獨(dú)角蓮微粉揮發(fā)性成分研究

彭 廣,劉建華,汪凱莎,丁麗娜,劉文煒＊

1貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,貴陽(yáng) 550025;2貴州省生物技術(shù)研究開(kāi)發(fā)基地,貴陽(yáng) 550002

獨(dú)角蓮微粉揮發(fā)性成分研究

彭 廣1,2,劉建華2,汪凱莎1,2,丁麗娜1,2,劉文煒2＊

1貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,貴陽(yáng) 550025;2貴州省生物技術(shù)研究開(kāi)發(fā)基地,貴陽(yáng) 550002

本文利用水蒸氣蒸餾法提取獨(dú)角蓮中的揮發(fā)性成分,用 GC-MS進(jìn)行測(cè)定,色譜柱為 HP-5MS 5%Phenyl Methyl Siloxane彈性石英毛細(xì)管柱 (30 m×0.25 mm×0.25μm),結(jié)合計(jì)算機(jī)檢索技術(shù)對(duì)分離的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,應(yīng)用色譜峰面積歸一化法計(jì)算各成分的相對(duì)百分含量。獨(dú)角蓮微粉中分離并鑒定出 31個(gè)化學(xué)成分,檢出率為 91.571%,其中相對(duì)百分含量大于 2.0%分別確定為己醛 (Hexanal)21.485%,2-庚醇 (2-Heptanol) 14.363%,1-辛烯-3-醇(1-Octen-3-ol)10.911%,樟腦 (Camphor)6.136%,2-正戊基呋喃 (2-Pentylfuran)3.603%,菲 (Phenanthrene)3.549%,異丁基鄰苯二甲酸酯 (Isobutyl phthalate)3.549%,乙酸龍腦酯 (Bornyl acetate) 3.176%,3,8-Dimethyl-5-(1-methylethylidene)-1,2,3,4,5,6,7,8-octahydroazulene-6-one 3.002%,芫妥醇 (Linalool L)2.048%。除己醛和壬醛外其余 29個(gè)揮發(fā)性成分均為首次從該植物中得到。

獨(dú)角蓮;水蒸氣蒸餾;揮發(fā)性成分;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

獨(dú)角蓮 (Typhonium giganteumEngl)為天南星科(Araceae)犁頭尖屬 (TyphoniumSchott)植物的干燥塊莖,在商品中稱為禹白附,《中國(guó)藥典》2005版中收錄名稱為白附子;其為常用中藥,秋季采挖,除去須根及外皮,曬干。該植物分布于全國(guó)大部分地區(qū),生于陰濕的林下、山間、水溝及莊稼地,常有栽培;主產(chǎn)于河南、甘肅、湖北等地。本品辛、甘,大溫;歸胃、肝經(jīng),解毒散結(jié)。用于中風(fēng)痰壅,口眼歪斜,偏正頭痛,風(fēng)濕熱痹,破傷風(fēng),抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié);外治毒蛇咬傷,瘰疬,跌打損傷[1-3]。本文采用水蒸氣蒸餾法,從獨(dú)角蓮干燥塊莖中提取了揮發(fā)油,并用氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用系統(tǒng)對(duì)其揮發(fā)油化學(xué)組成進(jìn)行了定性定量研究。分析鑒定了 31個(gè)化學(xué)成分。

1 儀器與材料

1.1 儀器

美國(guó)惠普公司 HP-6890/HP5973 GC-MS氣質(zhì)聯(lián)用儀;HP-5MS5%Phenyl Methyl Siloxane彈性石英毛細(xì)管柱 (30 m×0.25 mm×0.25μm);SYFM-8II型超微粉碎機(jī)(濟(jì)南松岳機(jī)器有限責(zé)任公司)。

1.2 試劑與材料

正己烷(重蒸餾)、無(wú)水硫酸鈉均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?。?dú)角蓮藥材購(gòu)自貴州仙龍飲片藥業(yè)有限公司,由貴州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院關(guān)萍教授鑒定為天南星科植物獨(dú)角蓮 (Typhonium giganteumEngl)的干燥塊莖。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 樣品供試液的制備

取過(guò) 200目篩的獨(dú)角蓮干燥塊莖微粉 50 g,加入蒸餾水 2000 mL,正己烷 4 mL,充分搖勻,進(jìn)行水蒸氣蒸餾,得油狀物 1.3 mL(含正己烷),用無(wú)水硫酸鈉干燥,作為供試品。

