毛細管氣相色譜法測定六神祛暑水中樟腦與薄荷腦的含量*

(廣東藥學院藥科學院，廣州 510006)

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：6820型,配FID檢測器、Aglient Cerity工作站，美國安捷倫公司；

樟腦(批號110747-200507)、薄荷腦(批號110728-200506)、環(huán)己酮內標物(批號111674-200401) 對照品：北京中國食品藥品檢定研究院；

六神祛暑水(批號DN5001～DN5010)：廣州星群(藥業(yè))有限公司；

乙醇等所有試劑均為分析純。

1.2 溶液制備

(1)對照品溶液制備

分別精密稱取樟腦對照品、薄荷腦對照品、內標物環(huán)己酮適量，各加70%乙醇，制成含樟腦1.011 mg/mL、薄荷腦0.996 8 mg/mL、環(huán)己酮1.790mg/mL的溶液。

(2)供試品溶液的制備

精密吸取六神祛暑水0.2 mL、1.790 mg/mL的環(huán)己酮內標溶液1 mL于10 mL容量瓶中，以70%乙醇定容。

第三，改變以往零散經(jīng)營、松散合作的簡單團隊協(xié)作方式，通過股份合作組建大型商業(yè)企業(yè)，運行現(xiàn)代企業(yè)管理制度。要把眾多中小閩商或以行業(yè)、或以地域為單位聯(lián)合起來，組建大型商業(yè)企業(yè)或商貿城，用現(xiàn)代企業(yè)形式實現(xiàn)互助合作共同經(jīng)營，把閩商的團隊協(xié)作納入現(xiàn)代企業(yè)管理，建立股權分散但經(jīng)營權集中的現(xiàn)代企業(yè)制度，有利于參與市場競爭，又避免自相競爭。這樣，閩商團隊協(xié)作就上升到現(xiàn)代企業(yè)制度和企業(yè)文化的高度。這需要政府出面協(xié)調運作，從金融服務、科技中介服務、投資環(huán)境服務、公共服務等多方面入手，整合閩商力量。

(3)陰性對照溶液的制備

按處方組成，取除樟腦、薄荷腦外的其余藥味，按1.2(2)方法操作制成不含樟腦、薄荷腦的六神祛暑水。

1.3 色譜條件

色譜柱：ZB-FFAP石英毛細管 (30 m×0.25 mm, 0.25 μm,)，美國Phenomenex公司；色譜柱升溫程序：起始溫度80℃，保持1 min，以8℃/min升至120℃，再以15℃/min升至180℃，保持2 min，然后以30℃/min升至220℃，保持3 min；氣化室及檢測器溫度均為250℃；載氣：氮氣，流量為1 mL/min；進樣量：1 μL；分流比：5∶1。

2 結果與討論

2.1 色譜圖

在1.3色譜條件下分別取樟腦對照品、薄荷腦對照品、內標物環(huán)己酮溶液的混合液，供試品溶液和陰性對照溶液進樣分析，色譜圖如圖1所示。

結果表明,樟腦理論塔板數(shù)不低于1.3×106，薄荷腦理論塔板數(shù)不低于2.0×106。供試品溶液中樟腦、薄荷腦、內標物環(huán)己酮峰形對稱性好且分離良好，與相鄰色譜峰的分離度高達43，陰性對照品溶液未見干擾。

2.2 內標物與升溫方式的選擇

與采用萘為內標物的分析方法相比[2]，內標物環(huán)己酮在樟腦、薄荷腦之前出峰，采用程序升溫，可以縮短分析時間且分離度符合藥典要求。

2.3 標準曲線與線性范圍

精密吸取一定體積樟腦對照品溶液，加入一定體積的環(huán)己酮溶液，配制成含樟腦0.040 44、0.101 1、0.202 2、0.303 3、0.505 5 mg/mL，均含環(huán)己酮0.179 0 mg/mL的70%乙醇對照品溶液。分別精密吸取1 μL上述溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件分別進行分析，測定其樟腦及環(huán)己酮峰面積，以樟腦濃度(c)為橫坐標，兩者峰面積之比(Ai/As)為縱坐標，繪制樟腦標準曲線。

