南京地區(qū)酸模屬藥用植物的顯微鑒別研究

王 艷,張朝鳳 ,張 勉

(中國(guó)藥科大學(xué)教育部現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室生藥學(xué)研究室,江蘇南京 211198)

蓼科酸模屬植物多可藥用,《中華本草》[1]收載了 11種藥用的酸模屬植物,習(xí)稱羊蹄或土大黃類藥材,多以根或全草入藥,在我國(guó)民間以止血和治療疥癬著稱,沿用已久?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其具有抗真菌、抗氧化、抗腫瘤等作用[2-3]。該屬植物在我國(guó)資源極為豐富,全國(guó)各地均有分布[4],王振月等[5]對(duì)毛脈酸模 Rum ex gm elinTurcz.等 8種酸模的根做了顯微鑒定研究,李小洪等[6]對(duì)齒果酸模 Rum ex dentatusL.等 5種酸模的葉進(jìn)行了顯微及理化鑒定研究。本文首次對(duì)南京地區(qū)的 5種酸模屬植物,即羊蹄 Rum exjaponicusHoutt.、網(wǎng)果酸模 Rum ex chalepensisMill.、長(zhǎng)刺酸模 Rum ex trisetiferStokes、齒果酸模 Rum ex dentatusL.、酸模 Rum ex acetosaL.的根與葉的顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究,為羊蹄或土大黃類藥材的顯微鑒別提供依據(jù)。其中,網(wǎng)果酸模、齒果酸模的根橫切面及酸模、羊蹄、長(zhǎng)刺酸模的葉橫切面的組織構(gòu)造特征均為首次報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 材料與方法

所有實(shí)驗(yàn)材料均采自南京,羊蹄 (S M20100001)采自南京方山,網(wǎng)果酸模 (S M20100002)、長(zhǎng)刺酸模(S M20100003)和齒果酸模 (S M20100004)采自中國(guó)藥科大學(xué)江寧校園;酸模 (S M20100005)采自南京紫金山。實(shí)驗(yàn)材料經(jīng)本人鑒定、導(dǎo)師張勉核定,憑證標(biāo)本存于中國(guó)藥科大學(xué)生藥學(xué)研究室。切片材料為新鮮材料,經(jīng) 70%乙醇固定,選取具有代表性、大小適中的根和葉按常規(guī)方法制作其橫切面石蠟切片,番紅 -固綠二重染色。制備好的切片,結(jié)合徒手切片,根據(jù)顯微鏡下觀察到的組織構(gòu)造特征進(jìn)行描述,采用數(shù)碼顯微技術(shù)成像,并對(duì)顯微圖片進(jìn)行適當(dāng)?shù)钠唇拥忍幚怼?/p>

1.2 試劑與儀器

切片石蠟 (54～56℃,上海標(biāo)本模型廠),番紅T(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司),固綠 FCF(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司),中性樹膠 (上海標(biāo)本模型廠),無水乙醇、二甲苯等試劑均為分析純 (南京化學(xué)試劑有限公司)。旋轉(zhuǎn)切片機(jī) (A.O.,USA),數(shù)碼顯微成像系統(tǒng) (Olympus BX51顯微鏡,DP50數(shù)碼成像工作站),電熱恒溫培養(yǎng)箱 (上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司 ),超聲波清洗器 (昆山市超聲儀器有限公司)。

2 結(jié) 果

2.1 根橫切面組織特征

羊蹄:木栓細(xì)胞數(shù)列,多萎縮或凋落;栓內(nèi)層為數(shù)列排列整齊的長(zhǎng)方形扁平小細(xì)胞。韌皮部寬度約為木質(zhì)部的 1/2,內(nèi)側(cè)韌皮束較為明顯;無韌皮纖維;草酸鈣簇晶多散在于外側(cè),直徑 25～45μm。形成層環(huán)狀。木質(zhì)部寬廣,導(dǎo)管多角形、類圓形或長(zhǎng)圓形,直徑約 25～100μm,常數(shù)個(gè)徑向排列,向內(nèi)導(dǎo)管漸少、漸小,多單個(gè)散在稀疏排列;木射線明顯,約6～30列細(xì)胞寬,為薄壁細(xì)胞;木纖維少見或無,木質(zhì)部中心處常有木栓化組織。無髓部。本種根薄壁組織中富含淀粉粒,淀粉粒中包埋有細(xì)小簇晶。(圖1-A)

網(wǎng)果酸模:本種根橫切面與羊蹄最為相似,主要區(qū)別為木質(zhì)部外側(cè)約 1/4部分木纖維發(fā)達(dá),向內(nèi)漸無木纖維;草酸鈣簇晶偶見。(圖1-B)

長(zhǎng)刺酸模:本種根橫切面與羊蹄的主要區(qū)別為,韌皮纖維束明顯,多分布于韌皮束外側(cè);木質(zhì)部外側(cè)約 1/3～1/4部分全部木化形成木化環(huán)帶;草酸鈣結(jié)晶細(xì)碎,稀疏散在;薄壁組織中無淀粉粒。(圖1-C)

齒果酸模:本種根常偏心,橫切面與羊蹄的主要區(qū)別為,韌皮纖維偶見;木質(zhì)部外側(cè)約 1/2部分全部木化形成木化環(huán)帶;薄壁組織中無淀粉粒。(圖1-D)

酸模:本種根橫切面較為特殊,與羊蹄的主要區(qū)別為,韌皮纖維常見,多單個(gè)散在;形成層不甚明顯;木質(zhì)部導(dǎo)管小且稀疏,排列成數(shù)個(gè)“V”形導(dǎo)管束;無木纖維;有髓部,髓周與導(dǎo)管束相對(duì)處有纖維束;薄壁組織中無草酸鈣結(jié)晶,但富含包埋有細(xì)小簇晶的淀粉粒。(圖1-E)