2.2 獨(dú)角蓮揮發(fā)油定性定量分析

取獨(dú)角蓮微粉有機(jī)溶劑萃取物 1μL,進(jìn)樣,用GC-MS進(jìn)行測(cè)定。

氣相色譜條件:色譜柱為 HP-5MS 5%Phenyl Methyl Siloxane彈性石英毛細(xì)管柱 (30 m×0.25 mm ×0.25μm)。柱溫 50℃,保留 2 min,然后以 5℃/ min升溫至 300℃,保持 15 min;氣化室溫度 250℃;載氣為高純度氦氣 (99.999%);柱前壓 7.62 psi,載氣流量 1.0 mL/min;進(jìn)樣量 1μL;分流比 20∶1。

質(zhì)譜條件:EI離子源;離子源溫度 230℃;四極桿溫度 150℃;電子能量 70 eV;發(fā)射電流 34.6μA;倍增器電壓 1071 V;接口溫度 280℃;質(zhì)量范圍 10～550 amu。

定性分析:通過(guò) HP MSD化學(xué)工作站檢索Nist05標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)和 W ILEY275質(zhì)譜圖庫(kù),同時(shí)結(jié)合有關(guān)質(zhì)譜圖文獻(xiàn)解析,以確認(rèn)獨(dú)角蓮微粉揮發(fā)性物質(zhì)的化學(xué)成分。

定量分析:并通過(guò) HP MSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),按峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算,求出各化學(xué)成分的峰面積相對(duì)百分含量。

3 結(jié)果

獨(dú)角蓮微粉化學(xué)成分圖譜及各化學(xué)成分的峰面積相對(duì)百分含量見(jiàn)圖 1,表 1。

圖1 獨(dú)角蓮微粉揮發(fā)性物質(zhì) GC-MS圖譜Fig.1 GC-MS chromatogram of volatile constituents from the micronised powder ofT.giganteum

表 1 獨(dú)角蓮微粉中檢出的揮發(fā)性成分及峰面積相對(duì)百分含量Table 1 Percentage composition of the volatile constituents from the micronized powder ofT.giganteum

13 11.10 3-Octen-2-one 3-辛烯-2-酮 C8H14O 126 0.643 14 11.67 Octenal辛烯醛 C8H14O 126 0.837 15 12.97 LinaloolL芫妥醇 C10H18O 154 2.048 16 13.07 Nonanal壬醛 C9H18O 142 1.676 17 14.27 Camphor樟腦 C10H16O 152 6.136 18 14.94 BorneolL左旋莰醇 C10H18O 154 1.339 19 15.14 Menthol薄荷腦 C10H20O 156 1.430 20 15.42 Naphthalene萘 C10H8 128 0.559 21 18.33 Bornyl acetate乙酸龍腦酯 C12H20O2 196 3.176 22 19.14 (E,E)-2,4-Decadienal反式-2,4-癸二烯醛 C10H16O 152 1.816 23 21.92 β-Caryophylleneβ-石竹烯 C15H24 204 1.148 24 24.47 δ-Cadineneδ-蓽澄茄烯 C15H24 204 1.740 25 26.73 α-Asaroneα-細(xì)辛醚 C12H16O3 208 0.682 26 28.18 3,8-Dimethyl-5-(1-methylethylidene)-1,2,3,4,5,6,7,8-octahydroazulene-6-one C15H22O 218 3.002 27 30.23 Phenanthrene菲 C14H10 178 3.549 28 32.02 Isobutyl phthalate異丁基鄰苯二甲酸酯 C16H22O4 278 3.549 29 33.88 Butyl phthalate丁基鄰苯二甲酸酯 C16H22O4 278 1.912 30 34.44 Ethyl palmitate棕櫚酸乙酯 C18H36O2 284 0.857 31 37.53 Ethyl linoleate亞油酸乙酯 C20H36O2 308 0.691

4 討論

在獨(dú)角蓮干燥塊莖微粉揮發(fā)性成分的實(shí)驗(yàn)研究中,共提取并檢測(cè)出 31個(gè)化學(xué)成分,占揮發(fā)油總量的 91.571%,且其各化合物的相似度均大于 90%。其中相對(duì)百分含量較高即大于 2%的成分有 10個(gè),分別為含量最高的己醛(Hexanal)21.485%,其下依次為 2-庚醇 (2-Heptanol)14.363%,1-辛烯-3-醇 (1-Octen-3-ol)10.911%,樟腦 (Camphor)6.136%,2-正戊基呋喃 (2-Pentylfuran)3.603%,菲 (Phenanthrene) 3.549%,異丁基鄰苯二甲酸酯 (Isobutyl phthalate) 3.549%,乙酸龍腦酯 (Bornyl acetate)3.176%,3,8-Dimethyl-5-(1-methylethylidene)-1,2,3,4,5,6,7,8-octahydroazulene-6-one 3.002%,芫妥醇 (Linalool L) 2.048%。從分析結(jié)果可知,脂肪族化合物含量占63.982%,芳香族化合物只占 10.068%,而萜類化合物占 17.521%。在其萜類化合物中有 3種成分為倍半萜,其余 6種成分均為單貼類化合物;這些萜類化合物幾乎都具有重要的藥用價(jià)值與廣泛應(yīng)用于香料等化工合成原料,如樟腦與薄荷腦的應(yīng)用非常普遍常見(jiàn);檸檬烯具有很好的抗癌作用,β-石竹烯又具有較好的抗炎效果,莰醇即龍腦則具有鎮(zhèn)痙、驅(qū)蟲(chóng)及祛痰等藥理作用;另外,奧類化合物又多具抑菌、抗腫瘤以及殺蟲(chóng)等生物活性[4]。但是,其揮發(fā)油成分特別是萜類豐富的藥用價(jià)值還有待進(jìn)一步深入研究。

