部，直至血流自然停止，用秒表記錄出血時(shí)間[7]484。

1.2.4 凝血時(shí)間的測(cè)定 毛細(xì)血管法：動(dòng)物分組、給藥方法、劑量同上，于末次灌胃1 h后，用毛細(xì)管于小鼠眼球靜脈取血，至管內(nèi)血柱達(dá)5 cm后取出，當(dāng)血液進(jìn)入毛細(xì)管時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，每30 s輕輕折斷毛細(xì)管約0.5 cm，若有血絲出現(xiàn)即為凝血。記錄凝血時(shí)間[7]485。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。先做正態(tài)性及方差齊性檢驗(yàn)：P＞0.05時(shí)，滿(mǎn)足正態(tài)性和方差齊性，繼續(xù)做單因素方差分析；P＜0.05時(shí)，表明不滿(mǎn)足正態(tài)性和方差齊性時(shí)，做秩和檢驗(yàn)。方差分析采用LSD和Dunnett法比較組間差異。

2 結(jié)果

出血時(shí)間，與空白組比較，艾葉生品及其4種炮制品組均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；艾葉不同炮制方法對(duì)縮短小鼠凝血時(shí)間的作用強(qiáng)弱排序是：砂燙艾葉炭>生艾葉>烘艾葉>炒艾葉炭>宮血寧>醋艾葉炭>空白組。凝血時(shí)間，與空白組比較，生艾葉、烘艾葉、砂燙艾葉、炒艾葉、宮血寧差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中砂燙艾葉炭凝血時(shí)間最短。與生艾葉比較，烘艾葉、砂燙艾葉、炒艾葉差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。4種炮制方法成品得率中，烘艾葉最高。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同炮制方法對(duì)艾葉止血作用的影響 （）

表1 不同炮制方法對(duì)艾葉止血作用的影響 （）

注：與空白組比較*P<0.05。

組別n 成品得率（%）1234567炮制方法空白組生艾葉烘艾葉砂燙艾葉炭炒艾葉炭醋艾葉炭宮血寧藥物劑量g/kg-4.68 4.68 4.68 4.68 4.68 0.4 11 11 13 9 12 14 9成品性狀-淺褐色10 min淺褐色4.5 min焦褐色3.5 min焦褐色3.5 min焦褐色---82.68 71.23 77.18 81.07-出血時(shí)間（s）375.00±90.00 357.00±114.60 339.00±109.20 299.40±90.00 273.60±82.20 307.20±81.60 232.80±37.20凝血時(shí)間（s）102.22±29.49 63.45±27.31*63.69±21.49*59.88±30.38*73.50±21.87*87.86±19.25 77.00±16.00*

3 討論

黃繼全對(duì)艾葉炭炮制工藝研究：砂燙艾葉由于砂溫穩(wěn)定，受熱均勻，成品質(zhì)量易控制，葉片無(wú)灰化，較炒炭法可以減少濃煙刺激，較煅炭法可縮短炮制時(shí)間，適用于大生產(chǎn)[6]。砂燙用油砂做熱傳導(dǎo)媒介，增大藥物受熱面積，避免了燃燒和灰化現(xiàn)象[8]。綜合生產(chǎn)工藝和藥理作用，臨床使用以砂燙艾葉炭為佳。

張學(xué)蘭等報(bào)道艾葉炒炭與烘法制炭止血作用相當(dāng)，具有明顯的止血作用[5]。張華等以水溶性浸出物、揮發(fā)油、凝血時(shí)間為指標(biāo)，比較生、炒炭、砂燙、煅炭四種炮制品，結(jié)果炒炭與砂燙相當(dāng)[9]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果烘艾葉、砂燙艾葉、炒艾葉炭三種炮制方法均具有明顯止血作用，且作用相當(dāng)。

有報(bào)道艾葉質(zhì)輕，制炭過(guò)程中易燃燒灰化，烘法溫度易控，葉片無(wú)灰化，成品得率較高，較炒炭法可以減少環(huán)境污染和刺激[10-11]。本實(shí)驗(yàn)中，烘法成品得率最高，其他方法可能在炒制過(guò)程中溫度不勻炭化了一小部分。但烘法組凝血時(shí)間不是最短，故艾葉制炭不選用烘法。

艾葉對(duì)血液系統(tǒng)影響：（1）抑制血小板聚集；（2）止血作用：艾葉水浸液給兔灌胃有促進(jìn)血液凝固作用，制炭后止血作用增強(qiáng)。但艾葉止血有效成分有待進(jìn)一步研究[2]443。傳統(tǒng)理論：艾葉生品性燥，對(duì)胃刺激性強(qiáng)，宜外用。艾葉炭，辛散之性大減，對(duì)胃的刺激性緩和，溫經(jīng)止血作用增強(qiáng)?？捎糜诒缆┫卵?，月經(jīng)過(guò)多，或妊娠下血[4]207。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：生艾葉、烘艾葉、砂燙艾葉、炒艾葉炭均具有明顯止血作用，各組止血作用無(wú)顯著性差異，其中砂燙艾葉炭凝血時(shí)間最短。該實(shí)驗(yàn)為艾葉止血提供了理論依據(jù)，為優(yōu)化艾葉炮制方法提供了科學(xué)依據(jù)，為艾葉炮制品的質(zhì)量與臨床應(yīng)用提供參考。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：82-83.

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（本文編輯 彭芝配）

Effects of different processing methods of folium artemisiae argyi on hemostation

ZENG Ting,HE Wei-he,JIANG Meng-liang,JIANG Xiao-huang,ZHONG Dan,ZHANG Wei-na
(TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410208,China)

Objective To study the different processing methods on the hemostatic effect of Folium Artemisiae Argyi and optimize processing technology for it.Methods With the bleeding time and clotting time in mice as the indexes,the differences of the raw,carbon fried,sand ironed,baked and vinegar fried Folium Artemisiae Argyi in hemostatic effect were compared.Results The orders of hemostatic effects in five processing products was:sand ironed>raw>baked>fried carbon>fried carbon with vinegar.Compared with blank group,the differences of the raw,the fried carbon,the sand ironed and the baked Folium Artemisiae Argyi were significant(P<0.05),and the differences between control group and raw,the fried carbon,sand ironed and baked were not significant(P>0.05),in which the sand ironedwas the smallest.Conclusions The hemostatic effects of four processing methods including raw,fried carbon,sand ironed,baked are very effective,and the best processing method of Folium Artemisiae Argyi is sand ironed,which is the shortest for blood coagulation.

folium artemisiae argyi;processing methods;pharmacological experiment;bleeding time;blood coagulation time

曾 婷（1985－），女，湖南懷化人，碩士研究生，助教，主要從事中藥炮制質(zhì)量研究。

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2011.05.013.041.03

2010－02－19

湖南省教育廳基金資助項(xiàng)目（3601010290）。