草銨膦銨鹽的高效液相色譜分析

黃紅英 虞小華 王國(guó)超

（浙江省化工研究院有限公司，浙江 杭州 310023）

草銨膦（glufosinate）的化學(xué)名稱為：DL-甲基-（3-氨基-3-羧基丙基）膦酸銨；結(jié)構(gòu)式：

CAS：77182-82-2

草銨膦是拜耳公司研究開發(fā)的一種具有部分內(nèi)吸作用的非選擇性、觸殺性除草劑，是谷氨酰胺合成抑制劑，是高效、低毒、大噸位使用的旱地除草劑。廣泛應(yīng)用于果園、橡膠園及棕櫚園、觀賞性灌木、非耕地防除一年生和多年生的雙子葉及禾本科雜草，并可用于馬鈴薯田、森林和高山牧場(chǎng)等經(jīng)濟(jì)型作物。

草銨膦易溶于水，不易溶于有機(jī)溶劑，所以該品一般被加工成水劑，制劑有60、120、150和200g/L的水劑。由于高真空條件下制備的草銨膦銨鹽試樣極易吸水，為盡量減小試樣吸水造成的誤差，因此我們將試樣制成水劑再定量測(cè)定其含量，操作方便、準(zhǔn)確。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀：帶DAD230二極管陣列檢測(cè)器、EC2000 DAD數(shù)據(jù)處理工作站，色譜柱：Nucleosil SB 100-5，250/4.6。

水：二次蒸餾水，磷酸二氫鉀：分析純，磷酸：分析純

1.2 試驗(yàn)條件

流動(dòng)相：0.05M/L磷酸二氫鉀水溶液，調(diào)pH=3.5。

流速：1.3mL/min檢測(cè)波長(zhǎng)：195nm。

柱溫：30℃，進(jìn)樣量：25μL。

保留時(shí)間：5.5min。

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取草銨膦標(biāo)準(zhǔn)樣品約0.5g（精確至0.0001g）于50mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋，超聲溶解后定容，搖勻；用移液管準(zhǔn)確移液5mL、10mL、15mL、20mL至不同的四個(gè)50mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋定容，搖勻。

1.3.2 試樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱取草銨膦試樣水劑約2g（精確至0.0001g）于50mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋，超聲溶解后定容，搖勻。

1.3.3 測(cè)定方法

待儀器穩(wěn)定后進(jìn)草銨膦標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)進(jìn)樣，直到相鄰兩針有效組分面積相差小于1％，按標(biāo)樣、樣品、樣品、標(biāo)樣的順序進(jìn)樣。譜圖如圖1：

圖1 草銨膦銨鹽標(biāo)樣的高效液相色譜圖

圖2 典型草銨膦銨鹽試樣的高效液相色譜圖

1.3.4 計(jì)算方法

（1）試樣中草銨膦的質(zhì)量百分比含量按式（1）計(jì)算：

式中：M1——標(biāo)樣的質(zhì)量，g

M2——試樣的質(zhì)量，g

A1——標(biāo)樣中草銨膦的峰面積

A2——試樣中草銨膦的峰面積

P——標(biāo)樣中草銨膦的質(zhì)量百分含量，％

（2）反應(yīng)收率按式（2）計(jì)算：

式中：ML——反應(yīng)所得的理論質(zhì)量，g

M——試樣水劑的質(zhì)量，g

Y——反應(yīng)收率，％

1.3.5 測(cè)定結(jié)果

試樣中草銨膦的質(zhì)量百分比含量測(cè)定結(jié)果以及計(jì)算反應(yīng)收率，見表1。

表1 試樣中草銨膦的含量測(cè)定結(jié)果及收率

2 方法驗(yàn)證

2.1 線性關(guān)系曲線驗(yàn)證

分別將上述4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液按照上述測(cè)定條件，測(cè)定響應(yīng)的響應(yīng)值，結(jié)果見表2；并以濃度為橫坐標(biāo)，響應(yīng)值（峰面積）為縱坐標(biāo)作圖，在1.0020～4.0080mg/mL濃度范圍內(nèi)得到一條通過原點(diǎn)的直線，其線性關(guān)系方程為Y=725.65170X-1.45000，線性相關(guān)系數(shù)為0.99999，見圖3。

表2 草銨膦標(biāo)樣線性關(guān)系

圖3 草銨膦標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 精密度驗(yàn)證

按照上述方法，分別對(duì)69#樣品、標(biāo)樣進(jìn)行5次平行測(cè)定，69#樣品標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.1168，變異系數(shù)為2.086％，見表3；標(biāo)樣標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2048，變異系數(shù)為0.2151％，見表4。

表3 草銨膦樣品精密度測(cè)定結(jié)果

表4 草銨膦標(biāo)樣精密度測(cè)定結(jié)果

2.3 準(zhǔn)確度驗(yàn)證

在已知含量的草銨膦樣品中，分別加入一定量的草銨膦標(biāo)樣，按照上述方法分別測(cè)定草銨膦的含量，并計(jì)算回收率，結(jié)果見表5。

表5 草銨膦樣品回收率的測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

本法以0.05mol/L磷酸二氫鉀水溶液為流動(dòng)相、調(diào)pH值至3.5，流速為1.3mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為195nm，柱溫30℃，將草銨膦銨鹽粗品制成水劑后采用高效液相色譜分析定量測(cè)定有效成分含量，并計(jì)算反應(yīng)收率。線性相關(guān)系數(shù)為0.99999，5.6％的草銨膦水劑標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.1168，變異系數(shù)為2.086％，草銨膦標(biāo)樣標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2048，變異系數(shù)為0.2151％，草銨膦樣品回收率98.1％～101.06％。該法線性良好，具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，是一條較理想的草銨膦分析方法。

［1］次素英，郝立根，何雙艷.草銨膦銨鹽的高效液相色譜測(cè)定［J］.農(nóng)藥，2008，47（5）：354-355.

［2］李維宏，羅靜，王高升.草銨膦原藥的高效液相色譜分析［J］.浙江化工，2009，40（11）：24-26.