甌柑橘和柑橘皮類黃酮、水、醇提取液對離體蛙心的作用

馬 森 沈明華

（1.武夷學(xué)院茶學(xué)與生物系—福建省高校綠色化工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 武夷山 354300；2.青海大學(xué) 農(nóng)牧學(xué)院 動(dòng)物醫(yī)學(xué)系，青海 西寧，810016）

甌柑橘和柑橘皮類黃酮、水、醇提取液對離體蛙心的作用

馬 森1沈明華2

（1.武夷學(xué)院茶學(xué)與生物系—福建省高校綠色化工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 武夷山 354300；2.青海大學(xué) 農(nóng)牧學(xué)院 動(dòng)物醫(yī)學(xué)系，青海 西寧，810016）

以1mg/ml的柑橘和甌柑橘皮類黃酮溶液、1%的柑橘皮和甌柑橘皮水、乙醇提取液各0.1mL加入離體蛙心灌流液，結(jié)果使蛙心收縮力分別提高 101.3±49.6（% ），94.0±25.2（% ），81.4±38.5（% ），93.9±34.0（% ），150.3±117.8（% ），165.1±113.5（% ）；心率分別降低 19.8±31.9（% ），22.1±22.3（% ），28.0±16.2（% ），28.5±20.8（% ），19.3±14.2（% ），23.0±24.3（% ）（均P＜0.05）。說明柑橘和甌柑橘類黃酮、柑橘皮和甌柑橘皮的水、醇提取液對離體蛙心均有增強(qiáng)心肌收縮力和減慢心率作用，各藥物的持續(xù)時(shí)間在2～12min之間。

柑橘皮；甌柑橘皮；類黃酮；水提取液；醇提取液；離體蛙心灌流

柑橘皮即傳統(tǒng)中藥陳皮，有理氣、健脾、燥濕、化痰的功能。柑橘類果實(shí)、果皮中含豐富的黃酮類化合物、香精油、天然色素、維生素 A、C、E等；據(jù)報(bào)道，黃酮類化合物有抗氧化、抗衰老、降低毛細(xì)血管通透性、治療毛細(xì)血管損傷、抑制血小板凝集、降血脂、降血壓、防止心腦血管疾病、抗炎、抗過敏、強(qiáng)心、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗菌、抗病毒等多種作用；還有抗癌、抗突變、抑制腫瘤等作用[1-9]。“甌柑橘”為柑桔屬的栽培變種，原產(chǎn)浙南，又名苦橘，果實(shí)金黃鮮艷，清甜多汁，略帶苦味，營養(yǎng)價(jià)值較高，具有祛熱生津、化痰、止咳、清涼解毒等功效，民間有“端午甌柑似羚羊”之說，歷史上為皇家貢品；臨床研究甌柑對高血壓等癥狀有一定食療作用，對其藥理作用報(bào)道甚少[10-12]。甌柑橘已在福建南平市引種成功，為進(jìn)一步開發(fā)其橘皮的藥用作用，本實(shí)驗(yàn)研究了甌柑橘皮的水、醇浸提液和從甌柑橘皮中提取的類黃酮對離體蛙心的作用，并與陳皮進(jìn)行比較，結(jié)果如下。

1 材料與方法：

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物：牛蛙10只，市購。

1.2 試驗(yàn)材料與制備方法；柑橘市購，甌柑橘由南平坎下果場提供。橘皮均用蒸餾水洗凈，烘干，粉碎過40目篩。柑橘和甌柑橘皮中黃酮類用乙醇法提取，使用時(shí)以50%乙醇配成濃度1mg/ml的溶液。柑橘和甌柑橘皮的1%醇浸提液：10g橘皮粉加50%乙醇100ml勻漿，勻漿液濾紙過濾備用；柑橘和甌柑橘皮的1%水浸提液：10g橘皮粉加重蒸水100m l勻漿，勻漿液用鹽酸調(diào)pH至3-4，離心沉淀蛋白，上清液再用氫氧化鈉調(diào)pH至7.0備用。

