時間對三種食用菌總糖含量測定的影響

徐顯利,吳玉堂,田曉蕾

(黑龍江農(nóng)業(yè)經(jīng)濟職業(yè)學(xué)院,黑龍江 牡丹江 157041)

食用菌是可供人們食用的大型真菌,且是一種藥食兩用價值很高的菌類,其食味獨特,營養(yǎng)豐富,具有祛濕、利尿、健脾胃、明目、抗衰老、降低膽固醇、提高機體免疫力、防癌和抗癌的特殊功能,還可治療頭暈、頭痛、腹瀉、嘔吐等癥。食用菌因其多方面的作用及其獨特的口味,越來越受到人們的喜愛。本文采用苯酚-硫酸法對猴頭菇、真姬菇、茶薪菇三種食用菌中的總糖含量進(jìn)行測定,其測定原理為食用菌中水溶性糖和水不溶性糖經(jīng)鹽酸溶液水解后轉(zhuǎn)化成還原糖,水解物在硫酸的作用下,迅速脫水生成糖醛衍生物,并與苯酚反應(yīng)生成橙黃色溶液,反應(yīng)產(chǎn)物在490nm處比色,定量。本文同時又對超聲波提取時間及水浴回流時間對總糖含量測定的影響進(jìn)行探索。

1 儀器與材料試劑

1.1 儀器:CAV264C型電子天平(上海奧豪斯儀器有限公司),GZX-9140MBE型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠),T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司),植物樣品粉碎機,斡旋振蕩器,電熱恒溫水浴鍋、超聲波清洗器。

1.2 試劑:濃鹽酸、濃硫酸、5%苯酚溶液、0.1mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液、

1.3 材料:猴頭菇、真姬菇、茶薪菇均采自黑龍江農(nóng)業(yè)經(jīng)濟職業(yè)學(xué)院食用菌基地

2 測定方法

2.1 試樣的制備

取鮮樣用手撕或刀切成小塊,50℃鼓風(fēng)干燥,待樣品半干后再逐步升溫至80℃,烘至發(fā)脆后在干燥器內(nèi)冷卻,立即粉碎。粉碎樣品過80目篩子。未能過篩部分再次粉碎或經(jīng)研缽研磨后再次過篩,直至全部樣品過篩為止。

2.2 總糖供試品溶液制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

2.2.1 總糖供試品溶液的制備。準(zhǔn)確稱取三種試樣各0.5g,將試樣小心倒入 250mL錐形瓶中,加 50mL水和15 mL濃鹽酸。裝上冷凝回流裝置,置100℃水浴及超聲波中水解,水解時間分別設(shè)定為2h、3h、4h。冷卻至室溫后過濾。再用蒸餾水洗滌濾渣,合并濾液及洗液,用水定容至250mL,此溶液即為試樣總糖測試液。

2.2.2 總糖測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。分別吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 的 0.1mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液至10mL具塞刻度試管中,用蒸餾水補至1.0mL。向試管中加入 1.0mL 5%苯酚溶液,然后快速加入5.0mL濃硫酸,反應(yīng)液靜止放置10min。使用斡旋振蕩器使反應(yīng)液混合,然后將試管放置于30℃水浴鍋中反應(yīng)20min。取適量反應(yīng)液于分光光度計490nm處測吸光度值。

2.2.3 樣品測定。準(zhǔn)確吸取試樣總糖測試液0.2mL于10mL具塞試管中,用蒸餾水補至1.0mL,按上述標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法操作,以空白溶液調(diào)零,測吸光度值,繪制總糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(如上圖),以標(biāo)準(zhǔn)曲線換算總糖含量。

3 測定結(jié)果

表1 不同處理時間的吸光度變化

表2 不同處理時間的總糖百分含量 %

4 結(jié)論

有以上兩個表可知,提取時間對總糖測定有一定的影響,在一定范圍內(nèi),總糖含量隨提取時間的增長而增多,以提取3h為宜,而相同的處理時間超聲波提取效果次于水浴回流。所以食用菌總糖含量測定以水浴回流3h為最佳。

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