2.2 葉橫切面組織特征

羊蹄:上、下表皮均為 1列細(xì)胞,有的破碎而難以辨認(rèn)。葉肉柵欄組織為 1～2列短柱狀細(xì)胞,海綿組織細(xì)胞類圓形,葉肉組織中充滿大型草酸鈣簇晶,直徑 40～87μm,棱角尖銳。主脈橫切面類圓形,具6～9個(gè)瘤狀凸起,凸起的表皮內(nèi)側(cè)有數(shù)列厚角組織細(xì)胞;維管束外韌型,大小不等,17～24個(gè),其中 2～6個(gè)散在于中央部分,其余環(huán)列,均無纖維束;基本薄壁組織中散有眾多草酸鈣簇晶。(圖2-A)

網(wǎng)果酸模:本種葉橫切面特征與羊蹄最為相似,主要區(qū)別為主脈維管束少于羊蹄,為 8～14個(gè),其中1～3個(gè)散在于中央,其余環(huán)列。(圖2-B)

長(zhǎng)刺酸模:本種葉橫切面與上述 2種的區(qū)別較大,主要特征為:葉片為等面葉,上、下兩面均為柵欄組織,上面為 2列、下面為 1列短柱狀細(xì)胞,中間為2～3列排列較緊密的類圓形或多角形薄壁細(xì)胞,葉肉中草酸鈣簇晶有兩種類型,一種簇晶棱角尖銳,直徑 37～50μm,另一種簇晶為棱角不明顯的類圓形,直徑約至 25μm,;主脈橫切面呈不規(guī)則倒三角形,具 3～5個(gè)不甚明顯的突起,維管束 8～10個(gè),1個(gè)在中心,其余環(huán)列,環(huán)列的維管束外側(cè)或內(nèi)外兩側(cè)常有纖維束,中心的維管束無纖維束。(圖2-C)

圖1 五種酸模根橫切面組織圖

齒果酸模:本種葉橫切面 5長(zhǎng)刺酸模較相似,主要區(qū)別為,葉片為兩面葉,柵欄組織為 1～2列短柱狀細(xì)胞,海綿組織細(xì)胞排列松散,草酸鈣簇晶直徑55～125μm,多散在于海綿組織中;主脈略呈上寬下窄的不規(guī)則四邊形,維管束 7～8個(gè),1個(gè)在中心,其余環(huán)列;主脈和側(cè)脈木質(zhì)部導(dǎo)管內(nèi)壁常密集嵌有草酸鈣小方晶。(圖2-D)

酸模:本種葉橫切面與上述 4種的區(qū)別較大,主要特征為:柵欄組織為 1列寬窄不一的柱狀細(xì)胞,海綿組織細(xì)胞排列較緊密,草酸鈣簇晶直徑 50～75μm;主脈橫切面類矩形,維管束僅 4個(gè),大小懸殊,明顯可見的 2個(gè)大的維管束位于上、下表皮內(nèi)側(cè),2個(gè)小的維管束有時(shí)僅 1～2個(gè)導(dǎo)管而不易察見,位于兩側(cè)與 2個(gè)大的維管束相間排列。(圖2-E)

3 討 論

本研究的結(jié)果表明,酸模 (R.acetosa)的顯微特征與其他 4種有著明顯的區(qū)別,根的木質(zhì)部導(dǎo)管“V”形排列、具有髓部和環(huán)髓纖維,葉的主脈為 2大2小 4個(gè)維管束;而其他 4種酸模植物的根無髓部,葉的主脈維管束明顯多于酸模。從酸模屬系統(tǒng)分類[4]的角度來看,酸模隸屬于酸模亞屬,其余 4中隸屬于巴天酸模亞屬,組織構(gòu)造研究結(jié)果與該系統(tǒng)一致。

在巴天酸模亞屬的 4種植物中,羊蹄 (R.japonicus)和網(wǎng)果酸模 (R.chalepensis)的顯微特征比較相似,根的薄壁組織中都富含包埋有細(xì)小草酸鈣簇晶的淀粉粒、無韌皮纖維,葉片的組織構(gòu)造和主脈維管束的排列方式較為相近;長(zhǎng)刺酸模 (R.trisetifer)和齒果酸模 (R.dentatus)的顯微特征較為相似,根中木質(zhì)部外側(cè)都有木化環(huán)帶、薄壁組織都不含淀粉粒,葉主脈維管束數(shù)目及排列方式相近。該結(jié)果說明了羊蹄與網(wǎng)果酸模的親緣關(guān)系較近,長(zhǎng)刺酸模與齒果酸模的親緣關(guān)系較近,為本屬植物的系統(tǒng)分類學(xué)研究提供了解剖學(xué)方面的資料。

為了便于本研究結(jié)果在羊蹄或土大黃類藥材鑒定中的應(yīng)用,編制根和葉橫切面顯微特征檢索表如表1。

圖2 五種酸模葉橫切面組織圖

表1 酸模根和葉橫切面顯微特征檢索表

[1] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2000:722-737.

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[3] NabielA M S,Mohamed N E H,Raafat F M A.Flavonoids and Anthraquinones of some Egyptian Rumex Species(Polygonaceae)[J].Biochemical Systematics Ecology,1993,21(2):301-303.

[4] 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志:第 25卷第1分冊(cè)[M].北京:科學(xué)出版社,1998:156.

[5] 王振月,王艷芝,王 穎.八種酸模屬中草藥跟的顯微鑒定研究[J].中草藥,1999,30(11):855-858.

[6] 李小洪,呂居?jì)?李 延,等.5種酸模葉的顯微和理化鑒定[J].西北藥學(xué)雜志,1996,11:9-11.