1.3 儀器與試驗(yàn)方法：成都泰盟科技有限公司的BL-420F生物技能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)；按常規(guī)制備離體蛙心，用蛙心夾連接至張力傳感器，調(diào)節(jié)系統(tǒng)增益使正常蛙心收縮高度為20mm、時(shí)間常數(shù)為0.01s、掃描速度為1.0ms/div、濾波為10KHz，記錄正常蛙心收縮曲線后，分別加入50%乙醇、柑橘和甌柑橘皮類黃酮溶液、1%的水浸提液和醇提取液各0.1ml，記錄蛙心收縮力（以高度mm表示）和心率（次/min）變化。每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)后用任氏液充分清洗，至蛙心收縮恢復(fù)正常后進(jìn)行下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和處理：實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)各組的蛙心收縮力、心率及變化率的，類黃酮溶液和醇提取液的測定結(jié)果中校正50%乙醇的作用，實(shí)驗(yàn)前后差異用配對的t檢驗(yàn)或秩次檢驗(yàn)，組間差異用方差分析檢查，SSR法多重比較。

2 結(jié)果

乙醇、柑橘和甌柑橘皮類黃酮、水和醇提取液對離體蛙心收縮力和心率的作用見表1和圖1-7，作用持續(xù)時(shí)間見表2。

表1.柑橘和甌柑橘皮黃酮類、水和醇提取液對離體蛙心的作用測定結(jié)果（n，）

表1.柑橘和甌柑橘皮黃酮類、水和醇提取液對離體蛙心的作用測定結(jié)果（n，）

注：※和給藥前相比差異顯著（P＜0.05），※※和給藥前相比差異極顯著（P＜0.01），

分 組 n給藥前蛙心給藥后蛙心 收縮力 給藥前蛙心給藥后蛙心 心率變收縮力(mm)收縮力(mm) 變化(%) 率(次/min)率(次/min) 化(%)50% 乙醇 320 .5±1.014 .5±1.3※※ －29.3±6.5 35.0±2.734 .3±2.1 －2.0±2.5柑橘類黃酮溶液421 .8±3.943 .5±10.9※ 101.3±49.6 26.5±6.519 .8±3.8※ －19.8±31.9甌柑類黃酮溶液418 .3±2.135 .8±8.4※ 94.0±25.2 26.0±4.719 .5±2.4※ －22.1±22.3柑橘皮水提取液418 .5±3.034 .0±10.7※ 81.4±38.5 35.8±4.725 .8±6.7※ －28.0±16.2甌柑皮水提取液418 .8±2.136 .8±9.7※ 93.9±34.0 31.0±7.421 .3±4.6※ －28.5±20.8柑橘皮醇提取液419 .8±0.551 .5±20.8※ 150.3±117.8 37.0±3.629 .8±4.8※ －19.3±14.2甌柑皮醇提取液419 .8±0.552 .0±21.0※ 165.1±113.5 36.3±3.127 .8±8.5※ －23.0±24.3

表2.柑橘和甌柑橘皮黃酮類、水和醇提取液對離體蛙心的作用時(shí)間（min，全距）

圖1.50%乙醇作用

圖2.柑橘皮類黃酮對蛙心的作用

圖3.甌柑皮類黃酮對蛙心的作用

圖4.柑橘皮水提取液對蛙心的作用

圖5.甌柑皮水提取液對蛙心的作用

圖6.柑橘皮醇提取液對蛙心的作用

圖7.甌柑皮醇提取液對蛙心的作用

3 分析與討論

3.1 由表1測定結(jié)果見50%乙醇使蛙心收縮力顯著增加（P＜0.01），而對心率并無顯著影響（P＞0.05），持續(xù)時(shí)間在2.3～11.7min之間。所以柑橘和甌柑橘皮類黃酮溶液、乙醇提取液的實(shí)驗(yàn)結(jié)果均進(jìn)行校正，除去乙醇溶液的影響。

3.2 由表1測定結(jié)果見1mg/m l的柑橘和甌柑橘皮類黃酮溶液、1%的柑橘皮和甌柑橘皮水、乙醇提取液使蛙心收縮力分別提高 101.3±49.6（% ），94.0±25.2（% ），81.4±38.5 （% ），93.9±34.0 （% ），150.3±117.8 （% ），165.1±113.5（% ）；心率分別降低 19.8±31.9（% ），22.1±22.3 （% ），28.0±16.2 （% ），28.5±20.8 （% ），19.3±14.2（% ），23.0±24.3（% ）（均 P＜0.05）。說明柑橘和甌柑橘類黃酮、柑橘皮和甌柑橘皮的水、醇提取液對離體蛙心均有增強(qiáng)心肌收縮力和減慢心率作用，各藥物的持續(xù)時(shí)間在2～12min之間。蛙心收縮力和心率變化在柑橘和甌柑橘兩組間，在類黃酮、水、醇提取液各組間均無顯著差異；各藥物持續(xù)時(shí)間也無顯著差異 （均P＞0.05）