本實(shí)驗(yàn)所采取的揮發(fā)油測(cè)定方法為普遍應(yīng)用的氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用技術(shù),但在采用水蒸汽提取揮發(fā)油的過(guò)程中所采用的為正己烷,而非相關(guān)文獻(xiàn)上[5,6]所利用的乙醚。通過(guò)此方法提取檢測(cè)出的獨(dú)角蓮揮發(fā)油成分與相關(guān)文獻(xiàn)記錄的獨(dú)角蓮葉及生塊莖中的差別較大,除己醛與壬醛外的其余 29個(gè)揮發(fā)性化合物為首次從該藥材中提取分離出來(lái)。本文通過(guò)對(duì)獨(dú)角蓮揮發(fā)性成分的提取分析鑒定及相對(duì)含量測(cè)定,為深度利用獨(dú)角蓮植物資源提供科學(xué)依據(jù)。

1 Compiling Group of Traditional and Herb Medicine of China (中華本草編委會(huì)).Traditional and HerbMedicine of China(中華本草).Shanghai:Shanghai Science and Technology Publishing House,1999,(8):530.

2 National Pharmacopoeia Commission(國(guó)家藥典委員會(huì)).Ch P(中國(guó)藥典),2005.70.

3 Hu CX(胡長(zhǎng)效),Zhu J(朱靜),Sun XJ(孫小靜).Development of the research on chemical constituents and its pharmacological effects ofTyphonium giganteumEngl.Agric Tech (農(nóng)業(yè)與技術(shù)),2007,27(2):50-54.

4 WuLJ(吳立軍).NatMed Chem(天然藥物化學(xué)).Beijing: People'sMedical Publishing House,2005.236.

5 Sun QL(孫啟良),Wei YD(衛(wèi)永第),Yang YD(楊雨?yáng)|). Analysis on chemical constituents of volatile oil in the leaves ofTyphonium giganteumEngl by GC-MS.Chin Phar m J(中國(guó)藥學(xué)雜志),1995,30:572.

6 Li J(李靜),Wei YD(衛(wèi)永第),ChenWX(陳瑋瑄),et al. Study on chemical constituents of volatile oil in the rhizome ofTyphonium giganteumEngl.J Jilin AgricUniv(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)),1996,18(2):29-31.

Volatile Constituents from theM icronized Powder ofTyphonium giganteumEngl

PENG Guang1,2,L IU Jiang-hua2,WANG Kai-sha1,2,D ING Li-na1,2,L IU Wen-wei2＊1The Life Science College of Guizhou University,Guiyang 550025,China;2Guizhou Institute of B iotechnology Research and Developm ent,Guiyang 550002,China

In order to study the volatile constituents fromTyphonium giganteumEngl,the essential oil of the plants was extracted by hydrodistillation and analyzed by GC-MS equippedwith a elastic quartz capillary column-HP-5MS5%Phenylmethyl siloxane(30 m×0.25 mm×0.25μm).The constituentswere identified by theirmass spectra.The relative percentages of the volatile constituentswere calculated from the GC peak areas.Thirty-one compounds were separated and identified from the oil accounting for 91.571%.The constituentswith relative contents more than 2%were determined as hexanal(21.485%),2-heptanol(14.363%),1-octen-3-ol(10.911%),camphor(6.136%),2-pentylfuran (3.603%),phenanthrene(3.549%),sobutyl phthalate(3.549%),pornyl acetate(3.176%),3,8-dimethyl-5-(1-methylethylidene)-1,2,3,4,5,6,7,8-octahydroazulene-6-one(3.002%),linalool L(2.048%).Except for hexanal and nonanal,the other 29 constituentswere reported from this plant for the first time.

Typhonium giganteumEngl;hydrodistillation;volatile constituents;GC-MS

1001-6880(2010)06-1045-04

2009-01-14 接受日期:2009-04-09

貴州中藥材揮發(fā)性成分的研究(黔省專合字 (2005)75號(hào))

＊通訊作者 Tel:86-851-5713626;E-mail:KHLiuwenwei@163.com

R284.1;Q946.91

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