1—環(huán)己酮(內標)； 2—樟腦； 3—薄荷腦a—對照品； b—供試品； c—陰性對照品圖1 氣相色譜圖

精密吸取一定體積薄荷腦對照品溶液，加入一定體積的環(huán)己酮溶液，配制成含薄荷腦對照品 0.049 84、0.099 68、0.149 5、0.199 4、0.249 2 mg/mL，均含環(huán)己酮0.179 0 mg/mL的70%乙醇對照品溶液。分別精密分別吸取1 μL上述溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件分別進行分析，測定其薄荷腦及環(huán)己酮峰面積，以薄荷腦濃度(c)為橫坐標，兩者峰面積之比(A薄/A環(huán))為縱坐標，繪制薄荷腦標準曲線。實驗表明，樟腦和薄荷腦分別在0.040 44～0.505 5 mg/mL、0.049 84～0.249 2 mg/mL范圍內線性關系良好，樟腦線性方程為A樟/A環(huán)=6.029c+0.122 6；薄荷腦線性方程為A薄/A環(huán)=6.592c+0.023 1；相關系數(shù)分別為0.999 9、0.999 4。

2.4 穩(wěn)定性試驗

取供試品溶液(批號DN51001)在室溫下放置，分別在0、1、2、3、4、5、6、24 h進行測定，測得樟腦與環(huán)己酮峰面積比平均值A樟/A環(huán)=1.535，相對標準偏差為2.0%；薄荷腦與環(huán)己酮峰面積比平均值A薄/A環(huán)=0.854 4，相對標準偏差為2.1%。測定結果在24 h內較穩(wěn)定。

2.5 重復性試驗

精密取同一批號(批號DN51001)樣品6份，按1.2(2)制備供試品溶液。取1 μL供試品溶液注入色譜儀，在1.3色譜條件下測定其樟腦及環(huán)己酮峰面積比和薄荷腦與環(huán)己酮峰面積比，代入標準曲線方程計算樣品中樟腦與薄荷腦的含量。樟腦平均含量為11.52 mg/mL，相對標準偏差為0.91%；薄荷腦的平均含量為6.180 mg/mL，相對標準偏差為1.4%，結果表明該方法重復性良好。

2.6 回收試驗

精密取同一批號(DN51001)的樣品0.1 mL 6份，分別加入樟腦對照品0.995 6 mg、薄荷腦對照品0.475 0 mg和適量的內標物環(huán)己酮，以70%乙醇定容于10 mL容量瓶。吸取1 μL該溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件進行測定，結果見表1。 樟腦平均回收率為99.18%，相對標準偏差為0.79%；薄荷腦平均回收率為99.65%，相對標準偏差為1.5%，結果表明本方法準確可靠。

表1 回收試驗結果

2.7 含量測定

取10個批號(DN51001～DN51010)的六神祛暑水樣品，按1.2(2)制備供試品溶液，吸取1 μL溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件測定，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果 mg/(5mL)

2.8 耐用性試驗

換用FFAP石英毛細管柱(30 m×0.25 mm, 0.50 μm，中科院蘭州化物所色譜技術研究開發(fā)中心)，按1.2(2)制備供試品溶液，在1.3色譜條件下進樣測定，計算的樟腦理論塔板數(shù)為2.6×105，薄荷腦理論塔板數(shù)為4.8×105,樟腦和薄荷腦的分離度為15.6。雖然塔板數(shù)和分離度比進口色譜柱差，但仍能滿足定量要求。

3 結語

實驗所建立的六神祛暑水中樟腦、薄荷腦的毛細管氣相色譜法簡便、快速、準確且重現(xiàn)性好，可用于六神祛暑水質量控制。

[1] 曾常青，郭敏儀，陳航萍.六神祛暑水的薄層鑒別研究[J]. 廣東藥學院學報，2007，3(23)：237.

[2] 何鳳云，黃芳，楊慧，等. 毛細管氣相色譜法測定樟腦薄荷柳酯乳膏中樟腦、薄荷腦和水楊酸甲酯[J]. 化學分析計量，2008，17(4)：54-55.

[3] 管玉云，程正.氣相色譜法測定婦炎靈膠囊中樟腦和冰片的含量[J]. 中國醫(yī)院藥學雜志，2007，27(1)：74-75.

[4] 杜凱，吳兵，王輝.氣相色譜法對驅風油中薄荷腦等4種有效成分的含量測定研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥，2009，20(10)：2 592-2 593.

[5] 周利賢，吳陳軍.氣相色譜法測定復方薄荷腦滴鼻液中樟腦及薄荷腦的含量[J]. 中國藥師，2004，7(6)：430-431.

[6] 林碧英.氣相色譜法測定蒸汽吸入劑中樟腦、薄荷腦的含量[J]. 海峽藥學，2004，16(6)：60-61.