3.3 關(guān)于陳皮及提取物對心臟作用的實(shí)驗(yàn)資料甚少，據(jù)趙雪梅等報(bào)道，柑桔屬庚甲氧基黃酮降低紅細(xì)胞聚集和沉降，對小鼠心肌產(chǎn)生收縮作用[8]。據(jù)沈明勤等報(bào)導(dǎo)，以250、500、1000mg/kg劑量給大鼠靜注陳皮水溶性總生物堿，收縮壓上升53%，維持4min，心率先減少，后顯著增加，9min后恢復(fù)正常[13]；給貓靜注陳皮制劑后，血壓迅速上升，脈壓差增加，心輸出量增加，左室內(nèi)壓及其最大上升速率均明顯上升，而左室舒張末期壓則有明顯下降。心臟指數(shù)、心搏指數(shù)、每搏心輸出量、左室作功指數(shù)均明顯上升；而血管總外周阻力在給藥后1～2min內(nèi)上升，5min后則明顯下降，反映心肌耗氧指標(biāo)的TTI值在給藥后3min內(nèi)也明顯增加，上述作用時(shí)間一般在給藥后瞬間至5min時(shí)，10min后則基本恢復(fù)或接近正常；動(dòng)物的心率在給藥后瞬間略有減少[14]。據(jù)歐立娟等報(bào)導(dǎo)，陳皮對心臟有興奮作用，能增強(qiáng)心肌收縮力，擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，升高血壓。靜脈注射陳皮水提取物，可顯著增加實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的心肌收縮力和心輸出量，升高大鼠血壓達(dá)55%，維持時(shí)間4min，并可短暫增加心肌耗氧量[15]。本試驗(yàn)結(jié)果蛙心收縮力和心率變化、持續(xù)時(shí)間和上述報(bào)道基本一致。

3.4 關(guān)于甌柑皮黃酮及提取物對心臟作用的實(shí)驗(yàn)資料更少，上海醫(yī)藥工業(yè)研究院藥理試驗(yàn)結(jié)果，甌柑果汁粉末對對麻醉大鼠正常血壓有不同程度的降壓作用，給藥3Os左右出現(xiàn)瞬間一次性的血壓升降，恢復(fù)至正常水平后繼續(xù)慢慢下降，大約在5min左右血壓降到最低值，降壓約40～60（%）左右，最低血壓維持時(shí)間2O～40min之間，以后逐漸回升到正常。對豚鼠離體心臟能顯著增加冠脈流量[11]。王笑蓉等報(bào)導(dǎo)甌柑苦味物質(zhì)是新陳皮甙和柚皮甙，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明甌柑有明顯的降溫、降壓、擴(kuò)張冠狀血管及耐缺氧作用[12]。本文實(shí)驗(yàn)證明甌柑皮類黃酮及水和醇提取物對蛙心均有與陳皮同樣的增強(qiáng)收縮力和減慢心率作用。

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Effect of Flavonoids，Extractive Liquit by Water，Extractive Liquit by Ethanol in Peel of Orange and Peel of Citrus Suavissima in Vitro Frog Heart

MA Sen1SHEN Minghua2

（1.Tea science&Biology Department of Wuyi University— Fujian University Key Laboratory for Green-chemical Engineering Technology，Wuyishan,Fujian，3543002 .Animal Medical Department of Qinghai University，Xining Qinghai810016）

In vitro frog heart perfussionning wasmaked with bullfrogs.1mg/m l solution of flavonoids，extractive liquit by water，extractive liquitby ethanol in peel of orange and peel of citrus suavissima 0.1mL were added into perfussionning solution respectivily.The results were shown as follows：the cardiac contractility had been increased 101.3±49.6（% ），94.0±25.2（% ），81.4±38.5（% ），93.9±34.0（% ），150.3±117.8（% ），165.1±113.5（% ），The heart rate had been decreased 19.8±31.9（% ），22.1±22.3（% ），28.0±16.2（% ），28.5±20.8（% ），19.3±14.2（% ），23.0±24.3 （% ）respectivily （P>0.05）.The results proved that they had effect of increasing cardiac contractility and decreasing heart rate，these medications keeping action 2～12min.

peel of orange;peel of citrus suavissima;flavonoids;extractive liquit by water;extractive liquit by ethanol;in vitro frog heart perfussion

R285.5

A

1674－2109(2011)02－0016－04

2011-01-13

福建省教育廳《甌柑橘類黃酮的提取及藥理作用研究》（項(xiàng)目編號JA08247）。

馬森（1947-），男，漢，教授，研究方向：生物化學(xué)。